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董丽娟

作品数:4 被引量:6H指数:2
供职机构:南通大学附属医院更多>>
发文基金:南通市科技局社会发展科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 4篇CDX2
  • 3篇胃癌
  • 3篇细胞
  • 2篇同源
  • 2篇甲基化
  • 2篇DNA甲基化
  • 1篇氮杂
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达质粒
  • 1篇质粒
  • 1篇人胃癌
  • 1篇人胃癌细胞
  • 1篇人胃癌细胞株
  • 1篇上调
  • 1篇同源盒
  • 1篇同源异型盒基...
  • 1篇启动子
  • 1篇启动子区甲基...
  • 1篇肿瘤

机构

  • 4篇南通大学

作者

  • 4篇张健锋
  • 4篇毛振彪
  • 4篇董丽娟
  • 4篇张弘
  • 3篇蒋伟
  • 2篇丁伟峰
  • 1篇戚菁
  • 1篇周国雄
  • 1篇倪润洲
  • 1篇鞠少卿
  • 1篇蒯小玲

传媒

  • 1篇世界华人消化...
  • 1篇胃肠病学
  • 1篇江苏医药
  • 1篇南通大学学报...

年份

  • 2篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2011
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
5-氮杂-2′-脱氧胞苷诱导CDX2基因表达对人胃癌细胞株MKN45增殖和凋亡的影响
2011年
背景:DNA甲基化导致基因表达沉默是胃癌发生的重要步骤。近年发现肠表型调节因子CDX2在胃癌中具有抑癌基因的作用。目的:探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-CdR)对人胃癌细胞株MKN45中CDX2基因表达的影响及其对细胞增殖和凋亡的作用。方法:以不同浓度5-aza-CdR(2.5、5、10 Iμmol/L)处理胃癌细胞株MKN45,甲基化特异性PCR(MSP)检测CDX2启动子区甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测CDX2 mRNA和蛋白表达:CCK8法检测MKN45细胞增殖活性,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡和Hoechst 33258染色观察其凋亡形态:比色法检测caspase-3活性。结果:MKN45细胞中CDX2基因启动子区高甲基化,CDX2 mRNA表达极低且蛋白不表达:经3种浓度5-aza-CdR处理72 h后,MKN45细胞CDX2基因启动子区高甲基化发生逆转,CDX2 mRNA和蛋白表达均上调。与对照组相比,5-aza-CdR呈剂量依赖性地抑制MKN45细胞增殖和促进凋亡(P<0.05);Hoechst 33258染色示细胞核致密浓染、细胞核碎裂;caspase-3活性随着5-aza-CdR浓度的增加而升高(P<0.05)。结论:MKN45细胞中CDX2基因表达缺失可能与其启动子区CpG岛高甲基化有关;5-aza-CdR能有效逆转CDX2基因的异常甲基化,诱导其再表达.并抑制MKN45细胞增殖和促进凋亡,该作用可能与caspase-3活性有关。
张健锋蒋伟蒯小玲董丽娟张弘鞠少卿毛振彪
关键词:CDX2DNA甲基化CASPASE
上调CDX2基因表达对人胃癌SGC-7901细胞miRNA表达谱及生物学功能的影响被引量:2
2013年
目的:筛选上调尾型同源盒基因2(caudal type homeobox gene 2,CDX2)基因表达时人的胃癌细胞SGC-7901中差异表达的miRNA并预测其靶基因,并观察其对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:提取瞬时转染48 h后空载体组(转染P E G F P-N1组)和转染组(转染P E G F P-N1-C D X2组)细胞的总R N A,应用m i R N A芯片检测差异表达的miRNA,并通过Miranda、TargetScan、Mirtarget2软件预测其靶基因,通过Gene Ontology(GO)和KEGG pathway分析了解靶基因功能.CCK8法检测细胞增殖能力,划痕试验、Transwell小室、细胞黏附实验检测各组细胞体外迁移黏附能力.结果:PEGFP-N1-CDX2组较空载体组有59种差异表达的miRNA,其中25种miRNA发生2倍以上表达上调,34种miRNA发生2倍以上表达下调.通过Gene Ontology(GO)和KEGG pathway分析得到部分miRNA靶基因功能,这些靶基因参与了肿瘤的发生、发展、转移及预后.与对照组相比,PEGFP-N1-CDX2组的胃癌细胞生长、迁移和黏附能力均明显受到抑制(P<0.05).结论:上调CDX2基因表达可明显抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长,抑制其迁移黏附能力,CDX2基因的抗肿瘤作用可能与miRNA有关.
张健锋董丽娟蒋伟张弘丁伟峰周国雄毛振彪
关键词:细胞运动
PEGFP-N1-CDX2真核表达质粒的构建及其在SGC-7901细胞中的表达
2013年
目的构建尾型同源盒转录因子2(CDX2)基因真核表达质粒PEGFP-N1-CDX2,并观察其在胃癌细胞中的表达。方法采用RT-PCR技术从胃癌细胞中扩增CDX2,并将PCR产物双酶切后定向克隆入PEGFP-N1的多克隆位点,构建PEGFP-N1-CDX2重组质粒。经过双酶切及测序验证后,采用阳离子聚合物转染介导将PEGFP-N1-CDX2重组质粒转染胃癌SGC-7901细胞(C组),随后实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot检测未转染组(A组)、转染PEGFP-N1组(B组)和C组细胞CDX2的表达情况。结果重组质粒经XhoⅠ和HindⅢ双酶切和测序与CDX2基因序列一致,利用阳离子聚合物转染试剂介导将PEGFP-N1-CDX2重组质粒成功转染到胃癌SGC-7901细胞中,并获得了CDX2基因的高表达。结论成功构建PEGFP-N1-CDX2真核表达质粒,并在SGC-7901细胞内高表达。
张健锋董丽娟倪润洲张弘丁伟峰毛振彪
关键词:真核表达质粒胃癌
人胃癌细胞株CDX2基因表达与其启动子区甲基化的关系被引量:4
2012年
目的:探讨人胃癌细胞株CDX2基因表达与其启动子区甲基化的关系。方法:不同浓度5-aza-CdR处理MKN45细胞株,甲基化特异性PCR(MSP)检测用药前后CDX2启动子甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR和WesternBlot分别检测CDX2和DNMT1 mRNA和蛋白表达。结果:MKN45细胞株CDX2基因启动子区域高甲基化,CDX2 mRNA表达极低,蛋白不表达;经3种浓度5-aza-CdR处理MKN45细胞72 h后,细胞中CDX2 mRNA和蛋白表达均出现上调,而DNMT1表达出现下调。结论:CDX2基因表达下调与其启动子CpG岛高甲基化有关,DNMT1可能参与该过程的调节。
蒋伟张健锋董丽娟戚菁张弘毛振彪
关键词:胃肿瘤DNA甲基化
共1页<1>
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