马远航
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SIRT1在TNF-α介导的肠上皮屏障破坏中的作用及机制研究被引量：3
- 2014年
- 目的观察沉默信息调节因子1(SIRT1)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的肠上皮Caco-2细胞屏障功能破坏的影响并探讨其分子机制。方法将Caco-2细胞分3组处理:对照组、TNF-α100ng/mL 24h处理组(TNF-α组)及TNF-α100ng/mL24h处理+白芦藜醇(Resveratrol)40μm预处理12h组(TNF-α+Res组)。分别检测跨上皮电阻(TER)、SIRT1及紧密连接蛋白:ZO-1、occludin的蛋白表达。结果对照组、TNF-α组、TNF-α+Res组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.81±0.02、0.43±0.04、0.60±0.03。3组的TER分别为(154.00±5.00)、(97.00±4.00)、(128.00±6.00)Ohm/cm2。TNF-α组SIRT1的蛋白表达较对照组下降47.00%,TER降低37.00%,经白芦藜醇预处理使TER较TNF-α组升高32.00%。对照组、TNF-α组、TNF-α+Res组的ZO-1和occludin蛋白相对表达量分别为0.62±0.06和0.57±0.03、0.23±0.05和0.33±0.04、0.41±0.03和0.50±0.02。TNF-α处理后紧密连接蛋白ZO-1、occludin表达显著降低(P<0.05),而白芦藜醇预处理可缓解该现象,蛋白表达较TNF-α组分别升高78.00%、51.00%(P<0.05)。结论 TNF-α处理条件下SIRT1水平降低,而升高SIRT1水平可增加肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin蛋白水平的表达,从而减轻TNF-α对Caco-2细胞构成的上皮屏障功能的损伤。
- 马远航杨松巍孙礼刚于敏孙力华王文生杨桦
- 关键词：上皮紧密连接蛋白
- 肾上腺髓质素对小鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨肾上腺髓质素（AM）在肠缺血再灌注损伤（I／R）中对肠黏膜屏障功能的影响及机制。方法将21只C57小鼠随机分为3组：（1）Sham组；（2）I／R组；（3）I／R＋AM组。采用夹闭肠系膜L动脉30min、再灌注6h作为制备肠缺血再灌注损伤模型的方法。用苏木素-伊红（HE）染色的方法观察肠黏膜的损伤；测定小肠肠黏膜的跨上皮电阻（TER）；检测紧密连接蛋nZO-1和Claudin-1蛋白水平的变化以及信号分子727位丝氨酸磷酸化的信号转导与转录激活子1[p-STAT1（S727）]在各组中的激活。结果HE染色结果显示肠I／R引起部分小肠绒毛上皮脱落，经AM预处理使得小肠绒毛重新排列整齐，显著缓解肠I／R所致的形态结构破坏。肠I／R引起ZO-1和Claudin-1的蛋白表达水平较Sham组分别下降38．54％及42．98％，并引起TER降低44．57％；经AM预处理使得ZO-1和Claudin—1的蛋白的表达较I／R组显著升高（分别为31．33％、33．92％），同时TER值较肠I／R组升高25．97％，并且使得肠I／R所致的p-STAT1（S727）激活被显著抑制（较I／R组降低56．52％）。结论AM对小鼠肠I／R损伤后肠黏膜屏障具有较好的保护作用，并且可以调控肠道紧密连接蛋白的表达，进而影响肠道通透性的改变，其机制可能与抑制p-STAT1（S727）的激活有关。
- 刘勇杨松巍邱远马远航杨桦
- 关键词：肾上腺髓质素紧密连接蛋白肠缺血再灌注损伤
- 沉默信息调节因子1对缺氧条件下肠上皮屏障功能的保护作用及机制被引量：6
- 2014年
- 目的观察沉默信息调节因子1（SIRT1）对肠缺氧上皮Caco-2细胞屏障功能的影响并探讨其分子机制。方法对Caco-2细胞分别进行1％O2浓度缺氧6h（缺氧组）和常规处理（常规组）及加浓度为40μmol／L Resveratrol（SIRT1激动剂）预处理6h后再缺氧6h（观察组），分别检测3组肠上皮细胞跨上皮电阻（TER），PCR及Western blot分别检测3组SIRT1及紧密连接蛋白ZO—1、Occludin和Claudin-1的mRNA与蛋白表达。结果缺氧组SIRT1mRNA及其蛋白的相对表达量均明显低于常规组（分别为0．40±0．02比0．70＋0．07，P=0．001；0．37±0．03比0．76±0．03，P=0．001），也明显低于观察组（0．50±0．02，P=0．026；0．54±0．02，P=0．011）。缺氧组3种紧密连接蛋白mRNA表达均低于常规组（P〈0．05），也低于观察组（P〈0．05），观察组的ZO-1及Claudin-1表达与常规组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。3种紧密连接蛋白的表达水平常规组最高，观察组次之，缺氧组最低，两两比较，差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。常规组、缺氧组和观察组的TER分别为（142±7）Ohm／cm^2、（94±3）Ohm／cm^2和（119±7）Ohm／cm^2；两两比较，差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。结论缺氧条件下SIRT1水平降低，而SIRT1的激活可通过增加肠道紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1mRNA与蛋白的表达，从而减轻缺氧对肠上皮屏障功能的损伤。
- 马远航许超王文生孙礼刚杨松巍逯顶松刘勇杨桦
- 关键词：缺氧紧密连接蛋白
- 去乙酰化酶Sirt3沉默对缺氧条件下肠上皮Caco-2细胞缺氧诱导因子-1α表达的影响及其对肠上皮屏障功能的作用被引量：1
- 2014年
- 目的 采用RNA干扰（RNAi）技术,使去乙酰化酶Sirt3基因表达下调或缺失,观察其下调或缺失后对缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的影响及其对肠屏障功能的作用.方法 体外培养Caco-2细胞,分别检测跨上皮电阻（TER）,常氧和低氧（1％O2）条件下Sirt3-小干扰RNA（siRNA）转染前后HIF-1α和紧密连接蛋白：ZO-1、Occludin、Claudin-1的mRNA与蛋白表达.结果 常氧与低氧条件下,Sirt3-siRNA转染后Sirt3的蛋白表达分别下降52％、35％;HIF-1α的蛋白表达（0.72±0.01、0.93 ±0.01）比转染前（0.38 ±0.01、0.81±0.03）明显升高（P＜0.01）;低氧条件下,Sirt3-siRNA转染后Occludin、Claudin-1、ZO-1的蛋白（0.71 ±0.03、0.69±0.01、0.72±0.02）和mRNA （0.80±0.01、0.84±0.01、0.88 0.03）表达比转染前明显降低（P＜0.01）;低氧条件下,经Sirt3-siRNA转染后TER下降30.8％.结论 缺氧条件下,Sirt3可以调控HIF-1α的表达.沉默Sirt3后紧密连接蛋白表达降低,从而影响肠屏障功能.
- 逯顶松杨松巍陈国庆刘勇马远航杨桦
- 关键词：缺氧诱导因子-1紧密连接蛋白
