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异育银鲫促甲状腺激素β亚基基因的克隆及序列分析被引量：4: 2006年; 利用RT-PCR、RACE及克隆等方法获得了异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因全长cDNA序列。该cDNA全长926 bp,5’端非编码区68 bp;3’端非编码区372 bp;开放阅读框(ORF)486 bp,编码161个氨基酸。经序列分析显示,其编码的氨基酸序列与金鱼[Carassius auratus(goldfish)]、鲤(Cyprinus carpio)、鳙(Aristichthysnobilis)、斑马鱼(Danio rerio)、虹鳟(Salmo gaidnerii)、鲑(Salmo salar)、鳗鲡(Anguilla anguilla)具有较高的相似性,其相似性分别为91.3%、87.6%、83.2%、77%、58.6%、56.1%、43.55%,同源性较高,这说明TSHβ亚基在长期的进化中具有较高保守性。而且在比较中还发现:异育银鲫和其它7种鱼类相比在5’端多11个氨基酸序列,并且都含有定位保守的12个半胱氨酸残基和一个N糖基化位点。; 曲宪成杨艳红刘颖; 关键词：异育银鲫

团头鲂促甲状腺激素β亚基基因的克隆及序列分析: 促甲状腺激素对鱼类的生长、发育和繁殖起着重要的作用。它是由腺垂体分泌的一种异源二聚体糖蛋白激素,它由非特异性的α亚基和特异性的β亚基以非共价键连接而成,在调控甲状腺功能及维持体内甲状腺激素水平稳定等方面具有重要的作用。在...; 曲宪成杨艳红刘其根刘颖; 关键词：团头鲂 CDNA末端快速扩增克隆; 文献传递

外源性雌二醇对异育银鲫脑垂体-甲状腺轴的影响被引量：1: 2007年; 运用SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性雌二醇(estradiol-17β,E2)对异育银鲫脑垂体-甲状腺轴的影响。实验设计时间为10周,实验组每2周注射一次0.5mg.kg-1体重的E2(用57%酒精溶解),对照组注射同剂量的57%酒精。实验期间没有投喂饲料。在实验条件下,SYBR Green I荧光定量RT-PCR分析结果显示,注射3和5次外源性E2后,促甲状腺激素β亚基mRNA的表达水平与对照组相比均未有显著变化,但随着注射次数的增加,总体呈现升高的趋势。另一方面,RIA结果显示,注射3次外源性E2后,血清中甲状腺激素T3和T4含量水平与对照组相比均显著升高(P<0.05);注射5次后,与对照群相比差异极显著(P<0.01)。以上结果提示,外源性E2影响异育银鲫的正常生理状态。; 曲宪成杨艳红刘颖周正峰崔严慧; 关键词：异育银鲫 SYBR 放射免疫方法 T4

团头鲂促甲状腺激素β亚基基因的克隆及序列分析被引量：1: 2006年; 利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体中促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因,并对其基因结构和系统进化进行分析。该基因cDNA序列全长614 bp;5’端非翻译区100 bp;3’端非翻译区61 bp;开放阅读框架(ORF)453 bp,共编码150个氨基酸。其编码的氨基酸序列与鳙鱼(Aristichthys no-bilis)、鲤鱼(Cyprinus carpio)、金鱼(Carassius auratus)、斑马鱼(Danio rerio)、鲑鱼(Salmo salar)、虹鳟(Oncorhynchusmysiss)、欧洲鳗鲡(A.anguilla)的相似性分别为:99.3%、92%、92%、82%、62.6%、62.6%和56%。核苷酸序列分析显示,团头鲂与鳙鱼相似性最高,为98.23%;与欧洲鳗鲡相似性最低,为48.7%。说明TSHβ亚基在长期的进化中相当保守。在所比较的9种鱼类该基因ORF氨基酸序列中都含有定位相同的12个半胱氨酸残基,它们在成熟肽中形成6个二硫键,这对保证促甲状腺激素的空间结构,维持促甲状腺激素的生理功能起着重要的作用。该基因的成功克隆不仅为TSHβ的分子进化和相似性比较研究提供了新的资料,而且对进一步研究该基因的功能、表达具有重要的意义。[中国水产科学,2006,13(1):128-133]; 曲宪成杨艳红刘其根刘颖; 关键词：团头鲂 CDNA末端快速扩增克隆

外源性皮质醇对异育银鲫TSH-βmRNA表达和血清甲状腺激素水平的影响: 2007年; 运用Sybr Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性皮质醇(cortisol)对异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSH-β)mRNA表达和血清甲状腺激素水平的影响。实验设计为10周,实验组每两周注射一次0.2 mg/kg体重的cortisol(用57%酒精溶解),对照组注射同剂量的57%酒精。实验期间没有投喂饲料。在本实验条件下,研究结果显示:注射3次外源性cortisol后,异育银鲫TSH-βmRNA表达量与对照组相比略有下降;注射5次后,与对照组相比显著降低(P<0.05)。另一方面,RIA结果显示:注射3次外源性cortisol后,实验组与对照组相比,血清甲状腺激素T3和T4含量虽略有升高,但无显著差异;而注射5次后显著升高(P<0.05)。以上结果提示:外源性cortisol能够影响异育银鲫脑下垂体-甲状腺轴。; 曲宪成杨艳红刘颖周正峰崔严慧; 关键词：异育银鲫皮质醇 SYBR 放射免疫方法

团头鲂促性腺激素β亚基cDNA的克隆和序列分析被引量：6: 2007年; 本研究利用RT-PCR和RACE克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体中两种促性腺激素β亚基(GtHIβ和GtHIIβ)cDNA序列,并对其进行了结构和系统进化分析。团头鲂GtHIβ亚基cDNA全长567碱基对(bp),5’端非翻译区26bp;3’端非翻译区148bp;开放阅读框(ORF)393bp,其编码含有130个氨基酸的蛋白质,包括由108个氨基酸组成的成熟肽以及22个氨基酸组成的信号肽。GtHII亚基cDNA全长564bp,5’端非翻译区43bp;3’端非翻译区95bp;ORF426bp,其编码含有141个氨基酸的蛋白质,包括由117个氨基酸组成的成熟肽以及24个氨基酸组成的信号肽。团头鲂GtHIβ亚基氨基酸序列与青鱼(Mylopharyngodon piceus)等15种鱼类相比较,相似性为90%—31%,与湖蛙(RanaRidibunda)等5种四足类的相似性为38%—21%;GtHII亚基与青鱼等15种鱼类相比较,其相似性为95%—41%,与湖蛙等5种四足类的相似性为49%—36%,团头鲂GtHIβ和GtHII亚基与鲤科鱼类的相似性最高,显示出较为亲近的进化关系。另外,团头鲂GtHIβ和GtHIIβ亚基含有12个保守的半胱氨酸残基和1个N糖基化位点。; 曲宪成刘颖杨艳红崔严慧周正峰; 关键词：RT-PCR RACE 克隆团头鲂

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杨艳红