生田和良
- 作品数：10 被引量：57H指数：5
- 供职机构：大阪大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省普通高校骨干教师创新能力资助计划教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 内蒙地区发热患者血清中冠状病毒抗体的检测
- 2007年
- 目的分析内蒙地区发热患者中冠状病毒的感染情况。方法以SARS冠状病毒感染Vero细胞涂片为冠状病毒抗原片,用间接免疫荧光法分别检测55例发热患者和68例正常人血清中冠状病毒的IgG、IgM抗体。结果发热患者血清中冠状病毒IgG抗体和IgM抗体阳性率分别为29.1%(16/55)和10.9%(6/55),而正常人血清中只检测到2.9%(2/68)的IgG抗体,且未检测到IgM抗体,2组患者的IgG和IgM抗体阳性率比较差异均有显著性;随机选取7例患者的IgG阳性血清进行SRAS冠状病毒的特异性抗体封闭实验,结果有6例血清仍为阳性,有1例血清转为阴性,说明冠状病毒IgG抗体阳性血清中85.7%为普通冠状病毒特异性,14.3%为SARS冠状病毒特异性。结论普通冠状病毒是内蒙地区发热患者的主要病原体之一,部分患者还存在SARS冠状病毒的既往感染。
- 包丽丽钱钧福泉李桂梅宋武琦李小光贾丽娜生田和良张凤民
- 关键词：发热患者冠状病毒间接免疫荧光抗体
- 博尔纳病病毒自然感染状况及其核苷酸序列被引量：12
- 2004年
- 目的 探讨中国黑龙江地区正常人和马博尔纳病病毒 (BornaDiseaseVirus ,BDV)自然感染状况 ,进而比较分析中国自然感染的BDV与国外精神分裂症患者和患病马的BDV分离株及标准株He/80在种系发生中的关系。方法 用巢式RT -PCR方法检测中国黑龙江地区正常人和马匹单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcells ,PBM Cs)中BDV - p2 4基因片段 ,分别随机选取每种样本部分阳性扩增产物进行克隆测序 ,测序结果与国外精神分裂症患者和患病马的BDV分离株以及标准株He/80进行序列比较。结果 76例正常人、34匹马的标本中BDV - p2 4基因的阳性检出率分别为 9 2 % (7/76 )和 2 3 5 % (8/34)。序列分析结果表明 ,中国黑龙江地区正常人和马感染的BDV的核苷酸序列除与一个新亚型株No/98差别较大 (大于 15 % )外 ,与其他国外精神分裂症患者和马源BDV分离株同源性均大于 94 % ,与标准株He/80同源性达到 98%以上。结论 证实黑龙江地区正常人和马中存在BDV的自然感染。该地区感染的BDV与标准株He/80存在高度的同源性。
- 马培林张凤民李桂梅杨爱英李懿宏谷鸿喜生田和良
- 关键词：博尔纳病病毒巢式RT-PCR精神分裂症
- 中国慢性疲劳综合征患者血浆中BDV-p24抗体的检测被引量：19
- 2003年
- 目的检测博尔纳病病毒(BDV)对中国慢性疲劳综合征(CFS)患者和健康对照者感染的情况,探讨CFS与BDV感染之间的相关性。方法按美国CDC 1994年标准,搜集来自全国十一省市的CFS患者61例和健康对照73例,使用蛋白印迹法(WB)对其血浆进行BDV-p24抗体检测。结果 病例组有7例为阳性结果(11.48％),对照组均为阴性(0％),统计学处理两组间差异有显著意义(P<0.010)。结论中国CFS患者存在BDV感染,病例组感染率明显高于对照组,CFS与BDV感染存在相关性。
- 李永杰王得新张凤民刘占东杨爱英生田和良
- 关键词：博尔纳病病毒BDVCFS病因学
- 用巢式RT-PCR检测精神分裂症患者血液标本中博尔纳病病毒p24基因被引量：11
- 2003年
- 目的 :检测精神分裂症患者外周血单个核细胞 ( peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)标本中博尔纳病病毒 ( Borna Disease Virus,BDV) p2 4基因 ,探讨 BDV感染与精神分裂症的关系。方法 :用巢式 RT- PCR方法检测黑龙江省精神分裂症患者及正常人 PBMCs中 BDV- p2 4基因片段 ,同时扩增 β-肌动蛋白 ( β- actin)作为内参照。结果 :6 6例精神分裂症患者中 ,BDV- p2 4基因的阳性检出率为 2 8.8% ( 19/6 6 ) ;4 7例正常人中 ,BDV- p2 4基因的阳性检出率为 6 .3% ( 3/47) ,经比较两者间阳性率差异有显著性 ( P<0 .0 5 )结论 :证实中国存在 BDV感染 ,黑龙江省精神分裂症的发生可能与
- 李桂梅马培林张凤民林玉奇谷鸿喜生田和良
- 关键词：巢式RT-PCR血液标本博尔纳病病毒单个核细胞
- 博尔纳病病毒感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响被引量：3
- 2006年
- 目的分析博尔纳病病毒(BDV)感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响。方法选择病毒滴度为2·0×106FFU/ml的BDV病毒液对新生大鼠进行颅内接种,接种量为10μl/只新生大鼠。30d后用RT-PCR和间接免疫荧光方法确定BDV感染情况;并采用半定量RT-PCR方法检测BDV感染大鼠脑组织中多巴胺2(D2)受体和5-羟色胺2α(5-HT2α)受体基因的mRNA转录情况。结果病毒接种后新生大鼠的BDV感染阳性率为88·89%。病毒感染大鼠脑组织中5-HT2α受体和D2受体基因的mRNA转录水平均明显低于对照组,差异有统计学意义。结论BDV感染可以明显抑制新生大鼠脑组织中D2受体和5-HT2α受体基因的mRNA转录,提示单胺类受体基因的转录与表达参与BDV感染的致病过程。
- 董云霞李小光宋武琦李玉军李桂梅马培林生田和良张凤民
- 关键词：逆转录聚合酶链反应血清素转录
- 精神分裂症患者BDV-p24基因的扩增及其产物的测序鉴定被引量：7
- 2002年
- 目的 扩增精神分裂症患者PBMCs标本中博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)p24基因,并对基因扩增产物进行测序鉴定,分析其与标准株之间的差异。方法 用巢式RT—PCR方检测黑龙江省精神分裂症患者及正常人PBMCs中BDV-p24基因片段,对2例BDV—p24基因阳性的巢式RT-PCR产物进行测序,并与标准株比较。结果 9例精神分裂症患者中有2例BDV-p24基因阳性,7例正常人标本中未发现BDV—p24基因阳性。测序结果进一步证实扩增产物为BDV—p24基因,其序列与标准株高度同源。结论 用巢式RT—PCR方法可以特异性扩增出BDV—p24基因,扩增产物序列与标准株高度同源,提示黑龙江省的精神分裂症的发生可能与BDV感染有关。
- 李桂梅张凤民马培林杨爱英谷鸿喜温捍淑刘雪峰生田和良
- 关键词：精神分裂症测序基因扩增
- 用蛋白印迹试验检测精神分裂症患者血清中博尔纳病病毒-p24抗体的研究被引量：26
- 2003年
- 目的 探讨博尔纳病病毒 (BDV)感染在我国的流行情况及其与精神分裂症的相关性。方法 在对优化表达的GST BDV p2 4融合蛋白进行特异性鉴定的基础上 ,通过确定融合蛋白与第一抗体、第二抗体间的最佳反应条件 ,建立可行的检测BDV p2 4特异抗体的蛋白印迹 (Western blot)方法 ,进而对黑龙江地区精神分裂症患者和正常人对照血清中BDV p2 4特异性抗体进行了检测 ,并通过血清 GST蛋白吸收后Western blot实验对阳性血清进行了确认。结果 116例精神分裂症患者中检出BDV p2 4阳性血清 10例 ,阳性检出率为 8.6% ,而正常人血清标本中未检出阳性。结论 我国存在博尔纳病病毒的感染 ,博尔纳病病毒的感染可能与精神分裂症的发生有关。
- 杨爱英张凤民李均辉李桂梅马培林谷鸿喜生田和良
- 关键词：博尔纳病病毒蛋白质印迹法精神分裂症
- 博尔纳病病毒在动物中感染的研究现状被引量：1
- 2002年
- 李桂梅张凤民谷鸿喜生田和良
- 关键词：博尔纳病病毒动物
- 基于L-2细胞系检测HIV-1血清抗体的间接免疫荧光试验被引量：1
- 2004年
- 赖伟红尹跃平李永刚生田和良
- 关键词：HIV-1血清抗体间接免疫荧光试验
- 博尔纳病病毒持续感染细胞系中病毒RNA的原位PCR检测
- 2005年
- 目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)RNA的原位PCR方法。方法首先设计BDV特异性引物以及检测BDV-RNA的原位PCR扩增系统,然后对BDV持续感染细胞(BDV/OL)和正常细胞(OL细胞)爬片进行原位PCR扩增,进而分别用DNA酶或RNA酶消化处理BDV/OL细胞爬片后,再进行原位PCR扩增。结果经原位PCR扩增后,约60%～70%的BDV持续感染细胞核中出现了阳性反应信号,但正常细胞无信号出现,并且病毒感染细胞中的阳性信号在RNA酶消化作用下消失,但不受DNA酶作用的影响。结论该研究建立的PCR检测方法具有BDV和RNA特异性,可以应用于检测相关动物或神经精神疾病患者的脑组织中BDV-RNA,为进一步证明BDV的致病性奠定基础。
- 杨爱英张凤民马培林林志国刘玉芳谷鸿喜生田和良
- 关键词：博尔纳病病毒RNA酶阳性反应无信号酶作用
