王文生
- 作品数：20 被引量：70H指数：3
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- SIRT1在TNF-α介导的肠上皮屏障破坏中的作用及机制研究被引量：3
- 2014年
- 目的观察沉默信息调节因子1(SIRT1)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的肠上皮Caco-2细胞屏障功能破坏的影响并探讨其分子机制。方法将Caco-2细胞分3组处理:对照组、TNF-α100ng/mL 24h处理组(TNF-α组)及TNF-α100ng/mL24h处理+白芦藜醇(Resveratrol)40μm预处理12h组(TNF-α+Res组)。分别检测跨上皮电阻(TER)、SIRT1及紧密连接蛋白:ZO-1、occludin的蛋白表达。结果对照组、TNF-α组、TNF-α+Res组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.81±0.02、0.43±0.04、0.60±0.03。3组的TER分别为(154.00±5.00)、(97.00±4.00)、(128.00±6.00)Ohm/cm2。TNF-α组SIRT1的蛋白表达较对照组下降47.00%,TER降低37.00%,经白芦藜醇预处理使TER较TNF-α组升高32.00%。对照组、TNF-α组、TNF-α+Res组的ZO-1和occludin蛋白相对表达量分别为0.62±0.06和0.57±0.03、0.23±0.05和0.33±0.04、0.41±0.03和0.50±0.02。TNF-α处理后紧密连接蛋白ZO-1、occludin表达显著降低(P<0.05),而白芦藜醇预处理可缓解该现象,蛋白表达较TNF-α组分别升高78.00%、51.00%(P<0.05)。结论 TNF-α处理条件下SIRT1水平降低,而升高SIRT1水平可增加肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin蛋白水平的表达,从而减轻TNF-α对Caco-2细胞构成的上皮屏障功能的损伤。
- 马远航杨松巍孙礼刚于敏孙力华王文生杨桦
- 关键词：上皮紧密连接蛋白
- 简易肩带固定腋下引流管负压吸引器的设计与应用被引量：3
- 2016年
- 目的探讨乳腺癌改良根治术后,应用简易肩带固定患者负压吸引器是否能降低护理不良事件发生率。方法分别回顾性统计我科室从2013年5月至2014年3月期间的403例乳腺癌根治术后的患者以及使用此简易肩带以来自2014年4月到12月底为止的367例患者发生非计划性拔管护理不良事件发生情况,并应用统计学方法分析。结果应用简易肩带以前其护理不良事件发生率为3.23%,使用此简易肩带以后护理不良事件发生率为0,2组比较有统计学意义(P<0.05)。结论简易肩带固定负压引流器,可以降低护理不良事件发生率,值得在临床工作中推广应用。
- 李冉向家梅王文生
- 关键词：肩带负压吸引器
- 肛肠PPH手术用引导缝合器
- 本发明公开了一种肛肠PPH手术用引导缝合器，包括由弹性材料制成的可伸入到肛管中的开口环，所述开口环开口处的两端各设置有一个可供人手持的杆体，调节两个杆体之间的距离能够调节所述开口环的口径大小。本发明的肛肠PPH手术用引导...
- 肖卫东杨桦张朝军王文生李云波
- 充气式加压绷带的临床应用
- 2012年
- 绷带在普通外科多用于局部加压止血、外周血管术后患肢压迫固定等,临床使用不仅操作繁琐,容易滑脱,且其加压力度完全系临床医生人为掌控,易出现患者不适、加压效果不佳甚至局部坏死、肢端血循环障碍等并发症。笔者所在科室自行研制的充气式加压绷带有效克服了传统绷带的上述弊端,临床上约3000例患者应用,效果良好。
- 王立明郑灵杨桦张朝军罗云生蔡瑜娇王文生
- 关键词：加压止血充气式绷带血循环障碍普通外科外周血管
- 甘露糖结合凝集素对肠上皮细胞屏障功能的影响被引量：2
- 2015年
- 目的观察甘露糖结合凝集素(mannose binding lectin,MBL)对人结肠癌细胞株Caco-2屏障功能的影响并探讨其分子机制。方法体内实验:取14只C57小鼠,按随机数字表法分为假手术组和LPS组(经腹腔注射LPS,构建肠炎症损伤模型),通过免疫组化和Real-time PCR观察MBL的变化情况,HE染色观察肠黏膜的损伤情况。体外实验:Caco-2细胞分为对照组、空转染组和MBL shRNA组(应用MBL干扰质粒转染Caco-2细胞),采用Real-time PCR、Western blot检测紧密连接蛋白的表达情况,并检测其跨上皮电阻(TER)。结果体内实验TER显示LPS组肠黏膜通透性(80.32±5.43)比假手术组(140.45±4.78)明显增加(P<0.01),HE染色显示LPS处理后肠黏膜完整性比假手术组降低,免疫组化和Real-time PCR检测结果显示LPS处理组MBL表达升高(P<0.05)。在体外实验中,我们成功构建MBL shRNA质粒模型,MBL shRNA组细胞中MBL的蛋白和mRNA表达[(0.34±0.09),(0.42±0.12)]较对照组及空转染组明显降低(P<0.05)。MBL shRNA组的紧密连接蛋白Occludin和Claudin-1的蛋白[(0.43±0.10)、(0.53±0.11)]和mRNA水平[(0.43±0.08)、(0.45±0.10)]明显低于其余组(P<0.05);MBL shRNA组TER值(80.33±7.64)降低较其余组明显(P<0.05)。结论下调MBL基因可减少肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin和Claudin-1 mRNA及蛋白水平的表达,减弱肠上皮细胞的屏障保护功能。
- 许超彭科王文生于敏孙力华杨桦
- 关键词：甘露糖结合凝集素紧密连接蛋白LPS
- 甘露糖结合凝集素对肠上皮细胞凋亡的调控作用及机制研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨重组甘露糖结合凝集素(recombinant human mannose-binding lectin,rh MBL)对Caco-2细胞凋亡的影响及其机制。方法取14只C57小鼠,随机分为2组。经腹腔注射LPS,构建肠黏膜炎症损伤模型。通过免疫组化和RT-PCR观察甘露糖结合凝集素(MBL)的变化情况,使用TUNEL法检测肠上皮细胞凋亡情况。体外以0、5、10、20μg/m L的rh MBL处理Caco-2细胞,流式细胞术分析Caco-2细胞的凋亡情况,Western blotting和Real-Time PCR检测Caco-2细胞中Bax、Bcl-2基因和蛋白的表达情况,用Western blotting观察MAPK信号通路的变化并探讨其机制。结果经LPS刺激后,免疫组化和PCR观察到MBL在肠上皮细胞的表达增多,TUNEL染色显示肠上皮细胞凋亡增加。在体外不同浓度的rh MBL处理Caco-2细胞48 h后,20μg/m L rh MBL组的早期凋亡率高于其余组。选取20μg/m L的rh MBL以不同时间处理Caco-2细胞后,早期凋亡率增加。经20μg/m L处理48 h后,与对照组相比Bax/Bcl-2蛋白和基因表达比值升高,同时磷酸化P38、ERK蛋白表达增加。给予P38、ERK通路抑制剂后,与20μg/m L相比P38抑制剂能部分使Bax/Bcl-2蛋白表达比值降低,早期凋亡减少。结论高浓度rh MBL可促进肠上皮细胞细胞凋亡,并提示rh MBL可能是通过P38 MAPK途径参与细胞凋亡的调控。
- 许超彭科王文生于敏孙力华杨桦
- 关键词：甘露糖结合凝集素BAXBCL-2凋亡P38
- 沉默信息调节因子1对缺氧条件下肠上皮屏障功能的保护作用及机制被引量：6
- 2014年
- 目的观察沉默信息调节因子1（SIRT1）对肠缺氧上皮Caco-2细胞屏障功能的影响并探讨其分子机制。方法对Caco-2细胞分别进行1％O2浓度缺氧6h（缺氧组）和常规处理（常规组）及加浓度为40μmol／L Resveratrol（SIRT1激动剂）预处理6h后再缺氧6h（观察组），分别检测3组肠上皮细胞跨上皮电阻（TER），PCR及Western blot分别检测3组SIRT1及紧密连接蛋白ZO—1、Occludin和Claudin-1的mRNA与蛋白表达。结果缺氧组SIRT1mRNA及其蛋白的相对表达量均明显低于常规组（分别为0．40±0．02比0．70＋0．07，P=0．001；0．37±0．03比0．76±0．03，P=0．001），也明显低于观察组（0．50±0．02，P=0．026；0．54±0．02，P=0．011）。缺氧组3种紧密连接蛋白mRNA表达均低于常规组（P〈0．05），也低于观察组（P〈0．05），观察组的ZO-1及Claudin-1表达与常规组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。3种紧密连接蛋白的表达水平常规组最高，观察组次之，缺氧组最低，两两比较，差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。常规组、缺氧组和观察组的TER分别为（142±7）Ohm／cm^2、（94±3）Ohm／cm^2和（119±7）Ohm／cm^2；两两比较，差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。结论缺氧条件下SIRT1水平降低，而SIRT1的激活可通过增加肠道紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1mRNA与蛋白的表达，从而减轻缺氧对肠上皮屏障功能的损伤。
- 马远航许超王文生孙礼刚杨松巍逯顶松刘勇杨桦
- 关键词：缺氧紧密连接蛋白
- 腺苷酸A2A受体对小鼠小肠急性缺血再灌注损伤中肠屏障功能的影响被引量：3
- 2017年
- 目的探讨腺苷酸A2A受体(A2AR)在小鼠小肠急性缺血再灌注(I/R)刺激所致肠黏膜屏障损伤机制中的作用。方法 6~8周龄雄性C57BL/6小鼠12只,分为假手术组和I/R组;A2AR基因敲除雄性C57BL/6(A2AR^(-/-))小鼠12只,分为A2AR^(-/-)+假手术组和A2AR^(-/-)+I/R组(n=6)。采用夹闭肠系膜上动脉30 min,再灌注6 h建立小鼠肠I/R模型。HE染色观察小肠黏膜的形态学变化;免疫荧光及蛋白质印迹检测肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1蛋白变化,尤斯灌流仪检测肠上皮通透性变化。结果 HE染色显示假手术组和A2AR^(-/-)+假手术组小肠黏膜完整、无水肿,两组无明显差异;而I/R组和A2AR^(-/-)+I/R组小肠黏膜明显水肿、绒毛断裂、部分脱落,且A2AR^(-/-)+I/R组损伤程度明显重于I/R组。小肠黏膜上皮通透性检测发现,假手术组和A2AR^(-/-)+假手术组没有显著性差异;与假手术组相比,I/R组和A2AR^(-/-)+I/R组小肠黏膜跨上皮电阻(trans-epithelium electrical resistant,TER)值均显著下降(P<0.01),且A2AR^(-/-)+I/R组相比I/R组TER值下降更为明显(P<0.05)。免疫荧光及蛋白定量分析显示假手术组与A2AR^(-/-)+假手术组肠上皮高表达ZO-1,而在I/R组和A2AR^(-/-)+I/R组中ZO-1表达明显减少,同时A2AR^(-/-)+I/R组中ZO-1的表达显著低于I/R组(P<0.05)。结论小肠I/R刺激可诱导肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1表达与分布异常,造成肠黏膜屏障损伤;而A2AR可通过调控肠上皮细胞ZO-1表达加强肠黏膜屏障功能,在肠I/R损伤中发挥潜在的保护作用。
- 李祥蒲羽邱远王文生杨桦肖卫东
- 关键词：肠黏膜屏障肠缺血再灌注紧密连接蛋白
- 缺氧条件下环磷酸腺苷对肠黏膜屏障功能的调控研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨缺氧条件下环磷酸腺苷（cAMP）水平的变化对肠黏膜屏障功能的影响。方法采用人结肠癌Caco．2细胞建立肠上皮细胞缺氧模型，分为常氧组、常氧加Forskolin组、缺氧8h组和缺氧8h加SQ22536（腺苷酸环化酶抑制剂）组。采用cAMP检测试剂盒，检测实验各组cAMP水平的变化；RT-PCR及Westernblot方法分别检测各组肠上皮紧密连接蛋白claudin-1和occludin的mRNA和蛋白表达水平的变化：Millipore电阻抗系统法检测各组肠上皮细胞跨上皮电阻（TER）的变化情况。结果缺氧8h组肠上皮cAMP含量较常氧组明显升高[（6．30±0．50）pmol／L比（2．38±0．18）pmol／L，P〈0．01]，而claudin．1和occludin的mRNA及蛋白表达水平均明显降低（均P〈0．05），TER值下降了6．30±0．64（P〈0．01）。与缺氧8h组相比，缺氧8h加SQ22536组肠上皮cAMP含量明显降低[（2．12±0．23）pmol／L比（6．30±0．50）pmol／L，P〈0．01]，claudin-1和occludinmRNA及蛋白表达水平明显升高（P〈0．01），TER值升高了32．96±2．16（均P〈0．05）。结论缺氧条件下cAMP水平升高，而下调cAMP水平可增加肠道紧密连接蛋白claudin-1及occludinmRNA及蛋白水平的表达，从而减轻缺氧对肠上皮屏障的损伤。
- 杨洋王文生邱远孙力华杨桦
- 关键词：缺氧环磷酸腺苷肠黏膜屏障紧密连接蛋白
- 血管紧张素转换酶抑制剂促进短肠综合征大鼠肠黏膜的适应性代偿被引量：2
- 2010年
- 目的通过SD大鼠短肠综合征(SBS)模型,研究血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对肠黏膜的保护作用及其机制。方法成年雄性SD大鼠18只,采用随机数字表法分为3组:Sham组(空回肠单纯离断吻合)(n=6);SBS组(切除大约75%中段小肠,n=6);ACEI组[(SBS+ACEI)2 mg.kg-1.d-1](n=6)。术后10 d取材,测量大鼠小肠绒毛高度和黏膜层厚度,TUNEL法检测肠上皮细胞凋亡情况,RT-PCR技术检测肠黏膜ACE mRNA表达。结果术后ACEI组体质量恢复速度快于SBS组,但二者都明显慢于对照组(P<0.05)。SBS组黏膜绒毛较对照组明显增生肥大,绒毛高度和隐窝深度(总高度)增加约50%[(778±30)μmvs(502±40)μm,P<0.01],给予ACEI后,肠黏膜厚度较SBS组增高更明显[(870±29)μmvs(778±30)μm,P<0.01],75%小肠切除引起了残留肠段肠上皮细胞凋亡的显著增加[(5.46±0.95)%vs(1.01±0.49)%,P<0.05],给予ACEI显著抑制了肠切除所引起的残留肠段肠上皮细胞凋亡的增加[(2.39±0.70)%,P<0.05]。SBS组ACEmRNA水平较对照组明显增高,给予ACE抑制剂后ACE水平进一步增高(P<0.05)。结论肠切除后ACE的升高与上皮重塑密切相关,ACEI的应用可以抑制肠上皮细胞凋亡,促进肠黏膜适应性代偿。
- 王文生肖卫东张朝君陈炜孙力华杨桦
- 关键词：短肠综合征血管紧张素转换酶抑制剂肠黏膜
