蒲实
- 作品数：6 被引量：24H指数：2
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金沈阳市科技计划项目辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多配体蛋白聚糖4是糖尿病肾病的候选基因被引量：2
- 2012年
- 目的在2型糖尿病肾病（DN）白蛋白尿易感基因定位的基础上，进一步筛选白蛋白尿易感基因位点（UA-1）区域附近的候选基因。方法提取20周龄雄性KK／Ta（n=3）和BALB／c（n=2）小鼠肾脏总RNA，应用Affymetrix Murine GenomeU74Av2基因芯片检测肾脏基因表达谱。选择UA-1区域的差异表达基因多配体蛋白聚糖4（syndecan-4），竞争性RT-PCR验证基因芯片的结果。提取KK／Ta、BALB／c小鼠的基因组DNA，进行syndecan．4基因编码区和启动子区域的序列分析。结果在2型糖尿病KK／Ta小鼠UA-1区域附近存在着约10个差异表达基因。其中syndecan-4在20周龄KK／Ta小鼠肾脏中的表达上调，为BALB／c小鼠的26．1倍。在syndecan．4基因编码区存在2个基因多态性，分别为A93C和T216C多态性，2者均为同义突变。在syndecan-4基因启动子区域存在3个基因多态性，分别为-T263C、-T396C与-G669A多态性。TATA框位于转录起始位点上游321bp处，-T263C处恰好为转录因子Clox的结合位点。结论syndecan-4基因位于2型糖尿病UA-1附近区域，在20周龄KK／Ta小鼠肾脏中的表达明显上调，是DN的候选基因。syndecan-4启动子处的基因多态性可能为其差异表达的原因。
- 范秋灵李卅立蒲实郭佳音岳媛张玉侠冯江敏马健飞姜奕王力宁
- 关键词：糖尿病肾病多态性单核苷酸候选基因
- 坎地沙坦不同治疗时机对2型糖尿病KK/Ta小鼠肾脏血管紧张素1型和2型受体表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨坎地沙坦治疗对自发性2型糖尿病KK/Ta小鼠肾脏血管紧张素1型受体(AT1)和2型受体(AT2)表达的影响。方法:KK/Ta小鼠随机分为:非治疗组;早期治疗组:自6周龄起经口予坎地沙坦(4mg.kg-1.d-1)治疗;晚期治疗组:自12周龄起予坎地沙坦治疗,正常对照组采用BALB/c小鼠。测定尿白蛋白排泄率、血压和糖耐量,计算总肾小球面积(WGA)、肾小球丛面积(GTA),细胞外系膜基质面积(EC-MA)和肾小球内细胞核数目(NIGCN)。免疫荧光和免疫组化染色检测肾脏中AT1和AT2的表达。结果:8周龄KK/Ta小鼠尿白蛋白/尿肌酐比率显著增加[(427.49±89.37)mg/g vs.(9.54±3.25)mg/g,P<0.01],WGA、GTA、ECMA和NIGCN增多,肾小球内AT1的表达增加,AT2的表达减少。坎地沙坦治疗显著减少KK/Ta小鼠尿白蛋白/尿肌酐比率[早期治疗组(32.18±9.41)mg/g,晚期治疗组(53.20±7.26)mg/g,P<0.01],减轻肾脏病理损害,抑制AT1的表达,上调AT2的表达,早期治疗组和晚期治疗组的作用无显著性差异。结论:KK/Ta小鼠肾脏中AT1受体表达增加,AT2受体表达减少。坎地沙坦治疗能够抑制AT1受体、上调AT2受体的表达,发挥其减少白蛋白尿,减轻糖尿病肾病病理损害的肾脏保护作用。
- 范秋灵肇晓明蒲实李卅立杨刚姜奕王力宁
- 关键词：糖尿病肾病坎地沙坦血管紧张素1型受体
- 糖尿病肾病患者循环miRNA表达谱的分析被引量：15
- 2019年
- 目的通过基因芯片筛选并分析2型糖尿病肾病患者存在表达差异的miRNA。方法用TaqMan miRNA芯片检测糖尿病肾病组、糖尿病组和对照组差异性表达的miRNA,实时PCR验证其中3个差异表达的miRNA,生物信息学技术进行相关生物信息学分析。结果芯片结果显示3组血清中存在249个差异性表达的miRNA;实时PCR检测发现miR-1179呈递增式上调,miR-148b、miR-150呈递减式下调。靶基因预测软件分析显示差异表达的miRNA可能涉及多个信号转导通路的调控。结论差异性表达的miRNA可能参与糖尿病肾病的发生发展,可为进一步研究糖尿病肾病的表观遗传学机制提供依据。
- 李露露蒲实范秋灵汪旭李卅立
- 关键词：糖尿病肾病基因芯片生物标志物
- 坎地沙坦不同治疗时机对2型糖尿病KK／Ta小鼠肾脏晚期糖基化终末产物形成及其受体表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂坎地沙坦治疗对自发性2型糖尿病KK／Ta小鼠肾脏晚期糖基化终末产物形成及其受体（RAGE）表达的影响。方法KK／Ta小鼠（n=72）随机分为非治疗组（n=24）；早期治疗组（n=24）：自6周龄起经口予坎地沙坦[4mS／（kg·d）]治疗；晚期治疗组（n=24）：自12周龄起予坎地沙坦治疗。正常对照组采用BALB／c小鼠（n=24）。应用免疫荧光和免疫组化染色检测肾脏中晚期糖基化终末产物一羧甲基赖氨酸（CML）、RAGE蛋白的表达，竞争性RT-PCR检测RAGEmRNA的表达，同时测定尿白蛋白排泄率，血压和糖耐量等临床指标。结果28周龄KK／Ta小鼠尿白蛋白／尿肌酐比率显著增加[（427．494±89．37）mg／gvs（9．544±3．25）mg／g，P〈0．01]，足细胞RAGEmRNA和蛋白表达上调，CML的形成增加。坎地沙坦治疗显著减少了KK／Ta小鼠尿白蛋白／尿肌酐比率[早期治疗组（32．184±9．41）mg／g，晚期治疗组（53．204±26）mg／g，P〈0．01]，抑制肾脏RAGE mRNA和蛋白的表达，减少CML的形成，但早期治疗组和晚期治疗组的作用比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论坎地沙坦治疗通过下调糖尿病状态下肾脏RAGE的表达，阻断AGEs-RAGE的相互作用，减少AGEs的生成，发挥其降低尿白蛋白排泄率和改善肾脏病理损害的保护作用。
- 范秋灵肇晓明蒲实李卅立杨刚张丛笑姜奕王力宁
- 坎地沙坦不同治疗时机对2型糖尿病KK/Ta小鼠肾脏硝化氧化应激的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:本研究旨在探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂坎地沙坦治疗对自发性2型糖尿病KK/Ta小鼠肾内硝化氧化应激的影响及其作用机制。方法:KK/Ta小鼠随机分为(1)非治疗组;(2)早期治疗组:自6周龄起经口予坎地沙坦(4mg·kg-1·d-1)治疗;(3)晚期治疗组:自12周龄起予坎地沙坦治疗,正常对照组采用BALB/c小鼠。应用免疫组化和免疫荧光染色检测肾脏中硝化氧化应激的标志物硝基酪氨酸,诱导型(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白的表达,竞争性RT-PCR检测iNOS和eNOSmRNA的表达。同时测定尿白蛋白排泄率,血压和糖耐量等临床指标。结果:28周龄KK/Ta小鼠尿白蛋白排泄率增加,肾脏iNOSmRNA和蛋白表达上调,硝基酪氨酸的形成增加。坎地沙坦治疗减少尿白蛋白排泄率,抑制肾脏iNOSmRNA和蛋白的表达,减少硝基酪氨酸的形成,早期治疗组和晚期治疗组的作用差异无统计学意义。4组小鼠eNOSmRNA和蛋白的表达水平无差异。结论:坎地沙坦治疗通过下调糖尿病状态下肾脏iNOS的表达,抑制过氧亚硝基阴离子的形成,抑制硝化氧化应激反应,发挥其降低尿白蛋白排泄率等肾脏保护作用。
- 范秋灵蒲实李卅立董雪竹张丛笑杨刚姜奕王力宁
- 关键词：坎地沙坦过氧亚硝基阴离子诱导型一氧化氮合酶
- 坎地沙坦抑制2型糖尿病KK/Ta小鼠肾脏氧化应激反应被引量：2
- 2012年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂坎地沙坦治疗对自发性2型糖尿病KK/Ta小鼠肾脏氧化应激的影响及其作用机制。方法糖尿病KK/Ta小鼠随机分为:非治疗组;早期治疗组:自6周龄起经口给予坎地沙坦(4 mg.kg-.1d-1);晚期治疗组:自12周龄起给予坎地沙坦(4 mg.kg-1.d-1)。正常对照组采用BALB/c小鼠。应用免疫组化染色检测肾脏中DNA氧化损伤的标志物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG),免疫组化和竞争性RT-PCR检测NADPH氧化酶p47phox亚基mRNA和蛋白的表达。同时测定尿白蛋白排泄率、血压和糖耐量等临床指标。结果与同龄BALB/c小鼠比较,28周龄KK/Ta小鼠尿白蛋白排泄率增加(P<0.01),肾脏NADPH氧化酶p47phox的mRNA和蛋白表达上调(P<0.01),8-OHdG的形成增加(P<0.01)。坎地沙坦治疗减少尿白蛋白排泄率(P<0.01),抑制肾脏NADPH氧化酶p47phox mRNA和蛋白的表达(P<0.01),减少8-OHdG的形成(P<0.01),早期治疗组和晚期治疗组的作用无统计学差异(P>0.05)。结论坎地沙坦治疗通过下调糖尿病状态下肾脏NADPH氧化酶p47phox的表达,抑制氧化应激反应,延缓糖尿病肾病的进展。
- 范秋灵李卅立蒲实董雪竹张玉侠冯江敏马健飞姜奕王力宁
- 关键词：糖尿病肾病坎地沙坦氧化应激
