盛伟华
- 作品数：332 被引量：968H指数：15
- 供职机构：上海中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学核科学技术轻工技术与工程更多>>
- 表达人IL-17F重组腺病毒载体的构建及其表达产物的功能研究被引量：3
- 2013年
- 目的构建表达人白细胞介素IL-17F （hIL-17F）的重组腺病毒载体（Ad-hIL-17F），为进行hIL-17F基因表达抑制血管形成和抑瘤效应的研究奠定基础。方法以pUCm-T/hIL-17F重组质粒为模板PCR扩增hIL-17F，酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV转移质粒上，PmeⅠ线性化重组质粒pAdTrack-CMV-hIL-17F，与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌，经同源重组，获得同源重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pTrack-CMV-hIL-17F经PacⅠ线性化后转染QBI-293A细胞，收获Ad-hIL-17F，用RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定人IL-17F基因表达。 MTT法检测hIL-17F基因表达对ECV304细胞的生长抑制作用， ELISA法检测人血管内皮生长因子（ VEGF）和血管生成素（ Ang-1）基因在293A细胞、ECV304细胞中的表达水平；实时定量RT-PCR检测Ad-hIL-17F对293A细胞中人VEGF转录的影响。结果测序显示hIL-17F序列正确，RT-PCR和间接免疫荧光法检测到了IL-17 F基因的表达。 Ad-hIL-17 F能显著抑制ECV304细胞的生长，抑制人VEGF和Ang-1基因在293 A细胞、ECV304细胞中的表达。结论成功构建和获得了hIL-17F的重组腺病毒载体（Ad-hIL-17F）， Ad-hIL-17 F可通过下调VEGF和Ang-1的分泌而抑制血管形成。
- 盛伟华任苏勤谢宇锋缪竞诚刘铁连杨吉成
- 关键词：腺病毒载体
- rhIL-24对黑色素瘤B16细胞的体内外抑瘤作用被引量：3
- 2006年
- 目的研究重组人白细胞介素24(rhIL-24)及真核表达基因重组质粒pcDNA3·0-hIL-24对黑色素瘤B16细胞(B16细胞)及其荷瘤小鼠体内外抑肿瘤作用。方法用rhIL-24蛋白作用于小鼠B16细胞,检测其对B16细胞的生长抑制作用及诱导凋亡作用,并用rhIL-24蛋白及pcD-NA3·0-hIL-24治疗荷瘤小鼠。结果rhIL-24蛋白对体外培养的B16细胞具有显著的抑制生长和诱导凋亡作用,rhIL-24蛋白及pcDNA3·0-hIL-24对C57/BL6小鼠体内形成的恶性黑色素瘤具有明显的抑瘤作用。结论rhIL-24蛋白具有生物活性,他及真核表达重组质粒对B16细胞及其小鼠种植瘤生长有抑制作用,并能诱导肿瘤细胞凋亡及促进其分化。
- 赵小瑜严苏韩梅盛伟华杨吉成
- 关键词：黑色素瘤B16细胞
- Ad-Ang-1转基因成纤维细胞修饰的再生丝素膜诱导血管形成效应及其分子机制研究
- 2011年
- 目的研究经腺病毒介导的人血管生成素-1（Ad-Ang-1）转基因细胞修饰的再生丝素膜诱导血管形成活性及其分子机制。方法将Ad-Ang-1腺病毒病毒子感染再生丝素膜上培养的wI-38人胚肺成纤维细胞，通过ELISA法检测再生丝素膜对成纤维细胞目的基因表达的影响，将Ad—Ang-1转基因WI-38细胞修饰的丝素材料进行鸡胚尿囊膜血管形成实验（CAM）和兔角膜层间植入诱导角膜新生血管试验，并用ELISA法检测其对血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（FGF2）、血小板衍化生长因子（PDGF）表达的影响。结果Ad—Ang-1可感染再生丝素膜上培养的成纤维细胞，ELISA法检测结果表明sF组Ad．Ang．1转基因W1．38细胞可以成功表达目的基因（P〈0．05）。CAM实验表明Ad-Ang-l转基因wI-38细胞修饰的再生丝素膜具有促进CAM血管生成的活性，并通过兔角膜层间植入实验进一步证明Ad-Ang-1转基因细胞修饰的丝素材料具有诱导角膜组织血管生成的作用．其机制可能与再生丝素膜对Ad-Ang-l转基因的WI-38成纤维细胞中不仅可以成功表达目的Ang-1，而且还可使与血管生成和组织损伤修复相关的VEGF、FGF2、PDGF基因表达水平明显提高有关。结论Ad-Ang-I转基因细胞修饰的丝素材料具有诱导血管生成的作用，为今后进一步采用转基因技术对生物材料进行修饰或改性、研制出具诱导性的医用生物膜材料创造了条件。
- 钱丽娟刘铁连张晓峰谢宇锋盛伟华缪竞诚韩亚丽杨吉成
- 关键词：血管生成素腺病毒
- 腺病毒载体AdING4对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制及化疗增敏作用
- 2016年
- 目的:研究腺病毒载体AdING4对人MCF-7乳腺癌细胞的生长抑制及化疗增敏作用。方法:将搭载有ING-4基因的重组腺病毒载体AdING4感染人MCF-7乳腺癌细胞,用荧光显微镜观察感染后的MCF-7细胞形态学变化;RT-PCR和Western-Blot法检测ING-4基因在MCF-7细胞中的转录和表达;RT-PCR法检测凋亡相关基因在MCF-7细胞中的表达;CCK法测定Ad-ING4感染MCF-7乳腺癌细胞后所发挥的细胞增殖抑制作用。流式细胞技术检测ING-4对MCF-7乳腺癌细胞的促凋亡作用。CCK-8法分别测定病毒感染前后的MCF-7乳腺癌细胞的药物半数抑制浓度IC50,并观察Ad-ING4与化疗药物合用后对MCF-7细胞增殖抑制和化疗增敏现象。结果:MCF-7细胞在转染ING-4基因后,明显出现变圆、脱落、皱缩、聚集等现象;外源性ING-4基因在MCF-7细胞中获得成功表达;外源性ING-4基因作用下MCF-7细胞的增殖受到了明显抑制,凋亡率有所升高,凋亡相关基因Bax的表达水平明显上调,Bcl-2、Survivin的表达水平明显下调。ING-4基因感染MCF-7细胞后,使MCF-7细胞对相关化疗药物的敏感度更高;ING-4基因与化疗药物合用后对MCF-7细胞的增殖抑制作用,较之单用化疗药物更为明显。结论:MCF-7细胞在转染ING4基因后其增殖受到了明显抑制并更易凋亡,该现象可能是通过改变Bax,Bcl-2及Survivin表达水平来实现的,且对化疗药物的敏感性更高。
- 吴乙夫董晓强杨吉成盛伟华魏文祥
- 关键词：ING4基因腺病毒载体凋亡化疗增敏
- 桂皮酸逆转人肝癌细胞某些恶性表型的研究被引量：2
- 2002年
- 目的观察桂皮酸(CINN)对人肝癌细胞(HepG-2)的作用。方法体外培养HepG-2细胞,用CINN处理后,观察细胞形态、细胞集落形成能力、甲胎蛋白分泌量及细胞周期频数分布的变化。结果细胞形态趋向良性分化,集落形成率降低,甲胎蛋白分泌减少,G0/G1期细胞增加而G2+M期细胞减少。结论CINN可使HepG-2细胞某些恶性表型发生逆转。
- 刘俊卯丁海盛伟华钱海鑫
- 关键词：桂皮酸恶性表型肝癌细胞形态
- 抗病毒蛋白MxA的诱导和检测方法的实验研究被引量：9
- 2002年
- 目的 研究抗病毒蛋白ＭｘＡ的表达及其活性。方法用ＩＦＮα２ｂ或３型腺病毒（Ａ＿３）分别对ＷＩ－３８细胞或人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）作用 １２或２４ ｈ，并用Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ法或ＦＡＣＳ法，分别对Ｍ蛋白的表达进行定性和定量检测。采用微量细胞病变抑制法，对重组的ＭｘＡ和ＩＦＮα２ｂ进行抗病毒效应实验。结果 （１）低浓度的 ＩＦＮα２ｂ（＞ １×1０～＃ＩＵ／Ｌ）和Ａｄ＿３（＞２００ ＴＣＩＤ＿５０），均可诱导相应细胞表达 ＭｘＡ；（２）１０μｇ／Ｌ ＭｘＡ可抵抗２０个 ＴＣＩＤ＿（５０）的 ＨＳＶ－Ｉ、Ｐｏｌｉｏ． Ｖ感染 Ｖｅｒｏ细胞、Ａｄ＿３感染ＨｅＬａ细胞，抵抗２００个ＴＣＩＤ＿（５０）的ＶＳＶ感染Ｗｉｓｈ细胞。结论ＭｘＡ只能由干扰素（ＩＮＦα2ｂ）或病毒诱导产生，其具有广谱的抗病毒活性。
- 杨吉成盛伟华李丽娥贡海蓉徐仑
- 关键词：MXA基因表达调控腺病毒
- ING4及IL-24双基因共表达腺病毒载体对MG-63人骨肉瘤细胞体外抑癌增效作用研究被引量：8
- 2013年
- 目的用人肿瘤生长抑制因子(mING4)及人白介素24(IL-24)基因构建腺病毒双基因共表达载体(Ad-ING4-IL-24),并设Ad-ING4和Ad-IL-24单基因对照,研究双基因共表达载体对MG-63人骨肉瘤细胞体外抑癌增效作用.方法首先将已构建成功的Ad-ING4-IL-24,Ad-ING4及Ad-IL-24腺病毒感染QBI-293A细胞,经多轮扩增后获得高滴度的病毒子,测病毒效价后分别以100 MOI剂量感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测ING-4及IL-24在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法检测ING-4及IL-24基因表达对MG-63细胞的生长抑制效应;半定量RT-PCR法检测ING4及IL-24基因表达对MG-63细胞中的Bcl-2,Bax,Caspase3,p21,CD34等相关基因表达的影响.结果获得了高滴度的重组腺病毒Ad-ING4-IL-24,Ad-ING4,Ad-IL-24和Ad-GFP;治疗后MG-63细胞中ING-4及IL-24双基因表达对MG-63细胞增殖有明显抑制作用,ING-4及IL-24基因表达可通过上调细胞中Bax,Caspase3,p21和下调Bcl-2,CD34基因表达诱导细胞凋亡.在病毒子剂量为100 MOI时,Ad-ING4-IL-24对MG-63人骨肉瘤细胞抑制作用比对Ad-ING4和Ad-IL-24抑制效果更为显著.结论腺病毒介导的ING4或/和IL-24基因可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,且Ad-ING4-IL-24双基因比Ad-ING4和Ad-IL-24单基因的抑制效果更为显著,该现象可能是通过改变Bcl-2,Bax,Caspase3,p21,CD34基因表达水平来发挥抗肿瘤作用的.
- 王家融韩亚丽缪竞诚盛伟华杨吉成
- 关键词：ING4基因IL-24基因腺病毒载体
- 骨髓基质细胞的体外培养和向成骨及软骨分化的实验研究被引量：7
- 2002年
- 目的研究骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）的成骨及软骨分化功能。方法 采用细胞静置贴壁培养法，体外培养了兔和儿童的ＢＭＳＣ，用传至２－３代兔ＢＭＳＣ和Ⅱ型胶原联合治疗兔膝关节软骨缺损；采用成骨诱导培养法研究儿童ＢＭＳＣ的成骨效应。结果（１）Ⅱ型胶原和ｂＦＧＦ对兔ＢＭＳＣ的贴壁和生长是有效的。（２）用兔ＢＭＳＣ和Ⅱ型胶原治疗１２周后，能使兔膝关节软骨缺损获得恢复，其软骨细胞分化明显。（３）用成骨诱导培养法，可使儿童ＢＭＳＣ骨钙素分泌水平比常规对照组升高８～１０倍，并可见有典型的成骨化的黑色矿化细胞区。结论骨髓基质细胞具有成骨和软骨分化功能。
- 盛伟华杨吉成李丽娥董宁征王晓东戴连生
- 关键词：骨髓基质细胞成骨分化软骨分化
- 不同表达载体对人白细胞介素-18原核表达效率的影响被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨PBV220及PJW2载体构建的rhIL-18重组质粒的IL-18表达效率。方法 将构建的PBV220/rhIL-18重组质粒中的rhIL-18酶切、克隆到表达载体PJW2中,经PCR产物电泳及测序鉴定,热诱导后在大肠杆菌中表达。结果 PJW2/rhIL-18表达的重组人IL-18占菌体总蛋白质的20％,而PBV220/IL-18重组质粒表达的重组人IL-18占菌体总蛋白质的16％。两者表达的蛋白质分子量约为18KD,与预期分子量相符。结论 PJW2载体rhIL-18表达效率高于PBV220,为下一步的纯化及提高蛋白产量打下了基础。
- 吉莉莉杨吉成孙万邦盛伟华李丽蛾
- 关键词：白细胞介素18大肠杆菌
- 双源CT在肺结节病影像学诊断中的价值分析被引量：1
- 2018年
- 目的:分析双源CT在肺结节病影像学诊断中的应用价值。方法:我院2015年4月—2016年6月,共撷取肺结节病患者30例,实行回顾性分析。所有患者均通过影像学诊断,观察患者的诊断情况。结果:肺内改变者18例,均为肺内结节影像改变,包括12例胸膜下多发结节者、肺内散在结节改变者、4例肺内单发结节改变者、2例磨玻璃样改变者。30例肺结节病患者中,胸部淋巴结无明显肿大者5例、淋巴结肿大者25例。结论:肺结节病检查中,使用双源CT检查,可一次性扫描获得虚拟平扫图、点剂分布图,不会出现数据采集位置、时间差,具有重要的临床应用价值。
- 胡起立宋黎涛盛伟华
- 关键词：肺结节病影像学
