贺丽清
- 作品数：12 被引量：33H指数：4
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 提高生物技术制药教学效果初探被引量：7
- 2009年
- 对生物技术制药在课程内容和教学方法上的初步探索进行了总结,认为应结合生物技术制药的学科特点,在教学过程中突出药学特色;应不断更新教学内容,让学生经常接触到学科的前沿知识;应开展启发式教学,引导学生进行科学思维;应充分利用现代化信息技术和教学工具,调动学生学习的积极性。
- 曹筑荣杲修杰吴守振贺丽清
- 关键词：生物技术制药教学
- HER-2蛋白疫苗的制备及在小鼠中诱导的抗体应答
- 2009年
- 目的:制备HER-2抗原疫苗.方法:采用RT-PCR方法从HER-2+SKBR3细胞株中获得HER-2基因胞外段编码区cDNA,构建pQE-30-HER-2原核表达载体,在大肠杆菌中表达HER-2胞外区蛋白.Ni-NTA柱亲和层析纯化后,梯度尿素复性,Western Blot鉴定.用获得的蛋白免疫小鼠,检测重组蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答.结果:构建的pQE-30-HER-2质粒经酶切和DNA测序分析,结果表明该基因的序列与设计的序列完全相同.构建的质粒转化DH5α后经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,该重组蛋白以包涵体形式表达,且与mAb Herceptin有较好的结合活性.包涵体用Ni-NTA柱亲和层析纯化后,梯度尿素复性,最大限度的获得了可溶性的HER-2胞外区蛋白.用重组蛋白免疫小鼠,得到了较高的抗体滴度.结论:成功制备了HER-2蛋白疫苗并诱导出较高抗体滴度,为下一步工作打下基础.
- 贺丽清张存吴守振李维娜张英起
- 关键词：HER-2蛋白蛋白纯化包涵体
- HER2基因真核表达载体的构建及其抑瘤效应研究
- 目的构建HER2基因真核表达载体,研究其对肿瘤生长的抑制作用。方法通过RT-PCR方法从HER-2+SKBR3细胞株中获得HER-2基因胞外段编码区cDNA,构建pRC-CMV-信号肽-hHER2-ECD真核载体,于大肠...
- 贺丽清张存李维娜张路张英起
- 关键词：真核表达载体转染肿瘤
- 文献传递
- SAPO-5分子筛的合成技术及应用被引量：5
- 2008年
- 讨论了影响SAPO-5分子筛合成的重要因素,对SAPO-5分子筛以及掺杂金属离子的SAPO-5分子筛催化剂在催化领域的应用进行了归纳,以期对影响SAPO-5分子筛合成的因素和掺杂金属离子的SAPO-5分子筛催化剂的性能有比较全面的认识。还对SAPO-5分子筛在择形催化、材料制备、吸附和分离、载体等领域的应用前景进行了展望。
- 高俊萍王平安曹筑荣贺丽清
- 关键词：SAPO-5分子筛影响因素合成技术
- 内含肽介导的重组人干扰素α2a的原核表达及其生物学活性
- 2013年
- 目的原核表达内含肽介导的重组人干扰素α2a(rhIFNα2a)融合蛋白,并检测其生物学活性。方法以质粒pBV220-IFN-α2a为模板PCR扩增rhIFNα2a基因,将其插入原核表达载体pTWIN1的内含肽Ssp DnaB基因下游的多克隆位点,构建重组表达质粒pTWIN1-rhIFNα2a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE及Western blot分析,并对裂菌上清的生物学活性进行测定。结果双酶切及测序结果显示,融合蛋白基因已克隆入表达载体中;rhIFNα2a蛋白的相对分子质量约44 300,表达量占全菌总蛋白的30%,在裂菌上清中的表达量占目的蛋白的25%,可与小鼠抗hIFNα单克隆抗体特异性结合;裂菌上清中rhIFNα2a蛋白的活性为5.57×107IU/ml,表明该重组蛋白具有良好的IFN抗病毒活性。结论已成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了具有生物学活性的可溶性重组rhIFNα2a与内含肽Ssp DnaB融合蛋白,为大量生产IFNα2a提供了新的思路。
- 万一张琨张月娟贺丽清赵宁訾静
- 关键词：干扰素Α2A原核细胞内含肽
- 重组人半乳凝集素-1的原核表达、纯化及生物活性检测
- 2010年
- 目的:在大肠杆菌中表达半乳凝集素-1(galectin-1),并进行纯化及生物活性检测。方法:将人半乳凝集素-1基因克隆至带有His融合标签的原核表达载体pQE-30上,转化大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析纯化后,进行Western印迹鉴定,并用红细胞凝集试验检测其生物学活性。结果:双酶切鉴定和核苷酸序列测定表明重组表达质粒pQE-30-Galectin-1构建正确;重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的50%,主要以可溶形式表达,纯化后蛋白纯度达95%以上,且具有良好的红细胞凝集活性。结论:在大肠杆菌中表达了重组人半乳凝集素-1,且具有良好的生物活性。
- 李晶贺丽清舒震侯建伟陈霖徐玉金张伟张英起
- 关键词：原核表达纯化
- HER2基因真核表达载体的构建及其抑瘤效应研究
- 目的：构建HER2基因真核表达载体，研究其对肿瘤生长的抑制作用。
方法：通过RT-PCR方法从HER-2+SKBR3细胞株中获得HER-2基因胞外段编码区cDNA，构建pRCCMV-信号肽-hHER2-ECD真...
- 贺丽清张存李维娜张路张英起
- 关键词：真核表达载体HER2基因抑瘤效应
- 文献传递
- ^(99)Tc^m间接标记NGR-IFN-α2a的方法研究被引量：2
- 2008年
- 以双半胱氨酸(L,L-ethylenedicystein,EC)作为双功能螯合剂,MDP作为转移螯合剂,采用两步法对NGR-IFN-α2a进行^(99)Tc^m标记,制备了^(99)Tc^m-EC-NGR-IFN-α2a,并对标记和非标记的NGR-IFN-α2a进行活性鉴定。结果显示,EC-NGR-IFN-α2a合成产额为87.5%,^(99)Tc^m-EC-NGR-IFN-α2a标记率86%,放化纯度96%,在2 h内,标记物体外较稳定;EC-NGR-IFN-α2a与^(99)Tc^m-EC-NGR-IFN-α2a的活性与NGR-IFN-α2a无差异。
- 任炳秀汪静张路王喆杨卫东张英起李国权贺丽清
- 关键词：NGR干扰素
- 生物技术专业实验课教学方法初探被引量：7
- 2008年
- 通过分析生物技术实验课的现状,针对目前教学中存在的问题,探讨生物技术实验教学改革的方向,并分析了开设设计性实验教学的意义。
- 贺丽清曹筑荣张英起
- 关键词：生物技术设计性实验教学
- Myostatin基因疫苗动物免疫效果的初步研究被引量：4
- 2009年
- 目的:检测Myostatin基因疫苗的免疫效果,观察其对免疫动物的影响,为Myostatin基因疫苗的应用提供实验研究。方法:以Myostatin基因疫苗pVAC-TT-Ms免疫小鼠,ELISA法测定其免疫小鼠血清的抗体滴度,通过全自动生化分析仪检测血清指标。以组织化学染色(HE)染色检测Myo-statin基因疫苗对免疫小鼠骨骼肌的影响。利用Scion Image4.02分析Myostatin基因疫苗对免疫小鼠肌纤维横截面积的影响。结果:基因疫苗Myostatin能够诱导小鼠产生针对Myo-statin的抗血清。与正常对照组比较,基因疫苗pVAC-TT-Ms免疫的动物平均体重增加了9.8%,股四头肌、腓肠肌和胸大肌分别增加了24.1%、10.9%和20.3%。结论:基因疫苗Myostatin能够诱导小鼠产生针对Myostatin的特异性中和抗体。Myostatin基因疫苗免疫的动物体重增加,肌细胞有肥大现象,肌肉质量明显增加。
- 吴守振陈素兰贺丽清张阔唐量秦鑫张英起
- 关键词：MYOSTATIN动物免疫基因疫苗
