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K652重组表达IL-6基因对NK细胞表型和功能的影响: 2015年; 目的:为了研究表达IL-6的重组K562细胞对自然杀伤细胞(NK)细胞的扩增数量、表型和功能的影响。方法:根据人类IL-6 c DNA的5'端序列,设计PCR引物以K562细胞c DNA文库的DNA为模板进行扩增,表达,转染,在K562细胞上表达IL-6基因,构建重组的K562工程细胞作为刺激细胞,以人外周血单个核细胞(PBMC)为扩增培养对象,使NK细胞在体外培养条件下得到大量的扩增。流式细胞仪分析NK细胞表型。将NK细胞作用到K562细胞,对其杀伤性进行功能分析,51Cr释放实验检测NK细胞对K562细胞杀伤水平的影响。结果:成功构建了表达IL-6的重组K562细胞,和PBMC共同孵育后,培养体系经过21 d的刺激后,IL-6重组K562细胞诱导PBMC扩增,CD56+CD16+CD3-细胞数量比诱导前扩增了(760±18)倍,CD56+CD16+CD3-细胞的纯度从培养前占PBMC的6%±0.4%,扩增后第3组结果比未扩增的多了91%±2%。细胞毒实验表明,在NK效应细胞∶K562靶细胞为5∶1时,扩增的NK细胞的杀伤率达到了92%±2%。结论:本方法以重组K562为刺激细胞,能够实现NK细胞体外的大规模制备,建立了优化的NK细胞体外扩增方法,且扩增的细胞杀伤K562细胞的活性较好。对于NK的大量扩增和应用于临床具有重要的指导意义。; 李登瑞杨永辉李辉郭素敏朱桂云李秀武耿书军赵荣娣任雪飞高莉辛欣; 关键词：IL-6 自然杀伤细胞扩增

患者满意度评价系统的开发与应用: 李登瑞高宏伟刘春明赵增祥徐玲任雪飞崔金山; 依托医院HIS系统（HospitalInformationSystem医院信息系统），提取患者评价数据，实现数据的自动统计、自动排序、自动公示，保证了满意度评价数据的真实、有效。新的评价改变了以往传统的评价方式，用先进的...; 关键词：; 关键词：医院信息系统系统软件

探索建立门诊患者满意度评价系统被引量：5: 2013年; 在门诊主要窗口,如收费处、门诊药房、门诊大厅等,安装满意度采集器,借助现代信息技术的自动化功能,对门诊患者满意度评价信息进行实时采集、统计、汇总、排序,并依据评价结果落实奖惩。确保了患者评价的全面性、真实性、可靠性,为医院工作改进提供了真实、客观的依据。; 李登瑞高宏伟徐玲赵增祥任雪飞; 关键词：门诊患者满意度

异基因半相合CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌临床分析被引量：5: 2015年; 目的探讨异基因半相合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cell,CIK)治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法 25例晚期非小细胞肺癌患者接受CIK细胞治疗。采用患者子女的外周血(异基因半相合)分离单个核细胞置于CD3 Mc Ab和Retro-Nectin包被细胞培养瓶后,悬浮细胞用干扰素-γ、白介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)、IL-2细胞因子诱导CIK细胞。14天后锥虫蓝染色检测活性,流式细胞仪检测CIK细胞表面标志物。患者回输CIK细胞后,检测患者外周血的细胞表型变化。参照WHO的实体瘤疗效评价标准评估疗效。结果 CIK细胞培养到第14天时为10.7×109个,锥虫蓝染色检测活性为(98.2±1.0)%。流式细胞仪检测到CD56+CD16+CD3+细胞较培养前显著增加[(30.2±1.5)%vs(6.0±2.0)%,P<0.05]。患者回输后外周血CIK细胞第10天、第20天较回输前显著增加(P<0.05)。CIK细胞回输后临床评估CR 10例,PR 8例,NC 5例,PD 2例,总有效率(CR+PR)为72.0%,中位缓解期为10.1月,中位生存期为12.0月,1年生存率为64.0%(16/25)。患者无骨髓抑制、脱发、静脉炎和消化道反应。结论异基因半相合CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌能延长患者生存期,提高生存质量,不良反应轻。; 李登瑞杨永辉李辉李秀武郭素敏任雪飞刘晓鹏高莉

医院患者满意度评价系统的开发与利用被引量：7: 2013年; 针对医院患者满意度评价的发展现状,从拉近医患关系、服务患者的角度进行研究探索,充分发挥电子数据安全、便捷、准确的特点,通过电子满意度评价系统收集患者评价数据,再对数据进行统计分析,准确了解患者对医疗质量、服务质量、医德医风、廉洁行医等方面的意见,为医院改进服务、科学决策提供准确依据。; 李登瑞赵增祥徐玲任雪飞; 关键词：满意度评价医患关系

建立基于脱氧次黄嘌呤核苷修饰等位基因PCR方法检测EGFR基因热点突变: 2017年; 目的建立基于脱氧次黄嘌呤修饰等位基因特异荧光聚合酶链反应(d I-AS-PCR)方法,检测表皮生长因子受体(EGFR)基因热点突变L858R和19del(2235~2249,2236~2250)。方法设计包含扩增EGFR基因L858R和19del热点突变在内的特异性引物、荧光探针和内参体系;且特异检测基因突变的等位基因PCR引物3’-末端n-1或n-2位置采用脱氧次黄嘌呤(d I)修饰。建立标准品和质控样品,应用荧光PCR检测,并分析结果。结果 d I-AS-PCR能够在野生型背景下检测低于0.1%的突变,对50例肺癌临床样本进行检测,有9例(18%)EGFR基因发生L858R突变,14(28%)例19del基因突变。EGFR基因热点突变率为46%,其检测结果与DNA测序完全一致。结论基于d I-AS-PCR技术的特异荧光PCR检测EGFR基因热点突变,敏感性高,特异性强,可以应用于临床EGFR基因突变检测,指导个性化用药及酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗耐药监测。; 杨永辉李辉朱桂云李秀武陈宁任雪飞

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任雪飞

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