范兆飞
- 作品数：8 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国科学院海洋研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 一种适于牙鲆性腺冰冻切片mRNA原位杂交的方法
- 本发明涉及mRNA原位杂交技术，具体的说是一种适于牙鲆性腺冰冻切片mRNA原位杂交的方法。将牙鲆性腺依次经过量浓度为4％PFA溶液固定和100％甲醇溶液通透，而后长期保存；固定后保存的样品经复水、20-30％蔗糖沉降后，...
- 焦爽范兆飞谭训刚尤锋
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- 一种牙鲆幼鱼性腺mRNA原位杂交的方法
- 本发明涉及幼鱼性腺mRNA原位杂交技术，具体的说是一种牙鲆幼鱼性腺mRNA原位杂交的方法。取洗涤后样品经过量浓度为4％PFA溶液固定；固定后用100％甲醇溶液于-20℃保存，将上述固定后保存样品经处理作为原位杂交样品；上...
- 焦爽范兆飞尤锋徐冬冬谭训刚
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- 一种大菱鲆同质雌核发育鱼苗的诱导方法
- 本发明涉及染色体操作技术，具体地说是一种利用遗传灭活的精子人工授精，通过静水压力抑制受精卵卵裂的原理，诱导大菱鲆同质雌核发育鱼苗的方法。选择性成熟的大菱鲆亲鱼，分别收集精液和卵，取上述精液与卵子按体积比1:100‑200...
- 吴志昊尤锋宋宗诚王丽娟范兆飞曹元水
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- 一种牙鲆幼鱼性腺mRNA原位杂交的方法
- 本发明涉及幼鱼性腺mRNA原位杂交技术，具体的说是一种牙鲆幼鱼性腺mRNA原位杂交的方法。取洗涤后样品经过量浓度为4％PFA溶液固定；固定后用100％甲醇溶液于‑20℃保存，将上述固定后保存样品经处理作为原位杂交样品；上...
- 焦爽范兆飞尤锋徐冬冬谭训刚
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- 牙鲆17β-HSD1基因克隆及其表达调控的初步研究被引量：3
- 2017年
- 17β-羟类固醇脱氢酶1(17β-HSD1)的主要作用是将雌酮(El)转化为发挥功能的雌二醇(E2)。作者从牙鲆(Paralichthys olivaceus)性腺转录组数据库获得该基因的开放阅读框(ORF)序列,对其进行了验证,并分析了该基因在高温、外源性激素处理条件下性腺分化期性腺组织中的差异表达以及c AMP和转录因子(NR5a2和NR0b1)在精巢原代细胞中对该基因表达的作用。结果显示,牙鲆17β-HSD1基因的ORF为873bp,编码290个氨基酸,与其他鱼类的有很高的相似性。半定量RT-PCR结果表明,该基因在卵巢中高表达,精巢有少量表达,并且在雌性个体的鳃、头肾、肾、脾、胃和肠中也有表达。实时定量RT-PCR结果显示,该基因在卵巢或精巢分化的关键时期表达量较高;在精巢原代培养细胞中,外源信号分子c AMP及转录因子NR5a2可以显著下调17β-HSD1基因的表达(P<0.05),且呈现剂量效应,转录因子NR0b1对该基因的调控也与剂量有关。作者推测牙鲆17β-HSD1基因在性腺分化中起一定的作用,其表达受到调控因子的作用,这些结果将有助于增加对鱼类性腺分化和发育的认识。
- 梁冬冬范兆飞范兆飞谭训刚邹玉霞焦爽谭训刚尤锋
- 一种大菱鲆同质雌核发育鱼苗的诱导方法
- 本发明涉及染色体操作技术，具体地说是一种利用遗传灭活的精子人工授精，通过静水压力抑制受精卵卵裂的原理，诱导大菱鲆同质雌核发育鱼苗的方法。选择性成熟的大菱鲆亲鱼，分别收集精液和卵，取上述精液与卵子按体积比1:100-200...
- 吴志昊尤锋宋宗诚王丽娟范兆飞曹元水
- 牙鲆Lhx1基因的克隆和表达分析被引量：1
- 2013年
- Lhx1基因对于哺乳动物卵巢缪勒氏管的形成具有重要作用,但鱼类中的报道仅限于其在体轴和肾脏形成中的作用,尚未见到其与性别及性腺发育相关的报道。本研究克隆获得了牙鲆(Paralichthys olivaceus)Lhx1a和Lhx1b开放阅读框(ORF)序列,长度分别为1224 bp和1206 bp(GenBank注册号为:JX999940、JX999941),同源序列比较显示牙鲆Lhx1a和Lhx1b基因均具有两个LIM及一个HOX结构域,符合Lhx1进化保守性。这两个基因在牙鲆雌、雄成鱼各组织RT-PCR差异表达谱不尽相同,Lhx1a在精巢中弱表达,卵巢中不表达,在其他组织中雌、雄表达谱差异不大,都只在脑和眼组织有弱表达;而Lhx1b的表达在性腺中相对较高,且卵巢的表达量高于精巢。进一步检测牙鲆Lhx1a和Lhx1b在雌、雄性腺发育各期的表达谱,发现这两个基因表达集中于Ⅲ、Ⅳ期性腺,Lhx1a在精巢中弱表达,Lhx1b卵巢中的表达明显高于精巢,而在Ⅰ、Ⅱ、Ⅱ、Ⅴ期性腺几乎均不表达。由此推断牙鲆Lhx1a和Lhx1b均为性别相关基因,但在两性性腺发育中的作用可能各有不同。
- 翁申达尤锋范兆飞文爱韵王丽娟
- 关键词：RT-PCR
- 大菱鲆周期蛋白依赖激酶基因cdk1、cdk6克隆及表达分析被引量：2
- 2016年
- 通过同源克隆以及5′/3′RACE的方法扩增得到大菱鲆(Scophthalmus maximus)细胞周期蛋白依赖激酶基因cdk1和cdk6的全长c DNA序列,在m RNA水平上分析了它们组织表达特征,并对比分析了静水压处理对其胚胎期表达的影响。结果显示,cdk1基因全长c DNA序列为1281 bp(Gen Bank登录号:KP339306),编码区为912 bp;cdk6基因c DNA全长1400 bp(Gen Bank登录号:KT186374),编码区长度为978 bp。组织RT-PCR分析表明,cdk1基因表达具有广泛性,在性腺、肾脏等生长发育较快的组织中表达量较高;cdk6基因也在多个组织中表达,在性腺中表达量最高。通过Real time RT-PCR检测基因在胚胎中的表达水平发现,静水压处理组cdk1、cdk6在胚胎发育中,总体变化趋势与对照组类似。大菱鲆胚胎对照组中cdk1在原肠期以前相对神经胚期及以后时期表达量较高,静水压处理组基因表达变化与对照组趋势相同;对照组中cdk6在原肠期出现表达高峰,但静水压处理组在原肠期表达量相对较低。静水压处理对cdk1和cdk6的表达量的影响不同,这可能与基因还有除调控细胞周期的其他功能有关。为解析这两个基因在大菱鲆胚胎发育中的作用及其机制提供了参考。
- 郭佳伟朱香萍吴志昊宋宗诚范兆飞谭训刚尤锋
- 关键词：克隆胚胎RT-PCR
