- 一种在大肠杆菌中生产可溶性重组蛋白质的方法及其应用
- 本发明属于基因工程技术领域。一种在大肠杆菌中将目标蛋白质表达菌株在低温下和分子伴侣一起共表达,从而非常有效地防止目标蛋白质包涵体的形成,大量增加可溶性产物的产量的方法。利用该技术方法能够显著增加提高可溶性重组人内皮抑素和...
- 华子春徐寒梅孙启明
- 文献传递
- 一种在大肠杆菌中生产重组内皮抑素的方法及其应用
- 本发明属于基因工程技术领域。本发明提供了一种在大肠杆菌中生产可溶性的、有生物活性的重组人内皮抑素的工艺和分离纯化方法。利用本发明表达和纯化的具有生物活性的重组人内皮抑素能够特异性、剂量依赖性地抑制内皮细胞的增殖,在鸡胚尿...
- 华子春徐寒梅
- 文献传递
- 微生物基因工程可溶性表达及产物后加工新技术
- 华子春张红霞方雷孙启明董晨杨杉郑伟娟袁榴娣陈成徐寒梅范奕自
- 微生物表达体系具有生长周期短、操作简便、价格低廉、表达水平高等优点,是基因工程首选表达体系。外源蛋白质在细菌中表达时,易形成无生物活性的包涵体。包涵体必须经体外变复性才能获得生物活性,因而成为限制大肠杆菌表达体系进一步应...
- 关键词:
- 关键词:重组蛋白质
- 重组抗血红素ScFv包涵体蛋白的复性及纯化研究被引量:3
- 2005年
- 抗血红素多二硫键ScFv在大肠杆菌中绝大多数表达产物为包涵体,为了获得可溶性的具有生物活性的ScFv,摸索了不同的复性条件,包括透析法、稀释和层析相结合的方法。研究发现,先对溶解的变性ScFv溶液稀释,进行初步的蛋白质复性,再利用Sephadex G-25凝胶层析进一步复性、降低变性剂浓度和纯化,至少可以得到95%纯度,产率为150mg/L的目标蛋白,通过一次凝胶过滤层析,达到了去除变性剂、复性及纯化ScFv蛋白三种目的,为多二硫键ScFv在大肠杆菌中的表达和纯化提供了一种经济可行的方法。
- 徐寒梅汤雅岚戴俊姚震声华子春
- 关键词:蛋白质复性复性血红素包涵体变性剂凝胶过滤层析
- 一种在大肠杆菌中生产可溶性重组蛋白质的方法及其应用
- 本发明属于基因工程技术领域。一种在大肠杆菌中将目标蛋白质表达菌株在低温下和分子伴侣一起共表达,从而非常有效地防止目标蛋白质包涵体的形成,大量增加可溶性产物的产量的方法。利用该技术方法能够显著增加提高可溶性重组人内皮抑素和...
- 华子春徐寒梅孙启明
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