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吴健敏

作品数：13 被引量：20H指数：3
供职机构：浙江医科大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 13篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生
  • 6篇生物学

主题

  • 9篇细胞
  • 7篇细胞色素
  • 7篇基因
  • 4篇克隆
  • 3篇致癌
  • 3篇人细胞
  • 3篇人细胞色素
  • 3篇细胞色素P4...
  • 2篇代谢
  • 2篇代谢活化
  • 2篇毒理
  • 2篇遗传毒理
  • 2篇乙型
  • 2篇乙型肝炎
  • 2篇致癌物
  • 2篇脱氧
  • 2篇脱氧核糖
  • 2篇脱氧核糖核酸
  • 2篇抗原
  • 2篇化学诱导

机构

  • 13篇浙江医科大学

作者

  • 13篇吴健敏
  • 10篇余应年
  • 6篇董海涛
  • 3篇朱丽君
  • 2篇赵忠良
  • 2篇吕新法
  • 2篇胡中荣
  • 1篇陆应麟
  • 1篇陈巧芳
  • 1篇陈星若

传媒

  • 4篇癌变．畸变．...
  • 2篇中国病理生理...
  • 2篇中国药理学与...
  • 2篇浙江医科大学...
  • 1篇卫生毒理学杂...
  • 1篇中华预防医学...
  • 1篇中国公共卫生...

年份

  • 1篇1998
  • 1篇1997
  • 3篇1996
  • 6篇1995
  • 2篇1993
共 13 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
转基因细胞CHL－2B6的建立和在遗传毒理试验代谢活化中的应用被引量：1
1996年
应用稳定表达ＣＹＰ２Ｂ６的转基因细胞系ＣＨＬ－２Ｂ６对一组前致突变物／致癌物进行双核微核试验，同时以母细胞系ＣＨＬ为对照，结果表明：５种前致突变物ＮＮＫ、ＤＥＮ、ＮＭ、ＭＢＩ和ＣＰ均能诱导ＣＨＬ－２Ｂ６细胞的徽核率显著增加，其中ＮＮＫ、ＣＰ和ＡＦＢ１具有剂量－反应关系，在最高受试浓度微核率约增加３～８倍。显示转基因细胞系ＣＨＬ－２Ｂ６在化学致癌物的遗传毒理学研究方面具有重要的应用价值．
吴健敏余应年陈显若
关键词：细胞色素P450微核试验
CYP2B7cDNA的克隆,鉴定及真核细胞重组表达载体的构建被引量：2
1995年
应用ＲＴ—ＰＣＫ技术和ＤＮＡ重组技术从人肝组织中克隆细胞色素Ｐ４５０２Ｂ７（ＣＹＰ２Ｂ７）基因的ＣＤ－ＮＡ片段至ｐＧＥＭ—３Ｚ载体上，经限制性内切酶切图谱分析和ＤＮＡ序列分析确证克隆的片段为ＣＹＰ２Ｂ７的ｃＤＮＡ。然后将该片段亚克隆入一合适真核细胞表达载体的ＢａｍＨＩ位点处，获得４个克隆。其中１个含有正向插入片段，３个含有反向插入片段。为导入哺乳类细胞中，建立稳定表达ＣＹＰ２Ｂ７ｃＤＮＡ的细胞株打下基础。
吴健敏董海涛余应年朱丽君
关键词：细胞色素P450基因基因克隆CDNA基因表达
抗HBS单克隆抗体的制备及初步应用
1993年
利用冻融裂解Dane颗粒的方法提取HBsAg,免疫小鼠后,取其脾细胞与FO骨髓瘤细胞融合,获得4株分泌抗HBs McAb的杂交瘤细胞株。接种同系小鼠腹腔诱生的腹水用ELISA测定抗HBs效价达3.2～6.4×10~6。所制成的抗HBs McAb与纯化HBsAg、高滴度HBsAg阳性血清能产生沉淀反应。用HRP标记的抗HBs McAb作ELISA测定血清HBsAg,与用放射免疫检测的30份血清及用北京302医院EIA试剂测试的40份血清的结果符合。
吕新法吴健敏赵忠良胡中荣
关键词：单克隆抗体乙型肝炎表面抗原
细胞色素P4501A1基因mRNA的化学诱导及在人肝中的基础表达被引量：2
1996年
利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交及逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术研究了几种传代培养细胞和成人肝组织及人胚胎肝组织细胞色素Ｐ４５０１Ａ１（１Ａ１）基础表达水平并观察了几种化学诱导剂对人羊膜细胞ＦＬ系和原代胚肝细胞该基因ｍＲＮＡ水平的诱导．结果显示：３－甲基胆蒽，苯巴比妥，β－萘黄酮在不同程度上能高诱导ＦＬ细胞１Ａ１ｍＲＮＡ表达．ＲＴ－ＰＣＲ结果显示ＣＨＬ细胞及Ｖ７９细胞存在基础表达，但Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果提示其表达量极低．成人肝脏中１Ａ１亦存在极低的表达水平，而人胚胎肝脏不能用高灵敏度的ＲＴ－ＰＣＲ检测到痕迹表达，提示胚胎发育时期１Ａ１基因处于完全关闭状态．
董海涛吴健敏余应年
关键词：细胞色素化学诱导肿瘤发生
转基因细胞系CHL-3A4的建立及其代谢活化作用被引量：9
1998年
目的建立ＣＨＬ３Ａ４细胞系为某些遗传毒性化合物的代谢途径研究提供模型细胞系，并用于新合成化学物质的致突变性检测。方法应用ＲＴＰＣＲ和ＤＮＡ重组技术从人肝组织中克隆细胞色素Ｐ４５０３Ａ４基因的ｃＤＮＡ至ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＭ１３载体上，经限制性内切酶图谱分析和克隆片段部分序列测定，证实为ＣＹＰ３Ａ４ｃＤＮＡ。然后构建真核细胞重组表达质粒ｐＲＥＰ９３Ａ４，导入中国仓鼠ＣＨＬ细胞。结果建立了ＣＨＬ３Ａ４转基因细胞系，双核细胞微核试验证明该细胞系能代谢活化黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）、杂色霉菌毒素（ＳＴＣ）、环磷酰胺（ＣＰＡ）。结论所建ＣＨＬ３Ａ４细胞系确实能表达人细胞色素Ｐ４５０３Ａ４，并能代谢活化ＡＦＢ１、ＳＴＣ、ＣＰＡ。
陈巧芳吴健敏余应年
关键词：代谢活化
冻融裂解和蛋白变性剂对肝组织内HBV抗原释放的影响
1993年
本文用酶联免疫吸附法测定,观察冻融裂解和蛋白变性剂对乙型肝炎病毒抗原的释放作用。实验结果发现,血清HBV标志阳性病人的癌旁肝组织经反复冻融或与蛋白变性剂作用,均可使HBV抗原释放或活性降低。
赵忠良吕新法吴健敏胡中荣
关键词：乙型肝炎抗原冷冻ELISA
人细胞色素P4502B6在哺乳类细胞中的稳定表达被引量：3
1996年
〗在诱变试验中广泛应用人羊膜ＦＬ细胞，中国仓鼠ＣＨＬ和Ｖ７９细胞，但由于它们不能表达内源性细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ）活化前致突变物，而严重限制了它们的使用．本工作构建了携有编码ＣＹＰ２Ｂ６单胺氧化酶的ｃＤＮＡ重组表达体并分别导入上述三种细胞中表达，经Ｇ４１８抗性筛选，建立了ＦＬ－２Ｂ６，ＣＨＬ－２Ｂ６和Ｖ７９－２Ｂ６三种转基因细胞系，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交证明它们都有ＣＹＰ２Ｂ６的表达．在ＣＨＬ－２Ｂ６细胞中还测得较高水平的７－乙氧基－４－三氟甲基香豆素去乙基酶活性，它对前致突变物甲基亚硝胺吡啶酮的致微核形成作用有很高敏感性，并呈剂量效应关系，但其母系细胞皆为阴性．
吴健敏余应年陈星若
关键词：细胞色素基因表达哺乳类化学致癌
人细胞色素P450在哺乳类细胞中的表达和应用
1997年
人细胞色素Ｐ４５０在哺乳类细胞中的表达和应用吴健敏综述余应年审校浙江医科大学病理生理教研室（杭州３１００３１）已知大多数化学致癌物属前致癌物，需经各种酶类的代谢活化，以活性状态与ＤＮＡ等大分子中的亲核基团结合诱发突变。细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ）是参与...
吴健敏
关键词：细胞色素P450EB病毒致癌物遗传毒理
化学诱导剂对培养细胞CytP450IA1基因mRNA水平诱导及肝组织该
1995年
化学诱导剂对培养细胞ＣｙｔＰ４５０ＩＡ１基因ｍＲＮＡ水平诱导及肝组织该基因基础表达水平的研究余应年，董海涛，吴健敏（浙江医科大学病理生理教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）细胞色素Ｐ４５０ＩＡ１（ＣｙｔＰ４５０ＩＡ１）基因表达可被多环芳烃类...
余应年董海涛吴健敏
关键词：化学诱导剂MRNA化学诱导剂肝组织致癌物
携细胞色素P4501A1cDNA的高表达型重组载体构建及转基因细胞系的
1995年
携细胞色素Ｐ４５０１Ａ１ｃＤＮＡ的高表达型重组载体构建及转基因细胞系的建立董海涛，吴健敏，余应年，朱丽君（浙江医科大学病理生理学教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）构建具高效、稳定、持续表达细胞色素Ｐ４５０基因产物的细胞系对建立更符合体内状...
董海涛吴健敏余应年朱丽君
关键词：基因重组遗传毒理学
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