胡新华 作品数:117 被引量:432 H指数:10 供职机构: 中国医科大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省博士科研启动基金 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 自动化与计算机技术 更多>>
人肝细胞生长因子基因腺病毒重组体的构建及转染血管平滑肌细胞的表达 被引量:1 2004年 为探讨构建能表达肝细胞生长因子基因的腺病毒重组体的方法,以及这种腺病毒重组体能否在血管平滑肌细胞表达。将含有肝细胞生长因子基因片段的质粒用限制内切酶酶切,以琼脂糖凝胶电泳回收得到目的基因片段;将它用DNA连接酶插入至腺病毒穿梭质粒中,并用限制内切酶鉴别插入方向,得到插入方向正确的重组腺病毒穿梭质粒。用限制内切酶酶切重组腺病毒穿梭质粒和表达载体,使它们线性化;以电转化方法使它们共转化至BJ5183细胞中进行同源重组,构成肝细胞生长因子基因腺病毒重组体。以脂质体为转染介质,将肝细胞生长因子基因腺病毒重组体转染到人胚肾细胞中进行包装,使病毒复性具有感染能力。用包装后的肝细胞生长因子基因腺病毒重组体感染体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞;经逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测发现肝细胞生长因子呈现过表达。此外,酶切及测序发现重组腺病毒穿梭质粒和肝细胞生长因子基因腺病毒重组体是正确的;绿色荧光蛋白标记对重组体在人胚肾细胞中的包装及包装后感染大鼠主动脉平滑肌细胞进行了荧光示踪。结果提示。肝细胞生长因子基因腺病毒重组体构建成功,为血管疾病转基因治疗奠定了基础,具有一定临床价值。 冯宗承 胡新华 于彭 孙达欣 辛世杰 张强关键词:基因重组 肝细胞生长因子 腺病毒载体 同源重组 血管平滑肌细胞 绿色荧光蛋白 血糖及血脂与腹主动脉瘤腔内血栓的关系 被引量:4 2018年 目的:探讨血糖、血脂及其他临床因素与腹主动脉瘤(AAA)腔内血栓(ILT)的关系。方法:回顾性分析中国医科大学附属第一医院血管外科2014年7月—2017年10月收治的151例AAA患者资料,运用统计学方法分析与AAA中ILT的相关因素。结果:151例AAA患者中,有ILT者132例,无ILT者19例。与非ILT组比较,ILT组的男性患者比例及周围动脉疾病患者比例增高,以及甘油三酯(TG)、肌酐(Cr)、D-二聚体(D-D)水平明显升高(均P<0.05)。ILT厚度方面,男性患者ILT厚度明显高于女性,有糖尿病(DM)患者ILT厚度小于无DM患者(均P<0.05);按ILT厚度分组比较显示,薄ILT组AAA瘤径明显小于厚ILT组,DM患者比例及空腹血糖(FBG)浓度高于厚ILT组,而总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、D-D水平则低于厚ILT组(均P<0.05)。相关分析提示,ILT厚度与TC(r=0.206,P=0.018)及LDL-C(r=0.227,P=0.009)均呈正相关。结论:血脂是ILT产生和发展的重要因素,血糖及DM对ILT的影响仍然需要进一步探索。 蒋珊珊 胡新华 吴孟然 李楠 李晓东 陈康 周瑶 景云天 王鉴 张健 辛世杰关键词:血栓形成 血糖 血脂 腰疝5例临床诊治分析 被引量:2 2019年 腰疝是一种临床比较罕见的腹外疝,常见于年老消瘦的男性患者,可能由于腰背部肌肉筋膜先天发育异常、腰部外伤、腰背部手术及其他非外伤因素所致。它可以从腰上三角或腰下三角突出,以腰上三角突出为主[1]。本文对中国医科大学附属第一医院普通外科2015年1月—2017年12月收治的5例腰疝病例资料进行回顾性分析。 周瑶 陈康 李晓东 王鉴 胡新华关键词:腰疝 手术 精氨酸对大肠癌患者免疫功能的影响 被引量:1 2001年 目的 研究精氨酸 (Arg)对大肠癌患者免疫功能的影响。方法 大肠癌患者 34例 ,随机分为实验组、对照组。实验组每日静脉输注Arg2 5克、连续三天。检测外周血细胞免疫指标 [T细胞亚群 (CD+3、CD+4、CD+8)、NK细胞活性、淋巴细胞转化率 ]、红细胞免疫指标 [红细胞C3b受体花环率 (C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率 (ICR)、循环免疫复合物 (CIC) ]、体液免疫指标 (免疫球蛋白和补体 )的变化。结果 实验组CD+4、CD+4/CD+8、NK细胞活性、C3bRR均有提高 ,有统计学意义 ,尤以CD+4、NK细胞活性提高明显 (P <0 .0 1) ;淋巴细胞转化率和CIC亦有改善 ,但仅组内比较有差异 (P<0 .0 5 ) ;ICR降低 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;C3bRR变化与NK细胞活性变化之间呈正相关 (r =0 .5 80 4,P <0 .0 5 ) ,而对照组各指标均无显著变化 (P >0 .0 5 ) ;体液免疫指标无显著变化 (P >0 .0 5 )。结论 短期应用药理剂量的Arg可以改善大肠癌患者的细胞免疫、红细胞免疫功能。 胡新华 张强 王廷振 王之章 刘恩卿关键词:精氨酸 大肠癌 免疫功能 自体移植静脉中早期生长反应基因1的表达及意义 2005年 目的:研究自体静脉移植后早期生长反应基因1(Egr-1)表达的动态变化,探讨其在内膜增生(IH)中的作用。方法:W istar大鼠80只,建立自体静脉移植模型。应用原位杂交和RT-PCR方法检测Egr-1 mRNA的表达,应用W estern蛋白印迹和免疫组化方法检测Egr-1蛋白表达情况,同时进行组织形态学研究。结果:自体静脉移植后,Egr-1mRNA和Egr-1蛋白的表达具有双相变化。移植1 h,Egr-1 mRNA阳性率为(35±7)%,6 h和24 h时下降,7 d时重新升高,4周达高峰(45±6)%。移植早期2 h即有Egr-1蛋白的表达,阳性率为(30±5)%,并持续至6h,24 h^3 d表达下降,移植4周Egr-1蛋白的阳性表达率达到高峰(40±9)%。结论:Egr-1的激活及表达与自体移植静脉内膜增生关系密切,Egr-1可能成为防治移植静脉内膜增生及狭窄、闭塞的一个新的干预靶点。 刘程伟 胡新华 杨军 张雪松 王新文 辛世杰 张强关键词:早期生长反应基因1 内膜增生 早期生长反应因子-1在大鼠腹主动脉瘤中的表达 2017年 目的观察早期生长反应因子-1(Egr-1)在大鼠腹主动脉瘤发病过程中的表达情况。方法采用弹力蛋白酶灌注法制备大鼠腹主动脉瘤模型,实验组采用猪胰弹力酶灌注,对照组为正常的腹主动脉。14 d后取标本并且测量腹主动脉瘤的直径。应用实时定量聚合酶链反应(q-PCR)、Western blot方法检测动脉瘤中Egr-1 m RNA和蛋白的表达,并对数据进行分析计算。HE染色和透射电镜观察主动脉壁的形态变化来研究观察Egr-1与腹主动脉瘤之间的关系。数据均以t检验进行两组之间的差异分析。结果实验组动物模型均已达到腹主动脉瘤诊断标准(对照组:1.45±0.023,实照组:3.07±0.115,每组10只,P<0.05)。实验组组织形态学显示动脉壁结构紊乱并且有炎性细胞浸润。与对照组相比,实验组Egr-1 m RNA的表达明显高于对照组(对照组:1.00±0.098,实验组:5.74±0.710,P<0.05);Egr-1蛋白的表达明显升高(对照组:0.454±0.054 9,实验组:1.110±0.033 7,P<0.05)。结论 Egr-1在大鼠腹主动脉瘤中的表达明显高于对照组,说明Egr-1可能在介导腹主动脉瘤的形成中发挥重要作用。 王石 董海鹏 刘程伟 徐桂超 胡新华 范义川 张鸣关键词:早期生长反应因子-1 腹主动脉瘤 Q-PCR WESTERN BLOT 脾次全切除术治疗门脉高压症的实验研究 被引量:1 2007年 目的:检测门脉高压症脾次全切除术后细胞免疫、体液免疫和组织学的变化,初步评价脾次全切除术在门脉高压症中的作用。方法:建立肝硬化门脉高压症大鼠模型,大鼠腹部皮下注射60%四氯化碳(CCl4)0.3ml/100g油溶液,同时10%乙醇溶液代替饮水,测量门静脉压≥12mmHg及病理学证实模型成功。对各组进行血常规、免疫球蛋白、T淋巴细胞亚群的测定及HE染色组织学观察。结果:保留约正常脾脏大小的脾部分切除组与正常对照组术后血常规、免疫球蛋白和T淋巴细胞亚群的水平无显著性差异。保留约正常脾脏大小的脾部分切除组肝纤维化程度减轻;脾包膜变薄,脾实质轻度充血。结论:门脉高压症的残余脾脏具有一定的生理功能;保留约正常脾脏大小的脾部分切除术在一定程度上能够维持机体的体液免疫和细胞免疫。 刘程伟 胡新华 张雪松 王树卿 罗维 张强关键词:脾次全切除术 门脉高压症 核因子κB在大鼠双侧后肢缺血再灌注致肺损伤中的表达及意义 被引量:4 2004年 目的 :探讨核因子κB(NF κB)在大鼠双侧后肢缺血再灌注 (I/R )致肺损伤中的表达及意义。方法 :建立大鼠双侧后肢I/R模型 :48只大鼠随机分为假手术组 (Ⅰ组 ,n =8)、缺血组 (Ⅱ组 ,n =8)、缺血再灌注组 (Ⅲ组 ,n =3 2 )。Ⅱ组在缺血 4h末 ,Ⅲ组分别于再灌注 4,12 ,2 4,48h切取双肺 ,应用半定量RT PCR和Westernblot方法检测肺组织NF κBp65/IκBβ的mRNA和蛋白产物表达。结果 :Ⅲ组各时点NF κBp65mRNA表达较Ⅰ、Ⅱ组增加 ,再灌注后 12h达高峰。p65蛋白产物表达亦逐渐增加 ,12h达高峰 ,持续到术后 48h ;IκBβ的mRNA和蛋白表达在I/R后同样开始增加 ,2 4h的表达量最多。结论 :NF 杨军 胡新华 张强 宋方明关键词:核因子ΚB 缺血再灌注 肺损伤 细胞间粘附分子-1在自体移植静脉中表达的动态变化 被引量:7 2003年 目的 研究细胞间粘附分子 (ICAM ) 1在自体移植静脉中表达的动态变化规律 ,探讨其与内膜增生的关系及意义。方法 Wistar大鼠 5 6只 ,建立自体静脉移植模型 ,随机分为 7组 ,分别在移植后 1、3d ,1、2、4、6、8周切取移植静脉。半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)结合原位杂交定位研究移植血管中ICAM 1mRNA的表达 ,Westernblot联合免疫组织化学方法检测I CAM 1蛋白产物表达的变化。结果 ICAM 1mRNART PCR扩增见静脉移植 1~ 3d即出现表达增强 ,1~ 2周达到高峰 ,表达值分别为 ( 3 6.6± 12 .9) %和 ( 5 8.7± 11.1) % ,与其他组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ,6~ 8周逐渐恢复正常 ,与原位杂交变化趋势基本一致。免疫组织化学结果见I CAM 1在移植 1~ 7d表达明显增多 ,2~ 4周达到高峰 ,分别为 ( 2 3 .5± 7.1) %和 ( 2 0 .6± 9.2 ) % ,与其他组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ,8周恢复至正常水平 ,与Western蛋白印迹结果一致。结论ICAM 1与移植静脉内膜增生关系密切 ,可能成为防治内膜增生以及血管移植后狭窄闭塞一个新的治疗靶点。 胡新华 张强 段佩琰 王新文 辛世杰 段志泉关键词:自体移植静脉 基因表达 急性肠系膜静脉血栓形成的非手术治疗 被引量:49 2003年 目的 探讨非手术治疗急性MVT的优势以及治疗该病的最佳方案。方法 回顾 1995~ 2 0 0 2年间收治的 17例经非手术治疗的急性肠系膜静脉血栓形成 (mesentericvenousthrombosis,MVT)的诊断、治疗及预后 ,对急性MVT诊断一经确立后 ,立即采用抗凝溶栓等保守治疗 ,并严密观察 ,如有急性腹膜炎发生则随时中转手术。结果 病人全部治愈 ,治疗过程中无中转手术发生。平均住院天数为 ( 11 9± 3 7)天。2年生存率为 88 2 %。结论 早期诊断及抗凝溶栓治疗直接影响到该病的预后 ;在肠缺血尚未导致透壁性肠坏死、肠穿孔时 ,非手术治疗完全可行。 张健 王玉波 张强 罗英伟 张韬 胡新华关键词:急性 肠系膜静脉血栓形成 非手术治疗