李丽娥
- 作品数：27 被引量：158H指数：7
- 供职机构：苏州医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 人骨髓基质细胞的长期培养及其对病毒的敏感性被引量：1
- 2000年
- 为了长期培养人骨髓基质细胞和研究其对病毒的敏感性 ,我们采用静置贴壁培养法 ,体外长期培养了胎儿、儿童和成人骨髓基质细胞 ,并将传至 5代以上的肌样骨髓基质细胞采用微量细胞病变 (CPE)法 ,开展了对 5种病毒的敏感性试验。结果表明 ,人骨髓基质肌样细胞对滤泡性口腔炎病毒 ,脊髓灰质炎病毒、I型和Ⅱ型单纯疱疹病毒均敏感 ,能产生明显的CPE ,其效价 (TCID50 )可达10 - 3～ 10 - 4,其中胎儿骨髓基质肌样细胞对病毒敏感性至少比儿童高 2倍 ,比成人高 4倍 ,即胎儿>儿童 >成人 ,但对B3型柯萨奇病毒均不敏感。我们的研究结果不仅可为人骨髓基质细胞体外长期培养提供了确实可行的简便方法 ,而且为该细胞对病毒的敏感性提供了实验依据 ,并为该细胞的利用开辟了新的应用前景。
- 杨吉成盛伟华李丽娥董宁征杨宗华王晓东
- 关键词：体外长期培养病毒敏感性
- 基因工程IFNα_(2a)和IFNα_(2b)对肿瘤细胞生长的抑制作用被引量：11
- 1999年
- 为了研究不同品牌不同亚型基因工程α干扰素的抗肿瘤效应，采用ＭＴＴ法将不同浓度的α干扰素分别对５种肿瘤细胞进行生长抑制实验。结果表明不同品牌的１００００ＩＵ／ｍｌ，１０００ＩＵ／ｍｌ，１００ＩＵ／ｍｌ的ＩＦＮα２ａ或ＩＦＮα２ｂ对人脑胶质瘤细胞（ＳＨＧ４４），人骨肉瘤细胞（ＨＯＳ８６０３），人白血病细胞（ＨＬ６０），红白血病细胞（Ｋ５６２）和淋巴瘤细胞（Ｒａｊｉ）的生长均有不同程度的抑制作用。其抑制率分别为２０％，１０％，５％左右。进口和国产的不同品牌ＩＦＮα２ａ和ＩＦＮα２ｂ对上述５种肿瘤细胞株均有较明显的生长抑制效应，而且抑制的百分率均相近。
- 杨吉成李丽娥盛伟华董宁征徐伦
- 关键词：肿瘤细胞生长抑制率
- CMP促诱生IL-2、TNF-α、IL-6、IFNγ/α效应和产品中试被引量：5
- 1998年
- 用羧甲基茯苓多糖（ＣＭＰ）预处理人外周血淋巴细胞（ＨＰＢＬ），在以ＰＨＡ和ＣｏｎＡ为主的复合诱生剂诱导培养２４、３６、４８、７２ｈ采样检测的促诱生组ＴＮＦ－α、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＦＮγ效价（ｘ±ｓ）分别为４５６．１±２４．２，４７５．６±１８５．７，７４３３±１１８９．９，５５８３．０±５３５．５ＩＵ／ｍｌ，分别比无ＣＭＰ的常规诱生组效价高１．５，３．８，１．８，１．４倍；在以ＮＤＶ－Ｆ病毒为诱生剂诱导培养２２ｈ采样，并经酸化和中性化后检测的ＩＦＮ－α效价可达２１２７４．２±５５２３．０ＩＵ／ｍｌ，比无ＣＭＰ的常规诱生组高１．２倍，均有显著差异（Ｐ＜０．０１），说明ＣＭＰ对上述五种细胞因子均有明显的促诱生效应。此外，还采用ＣＭＰ促诱生技术，对ＴＮＦ－α、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＦＮγ和ＩＦＮ－α细胞因子进行了中试，提出了低成本、高效益的中试工艺路线。
- 杨吉成盛伟华李丽娥董宁征张云
- 关键词：茯苓多糖中间体
- 基因工程干扰素(IFN—α2b)抗柯萨奇和单纯疱疹病毒效应被引量：1
- 1999年
- 本文采用微量细胞病变抑制法在Ｗｉｓｈ 及Ｖｅｒｏ 细胞上研究了ＩＦＮ—α２ｂ 抗ＣｏｘＢ３ 型及ＨＳＶ—１ 型和ＨＳＶ—Ⅱ型病毒的作用。结果表明，安达芬和干扰能ＩＨＮα２ｂ 在Ｗｉｓｈ 或Ｖｅｒｏ 细胞上５００ＩＵ／ｍｌ 分别可以抗３ｌｏｇ４ 或１０００ＴＣＩＤ５０ ，５０ＩＵ／ｍｌ 可以抗２ｌｏｇ４ 或１００ ＴＣＩＤ５０ ，５ＩＵ／ｍｌ 可以抗１ｌｏｇ４ 或１０ ＴＣＩＤ５０ 的ＣｏｘＢ３ 型或ＨＳＶ—１ 型和ＨＳＶ—Ⅱ型病毒感染细胞。提示安达芬和干扰能均显示明显的抗病毒效应。
- 盛伟华杨吉成李丽娥吕海涛董宁征
- 关键词：干扰素Α2B
- RhIL-2对人骨髓CFU-GM,CFU-E和BFU-E的影响
- 1997年
- 采用甲基纤维素体外半固体培养法证明，50～1000U／mlrhIL－2单用对人骨髓造血祖细胞的CFU－CM，CFU－E及BFU－E无直接刺激增生作用；当与GM－CSF联用时．100～400U／mlrhIL－2其CFU－GM集落形成率明显高于单用GM－CSF的对照组（P＜0．05）；当与EPO联用时，其CFU－E及BFU－E集落形成率也明显高于单用EPO对照组（P＜0．05），而1000U／mlrhIL－2其3种集落形成数目呈下降趋势，可能有抑制作用。说明100～400U／mlrhIL－2可应用于协同GM－CSF及EPO体外扩增骨髓干／祖细胞以进行骨髓移植是有重要意义的。
- 金苏华杨吉成盛伟华李丽娥郝思国
- 关键词：骨髓移植CFU-GMCFU-EBFU-E重组人白介素
- IFNα2b诱导MxA蛋白的表达及其抗病毒活性研究被引量：2
- 2000年
- 目的 研究MxA抗病毒蛋白的表达及其活性。方法 用IFNα2b处理WI - 38细胞或人外周血单核细胞 12h或 2 4h ,并用Western -blot法或FACS法分别进行MxA蛋白表达的检测及微量细胞病变抑制法对重组的MxA和IFNα2b进行抗病毒效应实验。结果 (1)低浓度IFNα2b(>1IU/ml)可诱导WI- 38细胞表达MxA ;(2 ) 10ng/mlMxA可以抵抗 2 0TCID50 的HSV -I、Polio .V感染Vero细胞 ,抵抗 2 0 0TCID50 的VSV感染Wish细胞。结论 MxA是由I型干扰素特异诱导产生的 ,且具有广谱的直接抗病毒活性。
- 盛伟华贡海蓉杨吉成李丽娥徐仑
- 关键词：MXA多肽抗病毒蛋白
- 双黄连粉针剂体外抗柯萨奇病毒的初步研究被引量：8
- 1998年
- 在Wish和Vero细胞上采用微量细胞病变抑制法研究了双黄连抗柯萨奇病毒作用，结果表明：双黄连0．75mg／ml在两种细胞培养上，能直接杀伤病毒和阻止病毒吸附细胞，而且能对细胞内低滴度柯萨奇病毒的复制起抑制作用．
- 吕海涛严文华杨吉成盛伟华李丽娥董宁征
- 关键词：双黄连柯萨奇病毒粉针剂
- 人参多糖及其皂甙等5种中药提取物促诱生人干扰素的研究被引量：33
- 1997年
- 用100mg／L人参多糖、人参皂甙、羧甲基茯苓多糖、云芝糖肽及10mg／L刺五加多糖对人淋巴细胞在NDV或PHA刺激下所产生的IFN－α或IFN-γ的效价均比常规诱生组高5～7倍，是理想的干扰素促诱生剂，为上述中药的抗感染、抗肿瘤和免疫调节药效机理从分子水平上提供了实验依据。
- 钱农杨吉成盛伟华李丽娥汤建平
- 关键词：人参多糖人参皂甙干扰素
- 骨髓基质细胞的造血支持作用等生物学特性的研究被引量：4
- 2000年
- 采用静置贴壁细胞培养法，体外长期培养了胎儿、儿童、成人骨髓基质细胞，时间为６个月，可传至１０代，并观察了成纤维肌样细胞、内皮细胞和巨噬细胞；通过免疫细胞化学染色法，证明了１～３代的骨髓基质肌样细胞Ｖｉｅｍｅｎｔｉｎ为阳性，第Ⅷ因子阴性；采用流式细胞仪检测法，证明了儿童骨髓基质细胞的细胞表型为ＣＤ３３－和ＣＤ３４－、ＣＤ３８－、ＣＤ＋Ｗ９０，成人骨髓基质细胞为ＣＤ－３３、ＣＤ－３４、ＣＤ＋３８、ＣＤ＋Ｗ９０。 采用体外培养和扩增的脐血造血干细胞的半固体集落形成法，证明了基质细胞能长期维持脐血中的ＬＴＣ－ＩＣ的生存，若加入ＩＬ－６、ＩＬ－３、ＳＣＦ细胞因子的扩增体系，基质细胞对长期维持和扩增ＬＴＣ－ＩＣ的效果更为明显（Ｐ＜０．０１），比无基质细胞的对照组所形成的ＬＴＣ－ＩＣ产率高于２～４倍。表明骨髓基质细胞具有支持造血功能。
- 杨吉成盛伟华李丽娥董宁征王红卫郭瑃王晓东杨宗华
- 关键词：人骨髓基质细胞细胞培养
- 人白细胞介素-18的基因克隆及原核表达被引量：5
- 2000年
- 目的 为进一步研究人白细胞介素 (hIL - 18)的生物学特性打下基础 ,进行hIL - 18的基因克隆及原核表达。方法 采用反转录PCR(RT -PCR)法从正常人外周血白细胞中克隆hIL - 18基因 ,并重组于PBV2 2 0表达载体上 ,经酶切初步鉴定后进行DNA序列分析 ,继而观察重组hIL - 18基因在大肠杆菌中不同诱导时间表达量的差异。结果 所克隆的基因与预期结果一致 ,并在 42℃诱导 5h时表达量最高。结论 成功地克隆了hIL - 18基因 。
- 缪海珍杨吉成盛伟华阳小卫李丽娥
- 关键词：RT-PCR基因克隆
