袁宝强 作品数:126 被引量:320 H指数:9 供职机构: 徐州医学院附属医院 更多>> 发文基金: 江苏省脑病生物信息重点实验室开放课题 南京军区医学科技创新课题 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 哲学宗教 更多>>
戊四氮点燃致发育期癫(疒间)大鼠海马神经元突触结构的改变 2012年 目的 观察戊四氮(PTZ)点燃后发育期癫(疒间)大鼠海马神经元海马突触素(P38)和突触后致密物质(PSD95)及电镜超微结构的变化.方法 21日龄SD大鼠随机分为生理盐水组(NS)和实验组(PTZ),用戊四氮建立点燃模型,免疫组化检测大鼠P38及 PSD95阳性细胞的数量及分布,电镜观察海马CA3区超微结构的变化.结果 PTZ组大鼠海马区P38及PSD95免疫反应产物表达量较NS组明显减少(P〈0.05);电镜下NS组海马CA3区神经元形态及突触结构未见明显异常,PTZ组大鼠神经元细胞及突触结构均有改变.结论 戊四氮点燃所致癫(疒间)对发育期大鼠海马神经元的突触结构有明显损害. 耿丽娟 李慧 王娟 董洪洋 王增芹 袁宝强关键词:P38 突触结构 戊四氮诱导单次惊厥幼鼠海马碱性成纤维细胞生长因子表达的研究 被引量:1 2007年 目的利用戊四氮单次惊厥幼鼠模型,研究癫疒间单次惊厥发作后海马各区碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达情况。方法建立戊四氮腹腔注射幼鼠单次惊厥发作模型,分成A组(癫疒间发作组)和B组(生理盐水对照组)。每个组后按造模后1天、7天、14天分为3组。HE染色观察病理形态改变,免疫组化观察海马bFGF表达变化。结果病理形态上A组可见海马神经元变性、坏死,胶质细胞增生,B组形态学无明显变化。bFGF表达:A组发作后1天bFGF表达增高最明显(P<0.01),以CA1区和齿状回明显,以后逐渐下降,7天时仍高于B组(P<0.05),14天时下降到较低水平,和B组无显著性差异(P>0.05)。B组各时间点bFGF表达无显著性差异。结论幼鼠单次惊厥发作后海马bFGF表达增加,在发作后7天内较为明显。bFGF在癫疒间后脑损伤的自我修复中可能发挥着重要的作用。 戴园园 袁宝强 魏海燕关键词:碱性成纤维细胞 海马 戊四氮 Semaphorins-3A蛋白在发育期大鼠脑内的分布与表达 被引量:1 2012年 目的了解Semaphorins-3A蛋白在生后发育期大鼠脑中的分布特征和表达变化。方法随机选择生后0d、7d、14d、21d和28d日龄SD大鼠,通过免疫组化法观察Semaphorins-3A阳性细胞在大脑皮层、海马、齿状回和内嗅皮层内的分布和表达量。结果出生后大鼠Semaphorins-3A阳性细胞广泛密集的分布于顶、枕、额、颞、岛叶、扣带皮质、梨状前皮质和杏仁周皮质中除分子层(Ⅰ)以外的颗粒细胞层(Ⅱ)、外椎体细胞层(Ⅲ)、内颗粒细胞层(Ⅳ)、内椎体细胞层(Ⅴ)和多行层(Ⅵ)。Semaphorins-3A蛋白在0d、7d、14d、21d和28d日龄大鼠的内嗅皮层中表达量分别为84916.23±3266.34、77711.41±2634.26、74124.25±3989.09、65887.63±3406.57和57705.96±3136.35(IOD),表达区域缩小在Ⅱ-Ⅵ层的部分层次。Semaphorins.3A阳性细胞也分布于各日龄大鼠的齿状回、CAl、CA3区颗粒细胞层,少数散在分布于多行层,齿状回、CAl、CA3区内Semaphorins-3A表达量在各日龄之间具有明显差异(P〈0.01)。结论Sema-phonns-3A阳性细胞广泛分布于发育期大鼠脑各脑叶及海马CAl、CA3、DG区内,并随年龄的增长分布范围逐渐缩小。 袁宝强关键词:发育鼠 大脑皮质 海马 内嗅皮层 c-fos反义寡聚核苷酸对癫癎发作后细胞凋亡的影响 被引量:5 2006年 目的探讨c-fos基因在戊四氮(PTZ)致大鼠模型中表达及其与细胞凋亡的关系。方法采用免疫组织化学法检测致模型大鼠海马神经细胞Fos表达;TUNEL及流式细胞仪检测细胞凋亡;c-fos反义寡聚核苷酸侧脑室注射干预,观察其在抗凋亡中作用。结果PTZ致后大鼠可引起Fos在脑内一过性高表达,1 h达高峰(P<0.001),而神经细胞凋亡在24 h达峰值(P<0.001);c-fos反义寡聚核苷酸部分抑制Fos表达,并显著减少神经细胞凋亡。结论癫发作后Fos早期表达可能与后期神经细胞凋亡有关;c-fos反义寡聚核苷酸能抑制脑内Fos表达,对癫造成脑损伤起一定保护作用。 刘月影 袁宝强关键词:癫痫 C-FOS 细胞凋亡 碱性成纤维细胞生长因子对不同日龄大鼠癫间疒持续状态后海马神经发生的影响 2007年 目的了解不同年龄大鼠癫间疒持续状态后外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对海马齿状回颗粒细胞层神经发生的影响。方法建立14天大鼠和60天大鼠戊四氮(PTZ)诱导癫疒间持续状态模型,生理盐水(NS)注射作为对照,皮下注射bFGF进行干预,分4组:NS组、NS+bFGF组、PTZ组、PTZ+bFGF组。采用B rdu标记新生细胞,免疫组化方法检测造模后大鼠海马齿状回神经发生情况,造模后第7、14天2个时间点观察海马齿状回B rdu阳性细胞数。结果造模后第7天和14天,PTZ组中各日龄组大鼠海马齿状回B rdu阳性细胞数明显高于各自对应的NS组(P<0.01),NS+bFGF组各日龄大鼠B rdu阳性细胞数亦高于NS组(P<0.05),PTZ+bFGF组B rdu免疫阳性细胞数较PTZ组亦有升高(14天日龄组P<0.05,60天日龄组P<0.01)。60天大鼠较14天大鼠升高幅度更为明显(P<0.01)。结论bFGF可增加癫疒间持续状态大鼠海马齿状回颗粒细胞发生,对60日龄大鼠比14日龄幼鼠更为明显。 戴园园 袁宝强 魏海燕关键词:癫痫持续状态 碱性成纤维细胞生长因子 神经发生 齿状回 应用荧光定量PCR法快速诊断柯萨奇病毒性脑炎 2002年 目的 采用逆转录PCR结合荧光探针对体外RNA扩增和检测技术即荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)方法测定脑脊液中柯萨奇病毒 (CBV)的数量 ,诊断柯萨奇病毒性脑炎。方法 采用CBVFQ -PCR诊断试剂盒 ,以一种完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量PCR法 ,检测了 113例临床诊断为病毒性脑炎患儿的脑脊液标本。结果 4 6例脑脊液FQ -PCRCBV阳性患者中 ,CBV拷贝数与临床病情轻重呈正相关 ,在病程早期CBV阳性率较高。结论 FQ -PCR法可用于柯萨奇病毒性脑炎的早期诊断 ,对指导治疗和疗效观察有一定的临床意义。 程华 袁宝强 路明 武怡 卢思广 薛天阳 高莉莉关键词:荧光定量PCR法 儿童 银杏内酯B对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马内MMP-2及MMP-9表达的影响 :观察银杏内酯B(GB)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马内基质金属蛋白酶MMP-2及MMP-9的影响,探讨GB的脑保护作用机制.方法:192只新生7d日龄SD大鼠随机分为正常组(N组)、假手术组(S组)、HIB... 孙明霞 张亚楠 孔艳冉 霍士光 袁宝强关键词:银杏内酯B 银杏内酯B对体外培养神经干细胞内HIF-1α及PI3K/Akt信号通路的影响 被引量:8 2014年 目的探讨银杏内酯B(GKB)对体外培养神经干细胞(NSCs)内低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/Akt信号通路表达的影响。方法在建立谷氨酸对神经干细胞损伤的模型基础上,给予银杏内酯B、PI3K/Akt特异性抑制剂wortmannin进行干预,将实验分为两大组:即正常细胞组、谷氨酸损伤组,各组下又分为4个小组:(1)GKB组;(2)对照组;(3)wortmannin+GKB组;(4)wortmannin组。采用Western blot印迹来检测各组NSCs中HIF-1α、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白水平的表达。结果无论正常细胞组还是谷氨酸损伤细胞组,NSCs经GKB处理后HIF-1α、p-Akt表达均较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);经wortmannin处理后HIF-1α、p-Akt蛋白表达受抑制,较对照组明显减弱(P<0.05);wortmannin+GKB组和wortmannin组比较,HIF-1α、p-Akt表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCs经谷氨酸处理后,HIF-1α、p-Akt表达较未受损的NSCs表达增强(P<0.05)。结论银杏内酯B是神经干细胞保护作用机制之一,可能与激活PI3K/Akt信号通路、进一步上调HIF-1α表达有关。 刘娜 袁宝强 孙康钦 白莲琴 李腾腾关键词:银杏内酯B HIF-1Α 不同日龄大鼠海马神经发生的研究 被引量:3 2009年 目的探讨年龄因素对大鼠海马齿状回神经发生的影响及新生神经细胞的分化。方法选择7、14、28、60、180 d 5个日龄组SD大鼠,每组8只,雌雄不限。采用5-溴脱氧尿核苷(BrdU)标记新生细胞,以β微管蛋白(TuJ1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)双标免疫组织化学方法分别标记其神经元和胶质细胞,检测不同日龄大鼠海马齿状回神经发生,了解新生细胞向神经元细胞和神经胶质细胞分化比例。结果5个日龄组大鼠均有海马齿状回颗粒细胞层神经发生现象,细胞形态多样,呈圆形、椭圆形、菱形等,胞核较大,分布于整个颗粒细胞层。日龄7、14、28、60、180 d组大鼠BrdU阳性细胞数分别为158.07±5.37、141.28±7.27、116.93±9.24、76.56±6.88、41.42±4.45,随着日龄的增长,大鼠海马齿状回新生细胞数量渐减少(P<0.05);日龄7、14、28、60、180 d组大鼠BrdU阳性细胞同时表达TuJ1的比例分别为81.6.%、78.9%、83.9%、80.2%、82.4%,组间比较无明显差异(P>0.05);各组新生细胞中4%~5%为GFAP阳性。还有少数齿状回的BrdU阳性细胞并不同时表达TuJ1或GFAP。结论在生理状态下不同日龄大鼠海马齿状回存在神经细胞增殖现象,而且随着日龄增加,神经元再生的能力渐减弱,新生细胞多分化为神经元细胞。 戴园园 陈静 袁宝强 张文辉关键词:齿状回 神经发生 海马 惊厥易感大鼠生后发育过程与惊厥后脑内c-fos基因表达的初步研究 被引量:1 1995年 应用Northern杂交技术发现遗传听源惊厥易感大鼠P77PMC在出生14天后脑内c-fosmR-NA水平迅速增高,21天达到最高水平,而后逐渐下降,此与大鼠惊厥易感性形成规律相类似;惊厥后脑内c-fosmRNA具有快速、大量及一过性表达特点;惊厥前后15分钟内给予安定(10mg/kg)能有效阻断c-fos基因表达。推测c-fos基因间接地参与了P77PMC大鼠惊厥易感性的形成。 袁宝强 梁卫兰 吴希如关键词:惊厥 C-FOS 基因表达