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阎琛
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
供职机构:
重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室
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发文基金:
国家教育部博士点基金
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
张燕
重庆医科大学检验医学院临床检验...
刘斌
重庆医科大学检验医学院临床检验...
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重庆医科大学检验医学院临床检验...
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2009
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用FRET方法研究与Mps1蛋白有相互作用的CENP-E蛋白结构域
被引量:5
2009年
目的:探索与Mps1蛋白有相互作用的CENP-E蛋白结构域。方法:将重组质粒pEGFP-CENPE2(674~1085位氨基酸)、pEGFP-CENPE3(1200~2134位氨基酸)转染人胚肾293(HEK293)细胞,采用受体漂白荧光共振能量转移方法(FRET方法),检测EGFP-CENPE2、EGFP-CENPE3和Mps1间的能量转移率(Ef),进一步用免疫共沉淀方法验证FRET的实验结果。结果:重组质粒转染HEK293细胞后经激光共聚焦显微镜观察重组质粒表达的融合蛋白与Mps1都存在着共定位;FRET检测结果显示EGFP-CENPE3和Mps1间的能量转移率为[(12.63±0.48)%,n=30],pEGFP-CENPE2和Mps1间的能量转移率为[(3.07±0.21)%,n=30],与对照组[(2.96±0.27)%,n=30]比较pEGFP-CENPE3和Mps1间的能量转移率差异存在显著性(p<0.05),免疫共沉淀实验结果显示EGFP-CENPE3与Mps1蛋白间存在相互作用。结论:FRET技术和免疫共沉淀实验证明了EGFP-CENPE3与Mps1间存在着相互作用。
刘子杰
翁亚光
李素彦
施琼
蔡燕
刘斌
张燕
阎琛
关键词:
CENP-E
蛋白质相互作用
荧光共振能量转移
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