刘颖 作品数:12 被引量:53 H指数:4 供职机构: 上海海洋大学水产与生命学院 更多>> 发文基金: 上海市教育委员会重点学科基金 博士科研启动基金 上海市教育发展基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
异育银鲫促甲状腺激素β亚基基因的克隆及序列分析 被引量:4 2006年 利用RT-PCR、RACE及克隆等方法获得了异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因全长cDNA序列。该cDNA全长926 bp,5’端非编码区68 bp;3’端非编码区372 bp;开放阅读框(ORF)486 bp,编码161个氨基酸。经序列分析显示,其编码的氨基酸序列与金鱼[Carassius auratus(goldfish)]、鲤(Cyprinus carpio)、鳙(Aristichthysnobilis)、斑马鱼(Danio rerio)、虹鳟(Salmo gaidnerii)、鲑(Salmo salar)、鳗鲡(Anguilla anguilla)具有较高的相似性,其相似性分别为91.3%、87.6%、83.2%、77%、58.6%、56.1%、43.55%,同源性较高,这说明TSHβ亚基在长期的进化中具有较高保守性。而且在比较中还发现:异育银鲫和其它7种鱼类相比在5’端多11个氨基酸序列,并且都含有定位保守的12个半胱氨酸残基和一个N糖基化位点。 曲宪成 杨艳红 刘颖关键词:异育银鲫 外源性皮质醇对异育银鲫TSH-βmRNA表达和血清甲状腺激素水平的影响 2007年 运用Sybr Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性皮质醇(cortisol)对异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSH-β)mRNA表达和血清甲状腺激素水平的影响。实验设计为10周,实验组每两周注射一次0.2 mg/kg体重的cortisol(用57%酒精溶解),对照组注射同剂量的57%酒精。实验期间没有投喂饲料。在本实验条件下,研究结果显示:注射3次外源性cortisol后,异育银鲫TSH-βmRNA表达量与对照组相比略有下降;注射5次后,与对照组相比显著降低(P<0.05)。另一方面,RIA结果显示:注射3次外源性cortisol后,实验组与对照组相比,血清甲状腺激素T3和T4含量虽略有升高,但无显著差异;而注射5次后显著升高(P<0.05)。以上结果提示:外源性cortisol能够影响异育银鲫脑下垂体-甲状腺轴。 曲宪成 杨艳红 刘颖 周正峰 崔严慧关键词:异育银鲫 皮质醇 SYBR 放射免疫方法 饲料中添加雨生红球藻对七彩神仙鱼生长、体色及抗氧化力的影响 被引量:26 2016年 为探讨雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)对七彩神仙鱼(Symphysodon haraldi)增色效果以及对机体抗氧化力的影响,分别用添加0(对照组)、3.33、6.66、9.99、13.32和16.65 g/kg雨生红球藻(折算成虾青素添加量分别为0、100、200、300、400和500 mg/kg饲料)的饲料饲喂七彩神仙鱼6周,测定七彩神仙鱼皮肤、鳍条、肌肉和肝脏中的虾青素含量、体表的三刺激值和肝脏总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽(GSH)含量。结果显示:饲料中添加雨生红球藻可以显著提高七彩神仙鱼的增重率,当添加量为9.99 g/kg其增重率最大。七彩神仙鱼皮肤、鳍条、肌肉和肝脏虾青素含量随着雨生红球藻添加量的增加而升高,当雨生红球藻添加量超过6.66 g/kg,各组织中虾青素的含量趋于稳定。随着雨生红球藻添加量增加,皮肤L*值(亮度)下降、而a*值(红度)和b*值(黄度)升高,皮肤中虾青素含量与三刺激值间的相关性均达到高度相关,并与a*值的相关性最高。随着雨生红球藻添加量的增加,七彩神仙鱼肝脏的T-AOC和GSH的含量也逐渐升高。结果表明,在饲料中添加雨生红球藻可提高七彩神仙鱼的增重率,提高七彩神仙鱼皮肤虾青素含量,改善七彩神仙鱼体色,增强机体的抗氧化能力;雨生红球藻的添加量建议为6.66-9.99 g/kg(虾青素含量为200-300 mg/kg)。 王磊 陈再忠 冷向军 高建忠 刘颖 刘汉鹏 宋雪露关键词:三刺激值 抗氧化力 团头鲂促甲状腺激素β亚基基因的克隆及序列分析 促甲状腺激素对鱼类的生长、发育和繁殖起着重要的作用。它是由腺垂体分泌的一种异源二聚体糖蛋白激素,它由非特异性的α亚基和特异性的β亚基以非共价键连接而成,在调控甲状腺功能及维持体内甲状腺激素水平稳定等方面具有重要的作用。在... 曲宪成 杨艳红 刘其根 刘颖关键词:团头鲂 CDNA末端快速扩增 克隆 文献传递 外源性雌二醇对异育银鲫脑垂体-甲状腺轴的影响 被引量:1 2007年 运用SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性雌二醇(estradiol-17β,E2)对异育银鲫脑垂体-甲状腺轴的影响。实验设计时间为10周,实验组每2周注射一次0.5mg.kg-1体重的E2(用57%酒精溶解),对照组注射同剂量的57%酒精。实验期间没有投喂饲料。在实验条件下,SYBR Green I荧光定量RT-PCR分析结果显示,注射3和5次外源性E2后,促甲状腺激素β亚基mRNA的表达水平与对照组相比均未有显著变化,但随着注射次数的增加,总体呈现升高的趋势。另一方面,RIA结果显示,注射3次外源性E2后,血清中甲状腺激素T3和T4含量水平与对照组相比均显著升高(P<0.05);注射5次后,与对照群相比差异极显著(P<0.01)。以上结果提示,外源性E2影响异育银鲫的正常生理状态。 曲宪成 杨艳红 刘颖 周正峰 崔严慧关键词:异育银鲫 SYBR 放射免疫方法 T4 团头鲂促性腺激素GtH Iβ亚基基因5′端启动子区克隆及表达载体构建 被引量:2 2008年 本研究利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Iβ(GtH Iβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHIβ亚基基因5′端侧翼序列长度为479bp,其中包括TATA盒、ARE、PRE、ERE、SF-1、Ptx1等可能对GtH Iβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点。利用PCR方法在基因组中扩增得到了3个缺失片段,并同全长片段一起分别连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂GtH Iβ亚基基因5′端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础。 曲宪成 崔严慧 周正峰 刘颖 金一春 胡萍华 薛婷君 王琼关键词:团头鲂 启动子 团头鲂促甲状腺激素β亚基基因的克隆及序列分析 被引量:1 2006年 利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体中促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因,并对其基因结构和系统进化进行分析。该基因cDNA序列全长614 bp;5’端非翻译区100 bp;3’端非翻译区61 bp;开放阅读框架(ORF)453 bp,共编码150个氨基酸。其编码的氨基酸序列与鳙鱼(Aristichthys no-bilis)、鲤鱼(Cyprinus carpio)、金鱼(Carassius auratus)、斑马鱼(Danio rerio)、鲑鱼(Salmo salar)、虹鳟(Oncorhynchusmysiss)、欧洲鳗鲡(A.anguilla)的相似性分别为:99.3%、92%、92%、82%、62.6%、62.6%和56%。核苷酸序列分析显示,团头鲂与鳙鱼相似性最高,为98.23%;与欧洲鳗鲡相似性最低,为48.7%。说明TSHβ亚基在长期的进化中相当保守。在所比较的9种鱼类该基因ORF氨基酸序列中都含有定位相同的12个半胱氨酸残基,它们在成熟肽中形成6个二硫键,这对保证促甲状腺激素的空间结构,维持促甲状腺激素的生理功能起着重要的作用。该基因的成功克隆不仅为TSHβ的分子进化和相似性比较研究提供了新的资料,而且对进一步研究该基因的功能、表达具有重要的意义。[中国水产科学,2006,13(1):128-133] 曲宪成 杨艳红 刘其根 刘颖关键词:团头鲂 CDNA末端快速扩增 克隆 上海观赏水族市场调查及发展前景分析 被引量:3 2015年 上海观赏水族市场于20世纪90年代兴起,近年来发展迅速。为进一步了解其发展现状,笔者于2014年7月对上海水族市场进行了系统调查分析,结果显示,上海水族市场具有数量多、分布广,多为中小型规模,小型低档鱼较多,淡水鱼种类远高于海水鱼,观赏水草种类较少,价位适中等特点;水族市场存在泛而不精、品质不佳、竞争无序、买卖双方知识和技术不足等问题。观赏水族业的兴起能丰富群众业余生活、促进相关产业发展、缓解就业压力,有着巨大的发展空间,上海有望成为国际化观赏鱼交流、中转和集散中心。 刘颖 李丽 孙大川关键词:水族市场 生物调查 团头鲂PGPH α亚基基因5’端侧翼序列克隆及其表达载体的构建 被引量:3 2008年 首先运用PCR-末端加尾法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体糖蛋白激素α亚基(Pituitary glycoprotein hormone α subunit,PGPH α)基因5’端侧翼序列;然后利用生物信息学理论对该序列进行了序列分析;最后在序列分析结果的基础上,构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示,克隆所得到的团头鲂PGPH α亚基基因5’端侧翼序列长1399bp;其序列中包含潜在的TATA盒、GC盒,以及ERE、TRE、CRE、PGBE等对PGPH α亚基基因转录调控起重要作用的转录因子结合位点;启动子区域位于-40-10bp处。利用PCR方法扩增得到了全长1439bp以及1120bp、532bp、173bp均包含转录起始位点下游40bp序列的缺失片段,并将其连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂PGPH α亚基基因5’端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础。 曲宪成 周正峰 崔严慧 刘颖 胡萍华 金一春 尚婧瑨关键词:团头鲂 启动子 循环水养鳗系统生物过滤器中微生物群落的代谢特性 被引量:6 2015年 为了研究鳗鱼循环水养殖系统不同水处理单元微生物群落的碳代谢特征,实验采用Biolog Eco技术,分析了流化床2个槽和滴流式微珠生物过滤器上、中、下3层的生物膜微生物群落功能多样性。结果显示,流化床2个槽和滴流式微珠生物过滤器中、下层微生物多样性指数(Shannon-Wiener指数、Simpson指数和Pielou指数)无显著差异(P>0.05),但均显著高于滴流式微珠生物过滤器上层(P<0.05)。平均色度变化(AWCD)与主成分分析(PCA)均证明滴流式微珠生物过滤器上层与其他采样点微生物代谢差异较大。各采样点微生物未对ECO板某一大类碳源表现出偏好,但对衣康酸、D-半乳糖醛酸、L-精氨酸、L-天门冬酰胺、L-丝氨酸、D-甘露醇、D-木糖、N-乙酰-D-葡萄糖氨、吐温40、吐温80、苯乙胺等单一碳源利用较好;而对γ-羟丁酸、α-丁酮酸、D,L-α-磷酸甘油和1-磷酸葡萄糖利用较差。某些碳源种类如D-葡糖胺酸、α-D-乳糖、2-羟基苯甲酸仅能被部分采样点的微生物利用。本实验利用Biolog Eco PlateTM技术研究中试规模循环水处理单元微生物群落代谢特征,研究结果为生物过滤器的调控提供了一种新的思路,即可通过碳源调节来促进生物膜微生物群落结构的改变,以此提高水处理效率。 刘颖 李丽 孙大川 朱云昊 谭洪新 徐奔关键词:碳代谢 生物膜 循环水养殖系统