李文雪
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林大学白求恩医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TetO-FUW-Oct4质粒的构建及在HUVEC的表达
- 目的：构建可调控Oct4慢病毒表达载体（TetO-FUW-Oct4）,并将其转导人脐静脉内皮细胞（HUVEC），建立受强力霉素（Doxycycline，Dox）调控表达Oct4的HUVEC细胞系;对Dox诱导Oct4表达...
- 李文雪
- 关键词：OCT4强力霉素人脐静脉内皮细胞
- 文献传递
- 含人SOD_2基因启动子的荧光素酶报告基因质粒的构建和鉴定
- 2012年
- 目的:从人基因组中克隆SOD2基因的启动子并插入到荧光素酶报告基因载体中并进行基因测序鉴定。方法:以人基因组DNA为模板,用PCR的方法扩增出人SOD2基因启动子片段后,将其插入到pGL3-basic载体的荧光素酶报告基因上游,将构建的重组质粒通过双酶切片段的凝胶电泳分析和DNA测序以确定插入位置和序列的正确性。结果:双酶切反应和测序结果显示SOD2基因启动子插入的位置和序列是正确的。结论:成功克隆了SOD2基因启动子,为后续SOD2转录调控机制的研究提供重要的实验基础。
- 李新娜史艳芬仲苓芝李文雪李荣贵
- 关键词：荧光素酶启动子报告基因
- Tet-on调控的人HOXB4慢病毒载体构建被引量：1
- 2014年
- 目的构建Tet-on调控的人HOXB4慢病毒载体,为体外扩增造血干细胞并保持其干细胞特性提供实验材料基础。方法应用PCR技术从质粒TAT-HA-HOXB4-Full中扩增编码人HOXB4的cDNA,用限制性内切酶EcoRI分别酶切HOXB4基因片段和带有Tet-on开关的可调控慢病毒载体,经T4DNA连接酶连接获得慢病毒载体Teto-Fuw-hHOXB4。对构建的HOXB4慢病毒载体进行酶切片段凝胶电泳及DNA测序分析。结果酶切片段电泳分析和DNA测序分析证明Tet-on调控的人HOXB4慢病毒载体构建成功。结论正确构建了Tet-on调控的人HOXB4慢病毒载体,为后续的体外扩增造血干细胞及相关研究提供材料。
- 李秀英白金萍仲苓芝李新娜李文雪李荣贵
- 关键词：HOXB4
- 人线粒体超氧化物歧化酶真核表达载体的构建及其在HUVEC中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的:构建人线粒体超氧化物歧化酶2(SOD2)的真核细胞表达载体,探讨其在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达效果。方法:以HUVEC mRNA为原始模板,应用RT-PCR技术,扩增编码线粒体SOD2全长的cDNA片段。利用分子生物学技术,将扩增的cDNA片段与真核细胞表达载体pcDNA3.0的多酶切位点相连接,构成重组质粒并转染到HUVEC,将细胞分为HUVEC母细胞组、转染pcDNA3.0空载组和转染pcDNA3.0-SOD2组。应用RT-PCR方法检测SOD2在HUVEC中的表达情况。结果:将表达SOD2全长cDNA片段定向克隆至质粒pcDNA3.0,测序结果表明成功构建人线粒体SOD2的真核细胞表达载体pcDNA3.0-SOD2。该载体稳定转染HUVEC后,在细胞内获得了稳定表达。与母细胞组和空载组比较,转染pcDNA3.0-SOD2组SOD2mRNA表达水平明显增加。结论:成功构建SOD2的真核细胞表达载体pcDNA3.0-SOD2,并在人HUVEC中成功表达。本研究为SOD2对细胞保护作用研究提供了实验模型。
- 仲苓芝李文雪李秀英李新娜李玉林李荣贵
- 关键词：PCDNA3人脐静脉内皮细胞
