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家蚕核多角体病毒P10基因启动子结构与功能分析被引量：5: 1995年; 前文曾报导过家蚕核多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）Ｐ１０结构基因和启动子全顺序￣［１］。经突变法消除起始码ＡＴＧ，并分离上游－２３０位－＋１位含完整启动子片段，在此Ｐ１０启动子片段后拼接报导基因（昆虫荧光素酶基因，Ｌｕｃ，Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）构建成表达质粒ｐＢｍｐ１０－Ｌｕｃ。质粒ｐＢｍｐ１０－ＬｕｃＤＮＡ转染有野生型ＢｍＮＰＶ感染的家蚕Ｂｍ－Ｎ细胞可测出Ｌｕｃ基因的瞬时表达。由启动子５’端（－２３０位）向Ｌｕｃ基因节律缺失删节，获得缺失至－１３５、－１１１、－３８位的各质粒（ｐＢｍｐ１０－１３５Ｌｕｃ、ｐＢｍｐ１０－１１１Ｌｕｃ、ｐＢｍｐ１０－３８Ｌｕｃ）。功能检测证实除ｐＢｍｐ１０－３８Ｌｕｃ外，其它质粒都有Ｌｕｃ基因瞬时表达，说明－３８－－１１１位结构顺序是Ｐ１０启动子功能所必须的。在苜蓿尺蠖核多角体病毒（ＡｃＭＮＰＶ）感染的ＢｍＮＰＶ非敏感细胞Ｓｆ－９中也得到相同的结果，说明ＢｍＮＰＶＰ１０启动子和ＡｃＭＮＰＶＰ１０启动子的调节因子可能是相似的。; 张燕张颖张志芳吴祥甫; 关键词：家蚕核多角体病毒启动子

重组家蚕病毒表达系统转移载体的构建和β─半乳糖苷酶的表达被引量：12: 1994年; 本文从中国农科院蚕业研究所提供的我国家蚕核多角体病毒镇江株中获得了多角体蛋白的强启动子，用此启动子构建了家蚕病毒表达系统的转移载体。外源基因能在此启动子控制下在家蚕细胞和虫体中进行高效表达。用此载体我们首先成功地在家蚕虫体中高效表达了β－半乳糖苷酶，表达量达到５８０μｇ／条蚕，从而证实我们构建的载体是可靠的、有效的，可用于家蚕重组病毒表达外源基因的研究。; 张颖吴祥甫; 关键词：家蚕核型多角体病毒半乳糖苷酶

家蚕核多角体病毒DNA复制起始点hr3的结构功能被引量：13: 1995年; 从家蚕核多角体病毒(BmNPV)基因组克隆得到含同源重复序列3(hr3)的Pst I K片断。证明含hr3的质粒DNA以野生型BmNPV为辅助病毒,在BmN细胞中能够复制,表明hr3是BmNPV的DNA复制起始点。BmNPV的hr3以野生型苜蓿尺蠖核多角体病毒(AcNPV)为辅助病毒转染Sf9细胞亦得到复制,说明与AcNPV复制有关的因子亦能作用于BmNPV的复制起始点。测定了hr3的全序列,并和AcNPV的hr序列作了比较,对hr可能采取的进化方式作了讨论。; 张志芳张颖吕鸿声李载平吴祥甫; 关键词：家蚕核多角体病毒 DNA

家蚕核多角体病毒解链酶基因的克隆及部分序列分析被引量：13: 1994年; 家蚕核多角体病毒解链酶基因的克隆及部分序列分析张志芳，张颖，吕鸿声，吴祥甫（中国科学院上海生物化学研究所上海２０００３１）关键词家蚕核多角体病毒（ＢｍＮＰＶ），解链酶基因，限制性内切酶谱家蚕核多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）是杆状病毒Ａ亚组单粒包埋型的代表种...; 张志芳张颖吕鸿声吴祥甫; 关键词：基因克隆家蚕核型多角体病毒

与肿瘤转移抑制基因nm_（23）高度同源的nm_（23）－H_3b基因的克隆和被引量：15: 1994年; ｎｍ＿（２３）是一种有效的肿瘤转移抑制基因，目前已发现的两种人类ｎｍ＿（２３）（Ｈ＿１和Ｈ＿２）的氨基酸肽具有８８％的同源性。我们采用ＰＣＲ技术从人肝基因组ＤＮＡ中扩增ｎｍ＿（２３）序列，经克隆筛选得到５’端３７５ｂｐ克隆，命名为ｎｍ＿（２３）－Ｈ３ｂ。序列分析发现，ｎｍ２３－Ｈ＿３ｂ在４０ｂｐ～７０ｂｐ之间与原序列完全不同，其他序列与ｎｍ＿（２３）－Ｈ１有８６％的同源性，与ｎｍ＿（２３）－Ｈ２有９０％的同源性。ＢｇｌＩＩ消化人肝基因组ＤＮＡ，用ｎｍ＿（２３）－Ｈ＿３ｂＤＮＡ为探针，经ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔ后发现１０．５、７．９和４．０ｋｂ的３条杂交带，未见与ｎｍ＿（２３）－Ｈ＿１和Ｈ＿２相同的杂交带。因此认为ｎｍ＿（２３）－Ｈ＿３ｂ是一种与人肿瘤转移抑制基因ｎｍ＿（２３）－Ｈ＿１和Ｈ＿２高度同源的新基因克隆。; 江贤鹏刘康达周信达汤钊猷张志芳张颖吴祥甫; 关键词：肿瘤抑制基因 PCR NM23

家蚕核型多角体病毒P10基因的克隆及核苷酸序列分析被引量：9: 1992年; 杆状病毒P10基因与多角体蛋白基因一样,都是由强启动子控制的高效表达晚期基因,且非病毒复制所必需,故在构建杆状病毒载体表达系统方面受到研究工作者的重视。苜蓿尺蠖核多角体病毒(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)和黄杉毒蛾核型多角体病毒(Orgyia pseudotsugate nuclear polyhedrosis virus,OpMNPV); 张耀洲张颖吴祥甫吕鸿声李载平; 关键词：核苷酸序列核多角体病毒家蚕

乙肝病毒S基因在家蚕细胞及蚕体内高效表达被引量：20: 1995年; 把人乙型肝炎病毒（ａｄｒ）的表面抗原Ｓ基因插入到家蚕核型多角体病毒基因组中，构建了重组病毒ＢｍＮＰＶＳ。用重组病毒感染家蚕细胞，测得每毫升培养物（１×１０＾５细胞）ＨＢｓＡｇ表达量达３５．５ｕｇ；感家蚕幼虫和蛹，经检测表明ＨＢｓＡｇ产量平均为每头蚕约７５０ｕｇ，每只蛹约为６９０ｕｇ。初步纯化的表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ和电镜观察证实，表达产物是直径为２２ｎｍ的颗粒。; 周耐明张颖金伟李载平吴祥甫; 关键词：乙型肝炎病毒表面抗原基因表达家蚕基因工程

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张颖