周冀明
- 作品数：8 被引量：94H指数：4
- 供职机构：西南民族学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 盐藻磷酸甘油脱氢酶基因cDNA文库的构建被引量：14
- 1997年
- 采用Ｌａｍｂｄａｇｔ１０载体构建了盐藻ｃＤＮＡ文库，文库大小为１０６／ｍＬ，插入片段平均长度大于１ｋｂ．根据果蝇、兔、鼠编码其３－磷酸甘油脱氢酶基因的辅酶ＮＡＤ的结合功能区保守序列设计一对引物，大小分别为２１ｂｐ和１８ｂｐ．ＰＣＲ扩增得到与果蝇相同的２９０ｂｐ特异扩增片段，以该片段为探针，采用缺口平移系统标记，原位杂交。
- 周冀明白林含吴晓蓉蒋彦王峰刘世贵
- 关键词：盐藻CDNA文库绿藻基因
- 红原 - 若尔盖草地民间植物意识初步调查
- 1998年
- 青藏高原地域辽阔，植物资源丰富，五十年代以来，对此作了许多调查，但许多研究结果与实际生产条件难得结合，为加深不同化背景之间的了解，必须多关注当地人的看法，为此我们以部分当地的豆科植物与非豆科植物（为对照）进行了民间植物知识调查。当地牧民对禾本科的评价一律较高，对豆科的评价一律较低。
- 白鸿烈周冀明蒋彦祥秋多吉赵佐成
- 关键词：草地豆科牧草禾本科牧草
- 根癌农杆菌介导转化诸葛菜获得转基因植株被引量：38
- 1997年
- 以诸葛菜下胚轴和子叶为材料，在附加BA和NAA的MS培养基上诱导芽再生，在1／2MS培养基上诱导生根，获得完整再生植株，建立了诸葛菜组织培养高频再生体系，再用很癌农杆菌介导转化诸葛菜下胚轴和子叶，在附加一定量的氨苄青霉素、头孢霉素和卡那霉素的相应培养基上进行筛选，并培养再生成苗，获得完整抗性再生植株，移植到盛有土壤的花盆中均可存活，生长正常。将再生植株叶片，进行GUS、NPTⅡ酶活性测定和Southernblot分子杂交，证实外源基因已稳定整合到植物基因组中，并高效表达。
- 周冀明卫志明许智宏刘世贵罗鹏
- 关键词：根癌农杆菌转基因植株
- 诸葛菜下胚轴和子叶原生质体培养被引量：2
- 1996年
- 以诸葛菜无菌苗的下胚轴和子叶组织为材料，分离原生质体，ＦＷ产量分别为５×１０８／ｇ和１×１０７／ｇ．下胚轴原生质体经纯化后在原生质体培养基中作液体浅层暗培养，培养密度为５×１０４／ｍＬ，培养第二天即出现第一次分裂，７～９ｄ后分裂频率约５０％，两周后出现大量细胞团；转入扩增培养基中，即扩增出大量小愈伤，植板率约为５％；愈伤转入分化培养基后即可诱导分化成苗，分化率达１００％，随后转到生根培养基中，即形成完整植株．子叶原生质体的培养方式与下胚轴原生质体培养基本相同，结果也类似．
- 周冀明卫志明刘世贵罗鹏
- 关键词：诸葛菜下胚轴子叶原生质体培养
- GUS基因在诸葛菜子叶原生质体中的瞬间表达被引量：3
- 1995年
- 本文以诸葛菜无菌苗子叶组织为材料，采用原生质体培养获得成功，建立了原生质体培养高频再生体系，植板率３％，植株再生频率１００％。在此基础上，本文首次研究了ＰＥＧ介导转化诸葛菜原生质体的影响因素，系统地试验了ＰＥＧ法转化子叶原生质体的过程，发现：最适质粒量为２５－３０μｇ；ＰＥＧ终浓度为１５％，ｐＨ８．０；另外，表达效率还与质粒的大小有关，较小的质粒具有相对较高的转化效率；而ＣＴ－ＤＮＡ以及热击处理未见有明显的促进作用。
- 周冀明卫志明刘世贵罗鹏
- 关键词：诸葛菜原生质体GUS基因
- 根癌土壤杆菌介导转化诸葛菜子叶获得转基因植株被引量：25
- 1996年
- 采用诸葛菜子叶为材料,在MS+BA3mg/L+NAA0.2mg/L培养基上诱导芽的再生,1/2MS+IBA0.03mg/L上诱导生根,获得完整再生植株,建立了诸葛菜组织培养高频再生系统,其再生率可达100％。采用土壤杆菌介导转化诸葛菜子叶,在附加一定量的氨苄青霉素、头孢霉素和卡那霉素的相应培养基上进行筛选,进而培养出再生成苗。获得完整植株,经GUS和NPTⅡ酶活测定,以及Southern blot分析,证实为转基因植株。转化子叶的芽再生率为51％,获得完整转基因植株的转化率为5.53％。在国内外首次建立了以根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)为载体,诸葛菜子叶为受体的遗传操作系统。
- 周冀明卫志明许智宏刘世贵罗鹏
- 关键词：诸葛菜子叶转基因植株根癌土壤杆菌
- PEG法介导转化诸葛菜下胚轴原生质体获得转基因植株被引量：10
- 1996年
- 采用诸葛菜无菌苗的下胚轴组织为材料，分离原生质体，在原生质体培养基中作液体浅层暗培养，植板率为５％，植株再生频率为１００％。作者进而开展了遗传转化研究。为研究ＰＥＧ介导转化诸葛菜原生质体的影响因素，通过瞬间表达，实验了ＰＥＧ法转化子叶原生质体的过程，在此基础上将分离纯化后的原生质体与带ＨＰＴ基因的质粒ＤＮＡ（ｐＢＩ２２２）混合，ＨＰＴ基因作选择标记，ＰＥＧ介导转化；重新收集转化后的原生质体，以５×１０４／ｍｌ的密度在原生质体培养基中作浅层培养；培养１０—１５天后用２５ｍｇ／Ｌ的潮霉素（ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ）进行筛选，一月后出现少量细胞团，转入含潮霉素５０ｍｇ／Ｌ的扩增培养基扩增愈伤组织，进而转入含５０—１００ｍｇ／Ｌ潮霉素的分化培养基诱导分化成苗，分化率为１００％，转入生根培养基中生根成完整植株。抗性植株再生率为４×１０（－５）。在获得再生转基因植株后，以再生植株叶片为材料，进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分子杂交，证实外源基因已稳定整合到植物基因组中并表达，再生转基因植株频率为１０（－５）。国内外首次转化诸葛菜属植物原生质体获得成功。
- 周冀明卫志明许智宏刘世贵罗鹏
- 关键词：诸葛菜下胚轴原生质体培养转基因植株
- 诸葛菜若干外植体再生力试验结果被引量：3
- 1996年
- 用诸葛菜的不同器官、组织作外植体进行离体培养，测定其再生力，首次得到下列结果。１．用诸葛菜子叶切块进行离体培养，上述外植体产生胚状体，并再生小苗，胚状体的发生频率达１００％；２．用诸葛菜花托进行离体培养，从花托直接产生小芽，以后长成小苗，花托的出芽率为７８２％；３．用诸葛菜的花药进行离体培养，获得了混倍体花粉植株，诱导率达１０％；４．用诸葛菜的子叶组织分离原生质体，原生质体经纯化后在培养基中作液体浅层暗培养，两周后将细胞团转入扩增培养基，待愈伤组织长出后，将其转入分化培养基中即形成完整植株，分化频率达１００％。
- 罗鹏周冀明吴沿友张雪梅
- 关键词：诸葛菜十字花科外植体离体培养植株再生
