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重组LTB蛋白在水弧菌VSP60中的高效表达与纯化被引量：4: 2003年; 目的　优化重组大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 (rLTB)工程菌 (VSP6 0 )高效表达的条件。方法　以UVP凝胶照相系统扫描以及改良Lowry′s法检测rLTB表达量并分析各种因素对其影响。利用SephacrylS 10 0凝胶层析纯化rLTB蛋白。结果　工程菌 30℃振荡培养至吸光度 (A6 0 0 )值达0 .2～ 0 .3时加IPTG(终浓度为 0 .5mmol L) ,诱导培养 18～ 2 2h为rLTB蛋白表达的最佳条件。SephacrylS 10 0凝胶柱一步层析后 ,rLTB蛋白纯度可达 98.1%。结论　本研究所用的培养和纯化工艺简单易行 ,可获得高产量、高纯度的rLTB蛋白。; 王静李琳琳孔令洪于军郑瑾韩俊宏来宝长司履生王一理; 关键词：纯化

同系细胞瘤苗对低免疫原性小鼠黑色素瘤治疗作用的研究被引量：6: 2002年; 齐旭周伊王一理马军闫晓彩韩俊宏来宝长尚宁宽耿宜萍司履生; 关键词：黑色素瘤肿瘤疫苗佐剂

T细胞活化的负调节机制被引量：1: 2002年; 免疫系统作为机体防御系统的核心 ,具有极其完善的调节机制 ,而调节T细胞活化对整个免疫系统的调节至关重要。T细胞调节机制中 ,一方面共刺激分子作为特定细胞的表面分子参与T细胞活化 ,同时也参与T细胞的调节 ,其中CD2 8分子刺激T细胞活化 ,而CTLA 4则是负调节因子即抑制T细胞的活化 ;另一方面 ,T细胞抗原受体 (TCR)下游信号传导分子也参与负性信号调节。这两者的相互协调作用是T细胞负调节的关键。; 韩俊宏; 关键词：T细胞共刺激分子 TCR CTLA-4 T细胞抗原受体

重组人截短型IL-6表达载体的构建及表达被引量：2: 2001年; 旨在建立人截短型 IL- 6原核高效表达系统。用 PCR方法获得截短的人 IL- 6基因 ( rh IL - 6c DNA) ,将其插入克隆载体 p UC1 8中 ,经证实后再克隆入表达载体 p BV2 2 0中 ,鉴定阳性表达载体。结果建立了截短型 IL- 6基因的克隆载体 ,经测序证实完全正确 ;构建了截短型 IL- 6的原核表达质粒 p BV2 2 0 /rh IL- 6并获得高效表达 ;初步纯化的表达蛋白的比活性为 5× 1 0 7μmol/min· mg蛋白 ;用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达了截短型 rh IL- 6,为大量制备 IL- 6奠定了基础。; 孔令洪王一理韩俊宏郑瑾齐旭耿宜平司履生; 关键词：原核表达大肠杆菌克隆载体基因工程

重组人IL-6在朋肠杆菌中的高效表达与纯化研究: 目的:1.重组rhIL-6/PBV220质粒在工程中连续传代的稳定性的鉴定.2.确定rhIL-6/PBV220/DH5α基因工程菌最佳发酵培养条件,选择出最佳诱导表达时间.3.探索rhIL-6的复性和纯化方法,建立简便、...; 韩俊宏; 关键词：RHIL-6 工程菌基因蛋白质纯化; 文献传递

人B7.2(CD86)胞外区原核表达及其工程菌发酵培养的实验研究被引量：1: 2002年; 目的　利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)并对工程菌发酵培养条件进行优化。方法　用聚合酶链反应 (PCR)技术从B7.2cDNA全长中克隆B7.2 (IgV +C) ,将PCR产物克隆入表达载体 pGEX 4T 3从而得到重组体 pGEX 4T 3 /hB7.2 (IgV +C) ,SDS PAGE及Westernblot用于检测目的蛋白的表达 ,同时对目的蛋白诱导表达时间及诱导剂浓度进行优化 ,对重组质粒的遗传稳定性进行鉴定。结果　Westernblot结果显示相应分子质量 5 5kD处有hB7.2 (IgV+C)与GST融合蛋白的高效表达 ,表达量占菌体总蛋白的 3 0 %左右。对工程菌进行发酵培养研究的结果表明 ,所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定 ,未见质粒丢失 ,目的蛋白的表达不受影响 ,且在 3 7℃诱导 5h、IPTG终浓度为 4mmol·L- 1 时其表达量最多。结论　证明了利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)的可行性。; 闫晓彩来宝长郑瑾马军韩俊宏王一理司履生; 关键词：共刺激 GST 原核表达

一氧化氮与高血压: 1998年; 一氧化氮(NO)在细胞内信息传递方面起着重要作用,在生理学、神经学、免疫学等许多领域证明了NO具有第二信使和神经递质的功能。它是NO合酶(NOS)作用于左旋精氨酶合成的内源性物质。NO释放增多,可引起全身血管扩张、导致低血压,血管阻力降低、心率增快、有效血容量不足等高排低阻的高动力学改变。本文主要就NO对循环的调节、特别是与高血压关系作一综述:; 韩俊宏贺林; 关键词：高血压一氧化氮血流调节 NOS

重组人截短型IL-6在大肠杆菌DH5α中的高效表达与纯化被引量：4: 2003年; 为研究重组人截短型白细胞介素6(rhIL-6)工程菌高效表达的影响因素及纯化方法的优化。观察不同培养温度对重组人截短型IL-6工程菌生长密度和IL-6表达的影响;复性蛋白终浓度对复性效率的影响;细菌诱导培养后,经破菌-洗包-溶包初步纯化后,再经柱层析纯化IL-6。其结果为30℃培养后42℃诱导培养5h的IL-6表达效率最高,达32.8%;复性蛋白终浓度在0.5g/L以下时,蛋白复性效率最佳,比活性为4.42×108μmol/min·mg-1;进一步柱层析后,IL-6的纯度达96.5%,得率可达46.5%。最后得出培养和纯化工艺简便易行,可获得高纯度、高比活性的截短型rhIL-6的结论。; 韩俊宏孔令洪郑瑾齐旭来宝长司履生王一理; 关键词：大肠杆菌纯化

沙眼衣原体D型MOMP基因的克隆和序列分析被引量：2: 2005年; 目的　从D型沙眼衣原体培养物中克隆主要外膜蛋白(MOMP)基因。方法　利用细胞培养法扩增沙眼衣原体后,提取基因组为模板,经聚合酶链反应(PCR)扩增全长MOMP基因,并用酶切、PCR扩增及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定。结果　成功扩增了MOMP基因,并插入克隆载体 pUCmT中。结论　MOMP基因的克隆为进一步开展沙眼衣原体的疫苗研究奠定了基础。; 杨章民韩俊宏郑瑾杨筱凤来宝长王一理司履生; 关键词：沙眼衣原体克隆主要外膜蛋白

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韩俊宏