谭建华
- 作品数：74 被引量：448H指数：12
- 供职机构：东北林业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 人乙酰胆碱酯酶(AchE)cDNA克隆及真核表达载体的构建被引量：2
- 2003年
- 目的 克隆人乙酰胆碱酯酶 (AchE)cDNA并构建真核表达载体。方法 根据GeneBank中hAchE核苷酸序列 ,设计并合成 1对特异性扩增hAchE的引物 ,从 18周龄引产的胎儿大脑组织中提取RNA为模板 ,利用RT PCR技术扩增出hAchEcDNA片段 ,并与pGEM T载体连接 ,转化大肠杆菌DH5α中 ,经IPTG X gal诱导培养 ,筛选白斑提取重组载体 ,经酶切和PCR鉴定及序列测定与分析 ,并构建hAchE真核表达载体pcDNA3 .1(+) hAchE。结果 已克隆的hAchEcDNA片段全长约 1.9kb ,其测序结果与基因文库中的人乙酰胆碱酯酶cDNA序列相符。结论 在国内首次利用RT PCR成功地克隆了hAchEcDNA全长 ,并构建了hAchE真核表达载体pcDNA3 .1(+) hAchE ,为进行hAchE的结构与相关功能研究和基因工程生产奠定了基础。
- 马兴元谭建华李阳芳万忠海朱平姜力孙曼霁
- 关键词：CDNA克隆真核表达载体
- 鸡肉组织中环丙沙星残留的ELISA与HPLC检测方法比较被引量：1
- 2007年
- 利用单克隆抗体间接竞争ELISA方法测定了鸡肉中环丙沙星的残留，同时利用HPLC方法进行了比较分析。间接竞争ELISA法的践性范围为6．25-400μg／L。最低检测限为4.10μg／L。HPLC法的线性范围为0.06～500μg／L。最低检测限为0．06μg／L。在标准品添加量为1．5625×10^-4～1.25×10^-3g／kg时，ELISA方法的平均回收率为73．81%．批内变异系数为8．75％．HPLC方法平均回收率为80．41％，批内变异系数为1.27％。结果显示．ELISA方法与HPLC方法具有很好的相关性（r^2=0．9925），试ELISA方法可用于鸡肉样品中环丙沙星的检测。
- 李岩松周玉李吉平谭建华
- 关键词：环丙沙星ELISAHPLC
- C6细胞HGPRT缺陷株诱变的试验研究
- 2011年
- 通过N-甲基-N′-硝基亚硝基胍、8-氮鸟嘌呤、6-巯基鸟嘌呤紫外线照射的联合作用,试图建立C6细胞的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶缺陷株,为建立大鼠垂体促性腺激素杂交瘤细胞株奠定基础,但最终未能获得预期的能够被HAT培养基筛选的HGPRT-缺陷株,提示C6细胞株的HGPRT基因非常稳定,诱变方法难以使其突变缺失。
- 王新孙书芳谭建华赖小平
- 关键词：MNNGHGPRTC6细胞
- 大鼠腺垂体细胞的体外原代培养及其GTH分泌活动的观察被引量：11
- 2010年
- 本文旨在体外进行原代培养大鼠垂体细胞并观察GTH分泌活动规律;在每日观察细胞生长状态并分组检测其FSH、LH分泌水平,及做免疫组化染色实验,连续5d;结果表明,第7天时,细胞状态最佳,FSH、LH分泌水平最高,GTH的阳性率最大;所以大鼠垂体细胞体外培养生长最旺盛的时期是第7天。
- 王新谭建华赖小平万忠海韦旭斌
- 关键词：体外原代培养
- 抗PEA受体结合区单克隆抗体的制备及鉴定
- 2007年
- 目的：探讨绿脓杆菌外毒素A（PEA）中和性单克隆抗体在预防和治疗绿脓杆菌感染中的免疫保护作用。方法：以重组绿脓杆菌外毒素A受体结合区蛋白免疫Balb／c小鼠，将免疫鼠脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，用ELISA方法筛选细胞培养上清，采用有限稀释法对阳性孔进行克隆，3次克隆后获得4株能稳定分泌抗PEA单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为1CA，1134，2E12和3C6。结果：细胞培养上清ELISA效价为4000～8000，腹水ELISA效价可达25600～51200，其中3C6抗体在细胞上的中和试验显示具有较高的中和效价。其亲和常数为8．93×10^8。结论：获得的单克隆抗体可在抗烧伤绿脓杆菌感染中发挥重要作用。
- 万忠海岳玉环杜付彬谭建华朱平
- 关键词：绿脓杆菌外毒素AELISA单克隆抗体
- 实时荧光定量PCR技术研究进展及应用被引量：49
- 2006年
- 实时荧光定量PCR(Real-time fluo-rescent quantitative polymerase chain reac-tion,Real-time PCR)技术是20世纪90年代中期发展起来的一种新型核酸定量技术。它利用荧光实时检测PCR反应,具有灵敏度高、特异性强、节约时间等优点。文章就常用的4种方法,即DNA结合染色、水解探针、分子信标和杂交探针的原理和特点进行介绍,同时综述了荧光定量PCR技术在实践中的应用。
- 张贺李波周虚谭建华
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 有机磷类神经毒剂及其抗毒剂被引量：4
- 2003年
- 谭建华马兴元朱平孙曼霁
- 关键词：化学武器理化性质毒性作用代谢
- 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统及其在外源蛋白生产中的优势与应用前景被引量：48
- 2003年
- 马兴元谭建华朱平孙曼霁
- 关键词：巴斯德毕赤酵母
- 氧氟沙星完全抗原的合成鉴定及其单克隆抗体的制备纯化被引量：7
- 2006年
- 本试验通过碳二亚胺(EDC)法把氧氟沙星(OFLX)与载体蛋白BSA和OVA分别进行偶联制备免疫抗原和包被抗原,并采用紫外扫描法和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对合成抗原进行了鉴定。通过杂交瘤常规技术获得了抗OFLX的单克隆抗体杂交瘤细胞株7株,用辛酸-硫酸铵法对腹水进行了纯化。纯化腹水均属IgG1型。经过ELISA方法鉴定,纯化后的抗体效价>1:128000;交叉实验证明所得抗体与达氟沙星、洛美沙星、环丙沙星、诺氟沙星、卡那霉素、庆大霉素、泰乐菌素均没有交叉反应,表现了良好的敏感性和特异性。
- 于海峰张森万忠海李晓艳谭建华
- 关键词：氧氟沙星单克隆抗体酶联免疫吸附试验
- LPS和LT对体外大鼠肠粘膜微血管内皮细胞的影响
- 2006年
- 将大鼠肠粘膜微血管内皮细胞分为空白对照组、BSA对照组、LPS1组、LPS2组、LT 1组和LT 2组6个组,分别用维持培养液,含50μg/mL BSA、1或10μg/mL LPS、10或50μg/mL LT的培养液静置培养12 h,研究不同浓度LPS和LT对体外大鼠肠粘膜微血管内皮细胞形态及NO分泌量的影响,并确定LPS和LT致大鼠肠粘膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量。结果表明,LPS可使细胞长宽比增大,间隙变宽,而LT可使细胞肿大,排列紊乱;各浓度的LPS和LT均能引起肠粘膜微血管内皮细胞的NO分泌量升高,但1μg/mL LPS与50μg/mL LT的作用更明显;LPS和LT致大鼠肠粘膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量分别是1和50μg/mL。
- 王新谭建华索占伟刘金玲杜绍范穆祥韦旭斌
- 关键词：肠粘膜微血管内皮细胞LPSLT
