郑立双
- 作品数：6 被引量：13H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 牛肌生成抑制素相互作用蛋白筛选及验证
- 肌生成抑制素(Myostatin, MSTN)是骨骼肌生长的负调控因子,抑制其功能在畜牧业和临床医学上具有重要意义,其功能调控是否成功的关键在于明确肌生成抑制素相互作用蛋白的作用机理。目前,本研究室利用基因克隆技术、免疫...
- 郑立双
- 关键词：酵母双杂交系统MSTN相互作用蛋白免疫共沉淀
- 文献传递
- 牛肌生成抑制素基因酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定
- 2012年
- 采用RT-PCR技术扩增牛肌生成抑制素基因成熟片段,并克隆入质粒pSos中,测序鉴定后获得酵母双杂交诱饵重组质粒pSos-MSTN。将诱饵重组质粒与对照质粒转化入酵母菌cdc25Hα中。结果表明:该段基因表达的蛋白对酵母菌cdc25Hα无毒性和无自激活作用,这说明可以用此酵母双杂交系统对牛肌生成抑制素进行研究。
- 郑海舰王军柴孟龙郑立双窦长友赵静
- 关键词：肌生成抑制素酵母双杂交系统诱饵载体
- 酵母双杂交技术及应用的研究进展被引量：12
- 2013年
- 酵母双杂交技术是研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种非常有效的分子生物学方法,它是一种能直接检测胞内蛋白质相互作用较为简便、快捷、高效、敏感、广泛的方法。作者将主要介绍酵母双杂交技术的基本原理、应用及优缺点,现就酵母双杂交技术及其应用的研究进展作一综述。
- 郑立双李向楠孙城涛刘红羽刘勋贺明吕文发
- 关键词：酵母双杂交技术真核细胞蛋白质
- 利用酵母双杂交系统筛选与牛MSTN相互作用蛋白被引量：1
- 2013年
- 本研究利用酵母双杂交系统筛选与牛肌肉生成抑制素(MSTN)相互作用的蛋白,为阐明MSTN生物学功能的调控机制奠定基础。首先,构建诱饵质粒pGBKT7-MSTN转化Y2HGold酵母菌,随后,与构建好的牛肌肉cDNA文库Y187酵母菌杂交配对,涂布接种在SD/-Trp-Leu-His-Ade营养缺陷培养基上筛选与MSTN相互作用的蛋白,并通过免疫共沉淀技术对筛选到的T-cap与MSTN进行相互作用验证。结果表明:经酵母双杂交两轮严格筛选,最终得到一种可能与MSTN特异性相互作用的Tcap蛋白,并且免疫共沉淀验证T-cap与MSTN蛋白在体内可以相互结合。试验表明:为进一步研究MSTN的功能和作用机制提供了新的线索。
- 赵静王军陈洋郑立双孙城涛吕文发
- 关键词：酵母双杂交MSTN相互作用蛋白
- 高血压对大鼠脑内一氧化氮合酶表达量的影响
- 2010年
- 目的观察高血压对大鼠脑内一氧化氮合酶表达量的影响。方法分别取高血压大鼠和正常大鼠各3只,全身灌注,取脑,制成石蜡切片,分别用HE染色、亚甲基蓝染色、免疫组织化学方法观察高血压大鼠和正常大鼠脑内神经元形态及一氧化氮合酶的表达量。结果高血压大鼠脑内海马区、黑质区和纹状体区一氧化氮合酶表达量均低于正常大鼠,且差异显著,p<0.05。结论高血压可导致大鼠脑内部分脑区一氧化氮合酶表达量下降。
- 姚华郑立双赵光涛
- 关键词：高血压一氧化氮合酶免疫组化
- 牛MSTN蛋白与T-cap蛋白的相互作用验证
- 2014年
- 通过体内和体外试验研究牛MSTN蛋白与T-cap蛋白间的相互作用。构建pLEGFP-MSTN及pcDNA3.0-Flag-T-cap真核表达载体,共转染至293T细胞,利用免疫共沉淀技术检测两者间相互作用。再构建pGEX-4T-1-MSTN表达载体,经IPTG诱导表达并纯化GST-MSTN,将pcDNA3.0-Flag-T-cap载体转至293T细胞,通过GSTpull down检测两者间相互作用。利用各抗标签克隆抗体沉淀细胞裂解液,分别进行Western blotting检测,结果显示,体内和体外试验都可以检测到蛋白的表达。从而证实了MSTN与T-cap之间存在相互作用,本试验为在分子水平上为探索MSTN蛋白的新功能提供思路。
- 郑立双孙城涛李向楠刘红羽贺明刘勋吕文发
- 关键词：免疫共沉淀MSTN
