王瑚
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- LncRNA H19和HIF-1α及与其相关的miRNAs在稽留流产胎盘绒毛组织中表达模式的研究被引量：3
- 2023年
- 目的 分析稽留流产患者胎盘绒毛组织中长链非编码RNA(lncRNA)H19与低氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达模式。方法 收集2013年1月至2014年12月石家庄第六医院送检的稽留流产患者胎盘绒毛组织纳入患者组(48例),并以1∶1的比例匹配收集同期正常人工流产孕妇的胎盘绒毛组织纳入对照组(48例);又依据年龄不同将每组分为4个亚组:<26岁组、26~<31岁组、31~<36岁组、≥36岁组。利用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)定量分析lncRNA H19与HIF-1α在胎盘绒毛组织中的表达变化,并分析两者是否存在调控关系;利用RNAInter、ENCORI数据库预测与lncRNA H19和HIF-1α存在互作关系的microRNAs(miRNAs),并利用qRT-PCR方法定量分析miRNAs在胎盘绒毛组织中的表达变化,综合分析lncRNA H19与HIF-1α和miRNAs间是否存在调控关系。结果 qRT-PCR检测发现,与对照组相比,稽留流产患者组胎盘绒毛组织中H19 mRNA相对表达量无显著性差异(P>0.05);但与同年龄段对照组比较,患者组胎盘绒毛组织中H19 mRNA的相对表达量在<26岁时显著降低(P<0.05),在≥36岁时显著升高(P<0.05)。与对照组相比,患者组胎盘绒毛组织中HIF-1α mRNA相对表达量显著上调(P<0.01);与同年龄段对照组比较,除了31~<36岁组外,患者组<26岁组、26~<31岁组和≥36岁组HIF-1α mRNA的相对表达量均显著上调(P<0.05)。利用RNAInter、ENCORI数据库进行基因互作预测及参考之前文献,miR-675-5p、miR-21-5p、miR-18a-5p、miR-301a-3p、miR-454-3p、miR-93-5p与lncRNA H19和HIF-1α均存在互作位点;qRT-PCR检测这些miRNAs的相对表达量,结果显示与对照组相比,除了miR-18a的相对表达量在两组间无显著性差异(P>0.05),miR-675、miR-21、miR-301a、miR-454、miR-93在稽留流产患者组胎盘绒毛组织中的表达量均显著上调(P<0.05)。与同年龄段对照组比较,稽留流产患者组中miR-454在<26岁时显著上调(P<0.01),miR-301a在<26岁与≥36岁时显�
- 肖南松宁安凤王瑚王瑚管纯一马旭夏红飞
- 关键词：稽留流产胎盘绒毛低氧诱导因子1Α微小RNAS
- 外源性全氟丁基磺酸钾暴露对小鼠植入前胚胎发育的影响
- 2022年
- 目的通过全氟丁基磺酸钾(PFBSK)急性暴露建立早期胚胎损伤模型,探讨PFBSK是否具有胚胎毒性及可能损伤的机制。方法本实验动物选取雄性10~12周龄和雌性6~8周龄的ICR小鼠,利用体外受精技术获取受精卵,并在含有PFBSK 0 mol/L(对照组)、10^(-3)mol/L、10^(-4)mol/L、10^(-5)mol/L及10^(-6)mol/L的培养基中培养受精卵,使其经历受精卵时期(1-细胞时期)、2-细胞时期、≥4-细胞时期、桑椹胚时期与囊胚时期,观察PFBSK是否对各个时期的胚胎发育率造成影响;并利用活性氧检测试剂盒和凋亡检测试剂盒分析是否存在由PFBSK引起的氧化应激损伤及细胞凋亡。结果与对照组相比,PFBSK 10^(-4)mol/L组、PFBSK 10^(-5)mol/L组和PFBSK 10^(-6)mol/L组的2-细胞率、≥4-细胞率、桑椹胚率及囊胚率均无显著性差异(P>0.05),并且胚胎发育形态良好,未见异常;而PFBSK 10^(-3)mol/L组的囊胚率与对照组相比显著下降(P<0.05),且部分胚胎停滞于桑椹胚,延长发育时期也无法使其生长至囊胚。PFBSK 10^(-3)mol/L组囊胚细胞活性氧水平显著高于对照组(P<0.05),但PFBSK 10^(-3)mol/L组的囊胚细胞凋亡平均荧光强度与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。结论PFBSK可能存在潜在的胚胎毒性,会造成早期胚胎氧化应激损伤,但并非会走向主动凋亡的结局。
- 宁安凤肖南松王瑚王瑚马旭夏红飞
- 关键词：植入前胚胎胚胎毒性
- 利用CRISPR/Cas9技术对miRNA-125a进行基因编辑的实验研究被引量：2
- 2019年
- 近年来, CRISPR/Cas9技术被迅速应用于生物学研究的各个领域。miRNA-125a已被证实与生殖密切相关,研究者在自然流产的患者中发现了异常的miRNA-125a。该研究利用CRISPR/Cas9技术在人绒毛膜滋养层细胞HTR8-S/Vneo中对miRNA-125a进行了定点编辑。对于定点敲除,我们首先在pX458表达载体的基础上额外引入一组启动子和sgRNA骨架序列用于片段敲除,此后分别设计用于单点敲除和片段敲除的sgRNA进行表达载体的构建,表达载体转染HTR8细胞后通过流式分选和T7EI酶切鉴定阳性单克隆;对于定点敲入,我们在体外构建供体载体,与CRISPR表达载体共转染HTR8细胞,通过流式分选和PCR鉴定阳性单克隆。DNA测序结果显示,敲除及敲入阳性单克隆细胞系在指定区域的碱基序列发生了改变; RT-qPCR结果显示,阳性单克隆细胞系中mi RNA-125a-5p和mi RNA-125a-3p的表达量较野生型也发生了相应变化;体外实验还显示, miRNA-125a有抑制HTR8-S/Vneo细胞系增殖及迁移的功能。研究证实, CRISPR/Cas9技术在细胞系中编辑mi RNAs是有效可行的,且对于miRNA-125a的定点敲除,片段敲除的效果要好于单点敲除。
- 王瑚王瑚马旭张璐
- 关键词：人绒毛膜滋养层细胞
- Jansen型干骺端软骨发育不良一例报告
- 1995年
- Ｊａｎｓｅｎ型干骺端软骨发育不良一例报告王瑚，余卫，赵时敏（中国医学科学院，中国协和医科大学协和医院，北京１００７３０）干骺端软骨发育不良（ｍｅｔａｐｈｙｓｅａｌｃｈｏｎｄｒｏｄｙｓｐｌａｓｉａ）为临床少见病例，其中Ｊａｎｓｅｎ型更为罕见。现将本院１...
- 王瑚余卫赵时敏
- 关键词：干骺端软骨发育不良
