石德时
- 作品数：109 被引量：413H指数：13
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金武汉市科技攻关计划项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生生物学更多>>
- 一种编码具有高水解活性的猪肝羧酸酯酶亚型基因
- 本发明属于动物基因工程领域，具体涉及一种编码具有高水解活性的猪肝羧酸酯酶亚型基因。从健康的大白猪的肝脏组织中分离得到一种对通用底物对硝基苯基乙酸酯(p-NPA)的水解活性比已见报道的PLE亚型都明显高的新亚型基因，该基因...
- 石德时杨路肖运才王喜亮毕丁仁肖启玲周琼琼田中元李自力刘梅
- 文献传递
- 鸡毒霉形体HS株pMGA多基因族的研究被引量：6
- 2003年
- 鸡毒霉形体 (Mycoplasma gallisepticum ,GM)基因组中存在着编码细胞表面血凝粘附素蛋白 (protein of My-coplasma gallisepticum adhesin,p MGA)相关基因组的多基因族。为筛选出含有完整的 p MGA基因片段 ,并估算出鸡毒霉形体 HS株基因组中 p MGA多基因族的基因数 ,本试验以 p UC1 8为载体 ,用 Eco R 限制性内切酶构建了鸡毒霉形体 HS株的基因组文库。根据 p MGA基因引导序列的保守区和 p MGA基因间隔区的序列 ,人工合成了 2个寡核苷酸探针 (探针 、探针 ) ,经标记后 ,双筛选所建的基因文库 ,从 6 0 0个转化子中共得到的 38个含有 p MGA基因的阳性克隆子 ,选其中 1个 7.5 kb的片段 (17号阳性克隆子 ,W17) ,用 4种限制性内切酶 (Eco R ,Hind ,Pst ,Bgl )酶切消化 ,绘制了该片段的物理图谱。该片段酶切产物经电泳、转膜后与探针 和探针 杂交 ,发现 2个探针杂交图谱基本相同 ,根据杂交带及放射信号的强度值 ,估测出该片段含有 4个 p MGA基因 ,以这个片段所含的 p MGA基因数为标准 ,估算出鸡毒霉形体 HS株含有 39个 p MGA基因。
- 翁长江毕丁仁沈青春李自力石德时许青荣刘梅程峰
- 关键词：HS株鸡毒霉形体
- 具有修复肠道功能的环境友好型猪表皮生长因子重组乳酸乳球菌
- 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及具有修复肠道功能的环境友好型猪表皮生长因子重组乳酸乳球菌。本发明以乳酸乳球菌NZ3900为宿主菌，以LacF为筛选标记，利用表达载体pNZ8149为出发载体，构建了表达猪表皮生长因...
- 石德时郭莹莹罗吉肖运才王喜亮周进
- 文献传递
- 禽流感病毒夹心ELISA诊断试剂盒的研制及应用被引量：12
- 2005年
- 将成熟的禽流感病毒(AIV)夹心ELISA快速检测方法组装成诊断试剂盒.试剂盒由1～11号试剂、一块酶标板和一份说明书组成.对试剂盒内各组份进行了特异性、敏感性、重复性及保存期的测定.结果表明,在-10℃下能保存6个月,而且特异性强、敏感性高、重复性好,操作简单、方便,能快速、准确地检测出样品中是否带有AIV抗原.先后制备了8个批次的诊断试剂盒,于湖北、安徽及河南等地的养禽场、兽医站、农科院、农业院校等化验室应用,取得了良好的效果.
- 肖运才毕丁仁李自力胡思顺许青荣石德时李永安吴仁蔚
- 关键词：禽流感病毒酶联免疫吸附试验诊断试剂盒
- 水牛瘤胃源解淀粉芽胞杆菌的筛选及其应用
- 本发明属于农业微生物应用技术领域，涉及水牛瘤胃源解淀粉芽胞杆菌的筛选及其应用。本发明与饲料添加剂制剂制备领域和反刍动物瘤胃消化开发利用领域相关。涉及一种对饲料中纤维素有降解作用的解淀粉芽胞杆菌的菌株分离鉴定、安全性评定及...
- 石德时罗吉周进肖运才杨书敏郭爱珍王喜亮李翔周祖涛
- 文献传递
- 检测磺胺类药物残留的免疫胶体金试纸条
- 本发明属于兽药残留的免疫化学速测技术领域。公开了一种用于快速检测磺胺类药物残留的胶体金试纸条，该试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬构成。PVC背衬一端依次粘附样品垫、结合垫，中间粘附硝酸纤维素膜，另...
- 毕丁仁王喜亮李奎熊宁石德时刘百红彭伏虎郝卫芳金秀娥
- 文献传递
- 一种H9亚型禽流感病毒抗体检测装置
- 本实用新型涉及病毒抗体检测装置技术领域，且公开了一种H9亚型禽流感病毒抗体检测装置，包括固定安装，所述固定安装的顶部固定连接有检测箱，所述检测箱的内部固定连接有电机，所述电机的输出轴右侧固定连接有螺纹杆，且螺纹杆的另一端...
- 王喜亮李越杨帆石德时金秀娥付咏堂
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- 金丝猴源益生粪肠球菌dlt7a的发酵工艺被引量：4
- 2017年
- 从神农架金丝猴的粪便中分离出1株益生菌株dlt7a,经鉴定为粪肠球菌。为进一步提高发酵液中dlt7a的活菌数量,对菌株dlt7a的发酵工艺进行优化。通过单因素水平试验,确定dlt7a的最佳培养条件为装液量20%(50mL/250mL),接种量2%,培养基初始pH 6.5。设计Plackett-Burman(PB)试验和响应面试验,找出发酵培养基中影响dlt7a活菌数的主要成分是蔗糖、鱼粉和KH_2PO_4,并优化3种重要成分的含量,确定最优发酵培养基配方为:蔗糖2.55%,鱼粉2.63%,豆粕2.5%,酵母膏0.4%,CaCO_3 1.0%,KCl 0.1%,MgSO_4·7H_2O 0.1%,KH_2PO_4 0.014%。在此条件下培养dlt7a菌株,活菌数可达58.83×108cfu/mL,比优化前提高了46.53%。
- 白文妹李雪梅申立泉石德时杨敬元姚辉龙兴权欧阳潮肖运才
- 关键词：金丝猴粪肠球菌发酵工艺响应面法
- 直接竞争ELISA检测氯霉素残留的方法建立及初步应用被引量：12
- 2007年
- 用混合酸酐法合成氯霉素的CAP抗原,用过碘酸钠氧化法合成CAP酶标记抗原,用ELISA方法对合成的CAP抗原、CAP酶标记抗原进行鉴定表明其与抗CAP单克隆抗体具有特异性反应。在此基础上建立了包被二抗的直接竞争ELISA方法。特异性试验结果表明,CAP琥珀酸酯、CAP琥珀酸钠盐的交叉反应率分别为107%、106.4%;甲砜霉素、氟甲砜霉素与CAP的交叉反应率小于0.016%;与其他结构类似物间未见交叉反应。该方法对CAP的检测限可达到0.1μg/L,IC50为11.6μg/L,线性范围0.1～100μg/L,批内变异系数小于11.5%,批间变异系数小于19.6%。对猪肉、鸡肉、蜂蜜分别添加1.0、3.0、10.0、30.0μg/L CAP标准品,回收率61.0%～102.0%,变异系数为6.6%～15.8%;对猪肉、鸡肉、蜂蜜中CAP的最低检测限分别为0.48、0.42、1.20μg/kg。
- 李晓云石德时王喜亮熊宁刘百红张道宏毕丁仁
- 关键词：氯霉素药物残留
- 一种鸡禽流感疫苗免疫与病毒野毒感染的胶体金免疫层析快速鉴别诊断试剂盒及应用
- 本发明属于动物免疫技术领域，具体涉及一种鸡禽流感疫苗免疫与病毒野毒感染的胶体金免疫层析快速鉴别诊断试剂盒及其应用。该试剂盒包含盒体、设在盒体内的酶标板、试纸条和样品稀释液。其中的试纸条是由样品垫、吸收垫、涂覆有金标记抗鸡...
- 毕丁仁胡思顺郑兴华王喜亮张万坡肖运才刘梅李自力石德时许青荣金秀娥
- 文献传递
