徐闻欢
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：南京医科大学基础医学院微生物学系与免疫学系更多>>
- 发文基金：江苏省教育厅自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核杆菌ESAT-6抗原多表位DNA疫苗的构建与表达被引量：5
- 2008年
- 目的:构建含3个结核杆菌ESAT-6抗原T细胞表位及Flt3配体基因的重组质粒,并使其在大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中表达。方法:用计算机软件预测结核杆菌ESAT-6抗原的T细胞表位谱,选取3个T细胞表位,并以Ala-Ala-Tyr(AAY)序列作为接头,合成全基因序列,定向克隆入真核双表达载体pIRES及质粒pIRES-FL。在酶切分析与序列测定后,用PEI转染至GMCs细胞,并行Western blot鉴定其体外表达。结果:核酸序列测定证实重组质粒构建正确,Western blot证实该重组质粒能在体外GMCs细胞中表达融合蛋白。结论:成功构建了结核杆菌ESAT-6抗原多表位基因重组质粒。
- 陈霞徐闻欢徐娟赵聃王迎伟
- 关键词：结核杆菌ESAT-6T细胞表位DNA疫苗
- 结核杆菌ESAT-6抗原及Flt3配体双表达核酸疫苗的构建与体外表达被引量：2
- 2007年
- 目的:构建可同时表达flt3配体(flt3-ligand,FL)和结核杆菌6kD早期分泌蛋白(ESAT-6)的重组pIRES质粒,并在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中表达,为进一步研究结核杆菌DNA疫苗提供实验基础。方法:采用PCR方法将FL和ESAT-6基因分别定向克隆入真核双表达载体pIRES。在酶切分析及序列测定后,用脂质体转染至GMC细胞,Westernblot鉴定其体外表达。结果:核酸序列测定证实重组质粒构建正确,该重组质粒在体外GMC细胞中能表达FL和ESAT-6两种蛋白。结论:成功构建了结核杆菌FL和ESAT-6双顺反子真核表达质粒,并在体外实现了共表达。
- 徐闻欢徐娟王迎伟陈霞高玲娟吴宜琴
- 关键词：结核杆菌核酸疫苗体外表达
- 结核杆菌ESAT-6重组核酸疫苗的制备及其免疫效果的初步研究
- 结核病是一种古老的传染性疾病，20世纪90年代中期以来，随着流动人口的剧增、结核菌／艾滋病毒双重感染和耐药结核菌的出现，结核病在全球范围内又重新流行。根据WHO最新报告，目前全球超过1／3的人口感染结核杆菌/(约20亿/...
- 徐闻欢
- 关键词：结核杆菌ESAT-6FL基因疫苗细胞免疫
- 文献传递
- 亚溶解剂量的补体C5b-9复合物诱导肾小球系膜细胞增生及其NF-κB活化的作用被引量：6
- 2006年
- 目的:研究亚溶解剂量补体C5b-9(SC5b-9)复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增生和细胞外基质(ECM)分泌的作用,并探讨NF-κB核转录因子是否介入SC5b-9的促增生效应。方法:体外纯培养大鼠GMCs,并行光镜、电镜及功能鉴定。质控SC5b-9后,将GMCs分为5组,即SC5b-9刺激组、SC5b-9+PDTC组(吡咯啉烷二甲基硫脲)、ATS组、灭活人血清组及完全营养液组。应用RT-PCR检测40minPCNA和FNmRNA水平;同时应用免疫组化检测18hGMCs增殖细胞核抗原(PCNA)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维粘连蛋白(FN)及细胞核内NF-κBp65表达情况。结果:实验40min,SC5b-9刺激组PCNA和FNmRNA表达上调,PDTC处理后表达则明显下降,其余3组PCNA均呈阴性,另3组FN则均有一定基础表达。SC5b-9刺激组,GMCs免疫组化显示:PCNA、α-SMA、FN、NF-κBp65表达增加,PDTC处理后则4者表达明显下调,其余各组,PCNA、α-SMA、NF-κBp65均呈阴性,FN亦有一定的基础表达。结论:SC5b-9可能通过激活NF-κB促进GMCs增生和ECM分泌。
- 佟建霞王迎伟邱文高玲娟徐娟吴宜琴徐静华徐闻欢
- 关键词：肾小球系膜细胞平滑肌肌动蛋白纤维粘连蛋白
