丁丽丽
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：中国科学院海洋研究所更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目山东省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 力达霉素通过下调VEGF表达抑制斑马鱼胚胎血管生成被引量：5
- 2010年
- 本研究采用斑马鱼胚胎模型研究力达霉素在整体动物水平对血管生成的影响。力达霉素处理胚胎后,利用形态学观察、血管染色法、转基因斑马鱼检测其对胚胎血管生成影响,以荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测VEGF基因的表达情况。结果显示:力达霉素处理后,胚胎出现心包水肿、血流速度减缓等症状;血管生长率降低,肠下静脉生成受到抑制。荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测表明,力达霉素对胚胎的VEGFmRNA表达水平没有影响,但VEGF蛋白的表达受到显著抑制。研究结果表明,力达霉素可以下调VEGF蛋白表达,从而抑制斑马鱼胚胎血管生成。
- 丁丽丽刘明张胜华赵向忠吴宁陈雷王广建林秀坤
- 关键词：力达霉素斑马鱼血管生成
- 斑马鱼p53基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2010年
- 利用原核表达系统克隆表达斑马鱼p53基因。RT-PCR法从斑马鱼胚胎中扩增获得p53基因编码区,并将其克隆至原核表达载体pET28a上,构建重组质粒pET28a/z-p53,将重组质粒转化E.coli BL21(DE3)受体菌,IPTG诱导表达,表达产物经镍柱纯化、尿素透析复性,SDS-PAGE电泳分析,结果表明,p53基因在大肠杆菌中成功表达,表达的p53融合蛋白分子量大约为53kD,透析复性后获得了高纯度可溶性的p53蛋白。
- 赵向忠刘明丁丽丽吴宁林秀坤
- 关键词：P53基因斑马鱼原核表达
- 力达霉素抑制斑马鱼胚胎血管生成的实验研究
- 血管生成是肿瘤生长的必经之路,以血管生成为靶点的治疗方法对多种肿瘤均有疗效。因此,寻找有效的血管生成抑制剂己经成为当今肿瘤研究的热点之一。力达霉素(Lidamycin,LDM)是放线菌代谢产物中获得的迄今为止报道过的活性...
- 丁丽丽
- 关键词：力达霉素斑马鱼血管生成
- 文献传递
- 带组氨酸标签的斑马鱼p53真核表达载体的构建及表达鉴定
- 2010年
- 构建斑马鱼p53基因的真核表达系统,为下一步p53体内、外功能研究,以及为斑马鱼作为抗肿瘤药物筛选模型的构建和应用奠定基础。采用RT-PCR法从斑马鱼胚胎中扩增获得p53基因编码区,定向克隆到真核表达载pcDNA3.1上,构建真核表达质粒pcDNA3.1/his-p53,在起始密码前加入增强翻译的Kozak序列,并在终止密码前引入组氨酸标签便于检测和纯化,脂质体介导质粒转染HeLa细胞,RT-PCR和Western blotting检测基因表达情况。结果表明,成功构建了斑马鱼p53真核表达载体,RT-PCR扩增出1 100 bp的转录产物,表达产物能被抗his单克隆抗体特异性识别,Western blotting呈现53 kD左右单一条带。斑马鱼p53蛋白在HeLa细胞中成功表达。
- 赵向忠刘明丁丽丽吴宁林秀坤
- 关键词：P53基因斑马鱼真核表达HELA细胞
