李江涛
- 作品数:7 被引量:16H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划甘肃省自然科学基金甘肃省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- Asia I口蹄疫病毒组合基因P1-2A3C在不同家蚕品种中的表达(英文)被引量:1
- 2011年
- [目的]研究AsiaI口蹄疫病毒组合基因P1-2A3C在不同家蚕品种中的表达,以期筛选出较适合表达该组合基因的家蚕品种。[方法]将已经获得高效表达的重组家蚕杆状病毒rBmNPV(P1-2A3C)基因,分别注射原种及杂交家蚕蚕蛹。利用ELISA方法对其进行抗原表达量检测,并对表达结果进行差异比较。[结果]不同家蚕品种对rBmNPV(P1-2A3C)的表达存在着明显差异;秋丰×TQ78和秋丰×丝胶茧杂交组合可考虑作为高效表达的家蚕生物反应器专用品种。[结论]为AsiaIFMDV目的蛋白的高效表达专用品种的选育提供了依据。
- 张韵张金卫易咏竹李志勇李江涛鱼南洋丁农柳纪省
- 关键词:家蚕品种
- 狂犬病病毒CVS株G、N基因的克隆及表达
- 狂犬病/(Rabies/)是由狂犬病病毒/(Rabies virus,RV/)感染引起的一种致死性人畜共患传染病。该病呈全球性分布,亚洲尤其是我国流行较为严重,对人类生命安全构成严重威胁。目前注射疫苗仍是控制狂犬病的最可...
- 李江涛
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白核蛋白原核表达
- 文献传递
- 狂犬病毒CVS株G基因和IFN-a基因共表达重组腺病毒载体的构建被引量:1
- 2008年
- 通过RT-PCR方法扩增得到狂犬病毒G基因,PCR方法得到IFN-Αa基因并亚克隆入pIRES获得pIRES-a质粒.双酶切G基因和pIRES-a质粒并回收目的基因与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,再与pAdEasy-1质粒在BJ5183菌中同源重组产生腺病毒载体质粒.线性化后的重组腺病毒质粒转染人胚肾293细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达鉴定重组的腺病毒.结果表明:该重组病毒质粒经酶切鉴定与预期结果一致;转染293细胞后观察到绿色荧光蛋白的表达,说明成功构建了G和IFN-a双基因共表达重组腺病毒载体.
- 李江涛殷相平柳纪省胡永浩
- 关键词:重组腺病毒
- 狂犬病病毒CVS株核蛋白基因的原核表达、纯化及鉴定被引量:5
- 2008年
- 用RT-PCR技术对狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因进行扩增,经克隆与序列分析,该基因编码450个氨基酸残基。将目的基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建了重组质粒pET-N,将其转化表达菌BL21(DE3),于37℃1.0mmol∕L IPTG条件下诱导表达。大肠杆菌菌体裂解产物经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为54kD处出现一新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符。质谱鉴定的结果表明成功表达了RV N蛋白,为狂犬病的进一步研究奠定了基础。
- 李江涛李轶女殷相平邹媛媛张志芳柳纪省
- 关键词:狂犬病病毒核蛋白原核表达
- 表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究被引量:1
- 2009年
- 对狂犬病毒G+N双基因复制缺陷型腺病毒穿梭载体进行转染,以获得融合表过狂犬病毒糖蛋白和核蛋白重组腺病毒,并对其进行生物学特性和免疫学研究.结果表明:将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组,可获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N,经PacI酶切后转染HEK-293细胞,可获得带有目的基因的重组腺病毒.重组腺病毒在HEK-293细胞中连续传代15代次后,在细胞内的病变时间缩短为20 h以内.经测定,重组腺病毒对HEK-293细胞的TCID50为10-8.0.mL-1,用RT-PCR法可检测到狂犬病毒糖蛋白和核蛋白基因片段;重组腺病毒经口服免疫小白鼠,对狂犬病毒CVS毒株的免疫保护率可达80%.
- 殷相平李志勇李江涛李宝玉兰喜杨彬李学瑞柳纪省
- 关键词:狂犬病毒重组腺病毒生物学特性免疫
- 狂犬病病毒糖蛋白基因的克隆及其二级结构和B细胞抗原表位预测被引量:7
- 2008年
- 对狂犬病病毒CVS株糖蛋白基因进行克隆与测序,推导出相应的氨基酸序列。然后采用Gamier-Robson法和Chou-Fasman法预测糖蛋白的二级结构,用Kyte-Doolittle法、Emini法和Jameson-Wolf法分别预测蛋白质的疏水性、表面可能性和抗原指数,并综合分析预测糖蛋白的B细胞抗原表位。结果表明,该蛋白结构中含有少量的α螺旋、较多的β折叠以及较为丰富的转角区域,在序列的121~126、133~137、161~165、191~193、201~204、214~216、221~225、264~267区域或其附近最有可能是B细胞抗原表位的优势区域。
- 李江涛殷相平柳纪省胡永浩
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白B细胞表位
- 狂犬病病毒CVS株G基因和IFN-α基因的克隆及双基因真核表达载体的构建被引量:2
- 2007年
- 从狂犬病病毒CVS毒株致死的小鼠脑组织中提取总RNA,通过RT-PCR获得G基因;以pMD18-T-α质粒为模板,PCR扩增得到IFN-α基因。两个基因和pIRES真核表达载体分别双酶切,连接构建p IRES-G/IFN-α,经PCR、双酶切鉴定和测序证明载体构建成功。测得的G基因序列长1 575 bp,与CVS株G基因氨基酸同源性为98.5%;IFN-α序列长为570 bp,与GenBank中登录号为NM 001017411的IFN-α基因氨基酸同源性为91.6%。
- 李江涛殷相平柳纪省李宝玉李学瑞杨彬兰喜胡永浩
- 关键词:G基因Α干扰素