万里川
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠PC-1基因在大肠杆菌中的表达和纯化
- 2002年
- 利用PCR和基因重组技术构建了小鼠PC-1基因全长cDNA及其N端45个氨基酸残基的表达质粒pGEX-4T-1-mPC-1和pGEX-4T-1-mPC-1-45。经IPTG诱导后,在大肠杆菌DH5α中,GST-mPC-1和GST-mPC-1-45两个融合蛋白都获得了可溶性高表达。经谷胱甘肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,获得了纯的GST-mPC-1和GST-mPC-1-45蛋白。
- 万里川周建光孙玉龙李杰之黄翠芬
- 关键词：小鼠PC-1基因大肠杆菌纯化GST融合表达
- 小鼠PC-1蛋白兔多克隆抗体的制备及初步应用被引量：2
- 2003年
- 目的 :获得小鼠PC 1蛋白的兔多克隆抗体 ,检测其在小鼠器官中的表达谱。方法 :以纯化后的小鼠PC 1蛋白及其N端 45个氨基酸与GST的融合蛋白 (GST MPC 1、GST MPC 1 45 )为抗原 ,制备了它们的兔多克隆抗体。进一步应用饱和硫酸铵沉淀法、DEAE5 2和ProteinA亲和层析法对这两个抗体进行了纯化 ,Westernblot检测了PC 1蛋白在昆明白小鼠七个组织中的表达情况。结果 :两个兔多克隆血清的效价分别为 1∶2 0 0 0 0和 1∶2 0 0 0 0 0 ,并能与人工合成的人PC 1蛋白N端的 46个氨基酸发生良好的交叉反应。PC 1蛋白在结肠中有表达 ,在肾中有微弱表达 ,而在心、肺、肝、胃、脾中没有表达。结论 :获得小鼠PC 1蛋白的兔多克隆抗体 ,PC 1蛋白在结肠中有表达 ,在肾中有微弱表达 ,而在心、肺、肝、胃。
- 万里川周建光李杰之孙玉龙刘春丽
- 关键词：多克隆抗体前列腺癌PC-1基因免疫
- 外源高表达PC-1蛋白N端43个氨基酸可加速人前列腺癌细胞系C4-2的生长被引量：2
- 2004年
- 研究PC-1蛋白N端43个氨基酸表达对人前列腺癌细胞C4-2生长的影响。用DNA重组技术将含PC-1蛋白N端43个氨基酸的DNA序列正向克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,采用脂质体法将重组质粒稳定转染进C4-2细胞中,RT-PCR分析外源序列的转录情况,固相ELISA法测定PC-1蛋白N端43个氨基酸的表达,MTT实验分析细胞的生长速度。结果获得了稳定转染PC-1基因N端43个氨基酸的前列腺癌细胞株,在该细胞株中外源PC-1蛋白N端43个氨基酸得到高表达,细胞生长速度较对照细胞加快了38%。结果表明外源PC-1基因N端43个氨基酸高表达可提高人前列腺癌细胞C4-2的生长速度,推论PC-1基因高表达可能在人前列腺癌的发展中起一定的促进作用。
- 万里川周建光李杰之孙玉龙
- 关键词：前列腺癌基因表达稳定转染
- PC-1基因表达对前列腺癌细胞迁移能力的影响被引量：4
- 2005年
- 背景与目的:PC-1基因在雄激素非依赖和高转移能力的前列腺癌C4-2细胞中高表达,在雄激素依赖及不转移的前列腺癌LNCaP细胞中低表达。本实验旨在研究PC-1对前列腺癌细胞迁移能力的影响。方法:构建PC-1稳定高表达的LNCaP细胞株和反义核酸调低内源性PC-1表达的C4-2细胞株。利用体外迁移系统检测PC-1表达对LNCaP和C4-2细胞迁移运动能力的影响。结果:体外迁移实验表明稳定转染提高PC-1的表达水平并未使LNCaP迁移细胞数增多(P>0.05),而反义核酸降低PC-1表达则使C4-2迁移细胞数降低(P<0.05)。PC-1蛋白水平升高不能提高LNCaP细胞迁移能力,但降低内源性PC-1表达则使C4-2细胞迁移能力明显降低。结论:PC-1可能在前列腺癌细胞侵袭过程中起一定作用。
- 张惠万里川王健周建光黄翠芬
- 关键词：PC-1基因LNCAP细胞
- 前列腺癌相关基因研究被引量：5
- 2002年
- 前列腺癌是目前最重要的危害欧美国家男性健康的肿瘤疾病,在我国发病率也呈上升趋势。本文综述了前列腺相关基因研究的最新文献,分染色体畸变、易感基因、原癌基因、抑癌基因和其他基因等五个部分。
- 万里川周建光等
- 关键词：前列腺癌相关基因染色体畸变易感基因雄激素受体PC-1基因
- 乳腺癌细胞株MCF-7-PC-1-46的建立
- 2003年
- 以人前列腺癌C4-2细胞基因组DNA为模板,扩增出PC-1基因N端编码46个氨基酸残基及其上游非编码区共599bp的DNA序列,将其正向克隆到真核表达载体pIRES2中,并在脂质体介导下,转染人乳腺癌细胞MCF-7,经G418筛选获得阳性单克隆,细胞扩大培养后,进行PCR和RT-PCR分析,检测外源PC-1基因在靶细胞中的整合与转录。PCR和RT-PCR结果表明,稳定转染细胞株MCF-7-PC-1-46具有外源目的基因的整合和相应mRNA的高表达。说明成功建立了稳定表达外源PC-1基因N端46个氨基酸的人乳腺癌细胞株,为进一步研究PC-1基因的生物学功能提供了实验材料。
- 常晓彤万里川张浩王健李杰之周建光黄翠芬
- 关键词：乳腺癌细胞株PC-1基因稳定转染基因表达
