李淑珍
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 从大鼠肺灌洗液中分离纯化培养卡氏肺孢子虫被引量：3
- 2007年
- 目的建立卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carinii,P．c)纯培养株。方法从肺孢子虫肺炎(PCP)大鼠模型离体肺脏的灌洗液中分离P.c,用改良IMDM培养基进行体外培养;以四胺银染色计数法观察虫体增殖情况;用PCR扩增培养物中P．c线粒体大亚基rRNA基因,进行基因鉴定;用透射电镜观察培养虫体的超微结构。结果用添加s-腺苷甲硫氨酸(SAM)等辅助剂的IMDM培养基从8只PCP大鼠的肺灌洗液中分离出5个Pc纯培养株(P.c Rat1-5)。分离培养的P.c可进行冷冻保存和复苏培养。培养72 h的P.c包囊可增殖19～22倍。形态、超微结构及基因序列分析证实从大鼠肺灌洗液中分离出的培养物是大鼠源性肺孢子虫。结论从大鼠肺灌洗液中分离培养出5株大鼠源卡氏肺孢子虫。
- 黄敏君安亦军李淑珍卢思奇郭增柱
- 关键词：卡氏肺孢子虫分离株
- 中国耶氏肺孢子虫基因型的初步分析
- 2007年
- 为研究我国耶氏肺孢子虫的基因分型，利用巢式PCR方法扩增24例肺孢子虫肺炎（PCP）患者支气管肺泡灌洗液中的耶氏肺孢子虫（Pneumocystis jiroveci）核糖体DNA内转录间隔区（ITS1-5.8S rDNA-ITS2）基因。纯化回收目的片段，将其克隆到PMD18-T载体，并导入JM109细胞系中，每个标本制备3～5个克隆，提取质粒测序。从19例患者的标本中检出ITS1-5.8SrDNA-ITS2基因，其中12份标本的25个克隆的测序结果可用于基因分型。经与Lee等（1998）的分型标准进行比对，本组病例耶氏肺孢子虫的ITS1分为B、E、I、N4型，最常见的为E型；ITS2分为a、b、e、h、i、n6型，最常见的为i型；ITS基因分9型，以Bi多见，有2份标本存在混合感染。
- 李淑珍黄敏君安亦军卢思奇郭增柱
- 关键词：肺孢子虫核糖体DNA内转录间隔区基因型
- 中国人源肺孢子菌的系统发育研究
- 2009年
- 目的以ITS1和ITS2基因对中国人源肺孢子菌进行系统发育研究。方法用巢式PCR扩增24例肺孢子菌肺炎(PCP)患者肺泡灌洗液(BALF)中人源肺孢子菌ITS1-5.8S rRNA-ITS2基因,其中包括2株纯培养菌株Pt1和Pt2,分别分离自抗中性粒细胞胞质(ANCA)相关小血管炎合并PCP患者和肾移植合并PCP患者的BALF标本;克隆测序后与GenBank已知序列比对,将多个克隆序列完全相同的标本用于分子系统发育研究。结果进化距离矩阵分析显示,肺孢子菌属内成员间的差异大于克鲁维酵母菌属和曲霉菌各自属内成员间的差异;系统发育树显示,肺孢子菌归属子囊菌门,人和狐猴源肺孢子菌聚为一组,bootstrap值达95%;4种鼠类肺孢子菌聚为一组,bootstrap值达100%。结论肺孢子菌之间的差异是"种"而非"株"的差异,本组比对的肺孢子菌大致分为2组,人和狐猴源肺孢子菌为一组,4种鼠源肺孢子菌为另一组。
- 孙岚李淑珍黄敏君安亦军郭增柱
- 关键词：肺孢子菌系统发育
- 人源肺孢子虫纯培养株的建立及基因鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的建立人源肺孢子虫(Pneumocystis jiroveci,Pj)纯培养株。方法从肺孢子虫肺炎(PCP)患者的支气管肺泡灌洗液(BALF)中分离Pj,用改良IMDM培养基做原代、传代和冻存复苏培养;以四胺银染色计数法观察虫体增殖情况;以线粒体rRNA大亚基特异引物扩增培养物中的目的基因,与基因库中的鼠源和人源肺孢子虫基因做序列比较。结果用添加S-腺苷甲硫氨酸(SAM)等辅助剂的IMDM培养基从2例PCP患者的BAIF中分离出2个巧纯培养株。分离培养的Pj可进行冷冻保存和复苏培养。培养120 h的Pj包囊可增殖3.2倍。基因序列分析证实分离出的Pj株与鼠源性肺孢子虫的线粒体rRNA大亚基同源性为67.8%,与GenBank中Pj的同源性为93.2%。结论用本法建立了2个Pj纯培养株。
- 黄敏君李淑珍安亦军卢思奇郭增柱
- 关键词：基因
- 兔源肺孢子虫种系发育的研究进展
- 2008年
- 肺孢子虫属(Pneumocystis)含多种具宿主种特异性的肺孢子虫,它们可以诱导严重免疫功能低下宿主产生肺孢子虫肺炎。断乳兔可自发发生肺孢子虫肺炎,引起典型的肺部病理组织学改变。本文就兔源肺孢子虫光镜与电镜结构、基因和种系发育学特点进行综述,并与其他种肺孢子虫进行比较,从生物学与种系发育学上证据表明兔源肺孢子虫应是一新种肺孢子虫,同时也证实了肺孢子虫具有遗传多样性。
- 李淑珍郭增柱
- 关键词：肺孢子虫
