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曹秀琴

作品数：32 被引量：62H指数：4
供职机构：宁夏医科大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏医科大学校级科研项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 28篇期刊文章
  • 4篇专利

领域

  • 28篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 18篇细胞
  • 15篇嗜肺
  • 15篇嗜肺军团菌
  • 9篇巨噬细胞
  • 8篇FCΓ
  • 8篇FCΓR
  • 6篇自噬
  • 4篇蛋白
  • 4篇血清
  • 4篇受体
  • 4篇小鼠
  • 4篇抗体
  • 4篇RAW264...
  • 4篇纯化
  • 3篇乳腺
  • 3篇细胞自噬
  • 3篇慢病毒
  • 3篇可溶性
  • 3篇干细胞
  • 3篇FCΓRII...

机构

  • 32篇宁夏医科大学
  • 8篇教育部
  • 1篇滨州医学院附...
  • 1篇宁夏大学
  • 1篇宁夏回族自治...
  • 1篇解放军534...

作者

  • 32篇曹秀琴
  • 21篇杨志伟
  • 6篇蒲静
  • 6篇孙苗
  • 5篇马文智
  • 4篇俞晓丽
  • 3篇常青
  • 3篇张宁
  • 3篇于佳
  • 3篇王燕蓉
  • 3篇李雪
  • 3篇王琦
  • 3篇裴秀英
  • 3篇刘心蕊
  • 2篇杨延周
  • 2篇马会明
  • 2篇张雷
  • 2篇惠英华
  • 1篇彭晓东
  • 1篇黑常春

传媒

  • 13篇细胞与分子免...
  • 7篇宁夏医科大学...
  • 2篇宁夏医学杂志
  • 2篇河南科技大学...
  • 1篇微生物学报
  • 1篇中华微生物学...
  • 1篇免疫学杂志
  • 1篇山东大学学报...

年份

  • 2篇2023
  • 3篇2022
  • 3篇2021
  • 1篇2020
  • 1篇2019
  • 1篇2018
  • 3篇2017
  • 3篇2016
  • 3篇2015
  • 3篇2014
  • 3篇2013
  • 2篇2012
  • 4篇2011
共 32 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
嗜肺军团菌重组MOMP蛋白间接ELISA方法的建立及其在血清学诊断中的应用被引量：3
2013年
目的表达及纯化出嗜肺军团菌主要外膜蛋白(MOMP)作为诊断抗原,研究其在嗜肺军团菌感染血清学诊断中的实用价值。方法将已成功构建的重组质粒pET-momp转化到大肠杆菌E.coli BL21感受态细胞中,诱导重组MOMP表达,运用SDS-PAGE和亲和层析法纯化。用DRG军团菌IgG、IgM、IgA的ELISA试剂盒筛选出58份阳性血清和32份阴性血清,用纯化的MOMP蛋白作为诊断抗原建立间接ELISA,同时与R&D公司军团菌的IgG、IgM、IgA ELISA试剂盒分别检测已筛选血清中的IgG、IgM、IgA抗体,然后用受试者工作特征(ROC)曲线对这2种方法进行比较,通过敏感性、特异性以及检测结果的一致性,来评价重组MOMP间接ELISA的应用价值。结果成功诱导表达并纯化出相对分子质量(M r)大约为45 000的重组MOMP蛋白。重组MOMP建立的间接ELISA分别检测筛选血清中IgG、IgM、IgA抗体与R&D公司的ELISA试剂盒进行比较,IgG抗体灵敏度90.9%,特异度91.7%,一致性Kappa值0.784(P<0.05),ROC曲线下的面积0.913;IgM抗体灵敏度91.4%,特异度90.6%,一致性Kappa值0.809(P<0.05),ROC曲线下的面积为0.910;IgA抗体灵敏度92.1%,特异度88.9%,一致性Kappa值0.793(P<0.05),ROC曲线下的面积0.905。结论成功诱导表达及纯化出重组MOMP蛋白,将其作为诊断抗原所建立的间接ELISA表现出了较好的特异性,灵敏度和一致性,为军团病的血清学诊断试剂盒的研制奠定了基础。
王涛张彩霞曹秀琴杨志伟
关键词：嗜肺军团菌ELISA
小鼠FcγR Ⅱb胞外区重组蛋白的原核表达及对小鼠SLE模型的治疗作用研究
2015年
目的构建小鼠Fcγ receptor Ⅱb（FcγR Ⅱb ）胞外区蛋白原核表达载体pET-FcγRⅡb，诱导表达并纯化，观察其在系统性红斑狼疮（SLE）疾病中的预防与治疗作用。方法PCR扩增获得小鼠FcγR Ⅱb 基因，并将其定向克隆至原核表达载体pET-32a（＋），构建原核表达重组质粒小鼠pET-FcγR Ⅱb ，经PCR、限制性内切酶鉴定及测序分析正确后，转化大肠杆菌BL21（DE3），IFFG进行诱导蛋白表达，确定最佳诱导条件，经Western blot鉴定正确后，纯化目的蛋白。ELISA法检测纯化蛋白与小鼠血清中免疫复合物的结合能力。将MRL／lpr SLE小鼠预防组（周龄12周左右）和治疗组（周龄19周左右）各40只随机分成蛋白液60μl（4．8μg）、120μl组（9．6μg）、180μl（14．4μg）组以及对照PBS组4组，每组10只，通过尾静脉注射将蛋白液注射进入MRL／lpr SLE小鼠体内，连续注射4周，每周1次。注射完成后，观察1周并收集血清，用ELISA法对预防组与治疗组SLE小鼠的可溶性FcγR Ⅱb的含量以及小鼠抗双链DNA抗体含量进行检测。结果扩增出了小鼠FcγR Ⅱb基因，成功构建原核表达重组质粒小鼠pET—FcγRⅡb，IPTG诱导表达并纯化出重组蛋白。重组蛋白与小鼠血清具有结合力；预防组和治疗组蛋白组（含60μl、120μl和180μl组）分别与预防对照组和治疗对照组相比可溶性FcγRⅡb含量增加（P〈0．05），蛋白组（含60μl、120μl和180μl组）两两比较，差异有统计学意义（P均〈0．05）；小鼠抗双链DNA抗体含量检测结果显示预防组和治疗组蛋白组（含60μl、120μl和180μl组）分别与预防和治疗对照组相比，小鼠抗双链DNA抗体含量降低（P〈0．05）；预防和治疗蛋白组（含60μl、120μl和180μl组）分别进行两两比较后发现随着蛋白注射剂量的增加，小鼠抗双链DNA抗体含量逐渐降低（P〈0．05）。结论获得重组小鼠FcγR Ⅱb�
雷泽华曹秀琴杨志伟
关键词：可溶性SLE
变应性鼻炎IgE高亲和力可溶型Fc段受体1α(sFcε1α)蛋白的制备及血清中相应抗体的检测被引量：2
2016年
目的构建人可溶型Fc段受体1α(s FcεR1α)的原核表达载体,诱导表达并纯化重组FcεR1α胞外区段蛋白,检测其与血清中Ig E的结合力及相应抗体的含量。方法应用巢式PCR技术获得人FcεR1α胞外区段基因,构建原核表达载体p ETs Fcε1α,最佳诱导条件表达出s FcεR1α,采用亚胺二乙酸His标签纯化树脂纯化并进行Western blot法鉴定。ELISA检测人s FcεR1α与血清中Ig E的结合力及血清中s FcεR1α总量、s FcεR1α-Ig E及抗FcεR1α自身抗体的含量。结果扩增出人FcεR1α胞外区段基因,大小为600 bp左右。p ET-s FcεR1α经PCR、双酶切、测序鉴定正确。诱导表达、纯化出人s FcεR1α,相对分子质量(Mr)大小约为42 000。Western blot法鉴定为人s FcεR1α。人s FcεR1α可以与人血清中Ig E结合。变应性鼻炎(AR)患者血清中s FcεR1α总量、s FcεR1α-Ig E含量均低于正常人,抗FcεR1α抗体含量高于正常人。结论获得人s FcεR1α,s FcεR1α与人血清中Ig E有较强的结合力,AR患者血清中s FcεR1α总量、s FcεR1α-Ig E含量均低于正常人,抗FcεR1α抗体含量高于正常人。
邢慧慧邵辉曹秀琴杨志伟
关键词：IG可溶型
嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强蛋白的表达和纯化及其在血清学诊断中的应用被引量：3
2013年
目的表达和纯化出嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强(MIP)蛋白,研究其在军团菌肺炎血清学诊断中应用价值。方法将已构建成功的重组质粒pET-mip转化E.coli BL21感受态细胞,诱导MIP蛋白表达,运用SDS-PAGE分析和亲和层析法纯化。用DRG军团菌IgG/IgM/IgA的ELISA检测试剂盒筛出40份阳性血清和30份阴性血清,用纯化的MIP蛋白建立间接ELISA,同时与R&D的ELISA IgG、IgM、IgA试剂盒分别检测已筛选血清中的IgG、IgM、IgA抗体,然后对这两种方法进行比较,通过敏感性、特异性以及不同检测结果的一致性,来评价该方法的应用价值。结果诱导相对分子质量(Mr)大约40 000的MIP融合蛋白在E.coli BL21中表达并纯化。纯化蛋白建立的间接ELISA分别检测筛选血清中IgG、IgM、IgA抗体与国外ELISA试剂盒(R&D)进行比较,IgG抗体的灵敏度88.5%,特异度95.5%,一致性Kappa值0.846(P<0.05),ROC曲线下面积0.927。IgM抗体的灵敏度89.3%,特异度97.6%,一致性Kappa值0.88(P<0.05),ROC曲线下面积0.947。IgA抗体的灵敏度90%,特异度95.2%,一致性Kappa值0.856(P<0.05),ROC曲线下面积0.931。结论成功诱导了嗜肺军团菌MIP蛋白稳定表达并纯化,运用MIP作为包被抗原的军团菌肺炎的血清学诊断方法具有较高的诊断价值。
刘黎曹秀琴杨志伟
关键词：嗜肺军团菌蛋白表达血清学诊断
含人FcγRⅡB基因慢病毒的制备及其在HT-1080细胞中的表达被引量：2
2014年
目的构建FcγRⅡB慢病毒诱导表达载体,并鉴定其在细胞中的表达。方法以人mRNA为模板逆转录获得FcγRⅡB基因片段,并将其克隆入慢病毒表达质粒TRE,构建TRE-FcγRⅡB慢病毒表达重组质粒。将慢病毒表达重组质粒TRE-FcγRⅡB、慢病毒可诱导质粒Tet分别与慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞,分别包装表达病毒和可诱导病毒,分别测定表达病毒和可诱导病毒感染滴度。表达病毒和可诱导病毒共感染HT-1080细胞,经梯度浓度强力霉素(Dox)诱导,实时定量PCR检测FcγRⅡB mRNA表达,免疫荧光染色检测HT-1080细胞FcγRⅡB表达,Western blot法检测FcγRⅡB蛋白表达。结果重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定,测序结果显示插入片段碱基序列与GenBank提供FcγRⅡB基因序列同源性100%。表达病毒滴度达106TU/mL,可诱导病毒滴度达105TU/mL,感染性良好。HT-1080细胞被病毒感染后经Dox诱导表达FcγRⅡB,免疫荧光染色结果显示FcγRⅡB能够在HT-1080细胞中表达;实时荧光定量PCR和Western blot法结果显示FcγRⅡB表达水平与诱导剂浓度正相关。结论成功制备了FcγRⅡB慢病毒,感染HT-1080细胞后可实现FcγRⅡB的诱导表达。
刘慧宇曹秀琴杨志伟
降钙素原监测在ICU不同病原菌感染中的临床价值
2016年
目的研究血清降钙素原(PCT)监测重症监护室(ICU)内不同病原菌感染中的临床价值。方法选取2013年8月至2015年12月我院ICU感染患者380例,住院期间监测患者PCT水平,并分离、鉴别其感染菌种。依据受试者工作特征曲线(ROC)分析PCT水平在鉴别不同病原菌感染中的价值。结果 PCT水平及感染菌种阳性率比较,G-菌感染者高于真菌和G+菌感染者(均P<0.01),而真菌与G+菌感染者比较差异无统计学意义(P>0.05)。当血清PCT水平为2.11 ng·mL^(-1)时,曲线下面积(AUC)为0.89,鉴别G-与G+菌感染的灵敏度为82.62%,特异度为80.24%。当PCT水平为5.08 ng·mL^(-1)时,AUC为0.78,鉴别G-与真菌感染的灵敏度为68.16%,特异度为73.78%。结论血清PCT水平在鉴别G-菌与真菌,G-菌与G+菌感染方面具有较高的价值,但对真菌与G+菌的鉴别价值较低。
佳莉娟曹秀琴王琦
关键词：降钙素原重症监护病房
组蛋白去乙酰化酶6调控鞭毛重组蛋白A干扰巨噬细胞自噬
2023年
目的观察组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)调控嗜肺军团菌鞭毛重组蛋白A(rflaA)对小鼠巨噬细胞自噬相关因子表达的影响,分析其可能的作用机制。方法采用支气管肺泡灌洗法提取C57BL/6J与HDAC6-/-C57BL/6J两种小鼠巨噬细胞,用小鼠巨噬细胞表面标记物F4/80鉴定;纯化rflaA,CCK-8法检测其对小鼠巨噬细胞半数抑制浓度(IC50),筛选最佳作用浓度用于后续实验;rflaA分别干预C57BL/6J及HDAC6-/-C57BL/6J小鼠巨噬细胞6、12和24 h,RT-qPCR、Western blot及免疫荧光检测各组自噬相关因子自噬效应蛋白1(Beclin1)、自噬相关蛋白5(ATG5)、自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)、SQSTM1蛋白(P62)的表达水平。结果根据CCK-8结果计算,IC50为0.41μg·μL^(-1),最佳作用浓度为0.041μg·μL^(-1)用于后续实验;RT-qPCR、Western blot、免疫荧光结果显示,rflaA干预C57BL/6J小鼠巨噬细胞后,与0 h相比,6、12、24 h HDAC6的表达水平升高,LC3、ATG5表达水平均降低,P62的表达水平升高,Beclin1的表达水平先降低后升高(P均<0.05);rflaA干预HDAC6-/-C57BL/6J小鼠巨噬细胞后,与0 h相比,6、12、24 h LC3、ATG5、Beclin1表达水平均升高,P62的表达水平降低(P均<0.05);在相同的时间点,与C57BL/6J小鼠巨噬细胞各组相比,HDAC6敲除后各组细胞ATG5、LC3表达水平升高,Beclin1先升高后降低,P62降低(P均<0.05)。结论HDAC6促进rflaA抑制小鼠巨噬细胞自噬,HDAC6可能通过影响微管蛋白乙酰化干扰巨噬细胞自噬。
郑荣慧李攀曹秀琴陈民佳陈海霞杨志伟
关键词：嗜肺军团菌鞭毛蛋白自噬
化疗可增加肺鳞状细胞癌患者外周血中FcγRⅡB含量被引量：1
2017年
目的检测肺鳞状细胞癌患者化疗前后外周血单核细胞和B细胞膜表面FcγRⅡB表达水平、血清中可溶性FcγRⅡB(s FcγRⅡB)及其抗体的含量。方法免疫荧光技术检测鳞状细胞癌患者化疗前后单核细胞和B细胞膜表面FcγRⅡB的表达和定位、实时定量PCR检测FcγRⅡB mRNA水平,Western blot法检测s FcγRⅡB蛋白水平;ELISA检测鳞状细胞癌患者化疗前后、健康人血清中s FcγRⅡB总量、与Ig G结合的s FcγRⅡB(s FcγRⅡB-Ig G)、抗FcγRⅡB自身抗体的含量变化。结果与健康人相比,鳞状细胞癌患者化疗前单核细胞和B细胞FcγRⅡB的水平、s FcγRⅡB总量及抗FcγRⅡB自身抗体的含量明显降低,化疗后高于化疗前;s FcγRⅡB-Ig G含量高于健康人,化疗后低于化疗前。结论鳞状细胞癌患者FcγRⅡB含量减少,化疗后FcγRⅡB表达有所增加。
卢敬敬曹秀琴杨志伟
关键词：鳞状细胞癌B细胞单核细胞
嗜肺军团菌MOMP通过激活NOD2/RIP2信号通路抑制RAW264.7巨噬细胞的吞噬功能并增强其趋化能力被引量：4
2018年
目的探讨嗜肺军团菌主要外膜蛋白(MOMP)对RAW264. 7巨噬细胞吞噬功能和趋化功能的影响并探讨其机制。方法采用MOMP与RAW264. 7巨噬细胞进行体外共培养,用CCK-8法检测MOMP对RAW264. 7巨噬细胞的毒性,确定半数抑制浓度(IC50)。采用(1. 14、0. 57、0. 28)μg/m L MOMP分别处理RAW264. 7巨噬细胞,并设细胞对照组。RAW264. 7巨噬细胞处理24、48、72 h,收集细胞和培养上清,用中性红吞噬实验检测巨噬细胞的吞噬功能;用TranswellTM小室检测巨噬细胞的趋化功能; ELISA检测细胞培养上清单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和白细胞介素10(IL-10)的含量;实时定量PCR检测巨噬细胞核苷酸结合寡聚结构域1(NOD1)、NOD2、受体相互作用蛋白2(RIP2) mRNA水平,Western blot法检测NOD1、NOD2、RIP2的蛋白水平。结果 CCK-8法检测MOMP对RAW264. 7巨噬细胞的IC_(50)为5. 69μg/m L;与对照细胞相比,MOMP处理引起RAW264. 7巨噬细胞吞噬功能降低且呈剂量和时间依赖性;随着MOMP剂量的增加,巨噬细胞的趋化能力及细胞培养上清中MCP-1、IL-10的分泌水平增加,并在36 h达到峰值; NOD2、RIP2的mRNA和蛋白表达水平也增加,NOD2和RIP2的mRNA水平在12 h达到高峰,蛋白水平在24 h达到峰值。结论 MOMP抑制RAW264. 7巨噬细胞的吞噬功能并增强其趋化功能,与激活NOD2/RIP2信号通路有关。
甄庆洁曹秀琴卢敬敬杨志伟
关键词：嗜肺军团菌巨噬细胞趋化功能
免疫性不孕症患者血清抗体及可溶性FcγRIIB功能检测及相关机制的初步研究被引量：4
2017年
目的通过检测免疫性不孕症患者及正常人群血清免疫性抗体及可溶性FcγRIIB功能,探讨分析FcγRIIB在免疫性不孕症中的相关作用机制。方法选取免疫性不孕症患者30例为观察组,同期体检健康女性30例为对照组。ELISA法检测所有受试者血清中可溶型FcγRIIB含量、与免疫复合物结合力以及抗精子抗体(As Ab)、抗心磷脂抗体(Ac Ab)、抗子宫内膜抗体(Em Ab)等免疫性抗体。结果观察组血清中可溶性FcγRIIB浓度低于对照组(t=-9.528,P<0.0001),差异有统计学意义。相同DNA孵育浓度下,观察组血清可溶性FcγRIIB与IC结合力高于对照组。观察组As Ab、Ac Ab等抗体阳性率高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论FcγRIIB表达水平下降可能与免疫性不孕的发生发展有一定关系。
佳莉娟曹秀琴王琦
关键词：不孕症免疫性因素FCΓRIIB
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