张璐
- 作品数:6 被引量:9H指数:2
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- (+)-表黄皮酰胺及其类似物的对映选择性合成研究
- (-)-黄皮酰胺是已经被药理学实验证明具有较高促智活性的化合物。最近的药理学实验表明其异构体(+)-表黄皮酰胺的LTP增强效应是(-)-黄皮酰胺的2倍,暗示后者是一更具潜力的促智药物。另一方面,(-)-3-去羟基表黄皮酰...
- 张璐
- 关键词:黄皮酰胺偶联反应生物活性
- 文献传递
- 利用CRISPR/Cas9技术对miRNA-125a进行基因编辑的实验研究被引量:2
- 2019年
- 近年来, CRISPR/Cas9技术被迅速应用于生物学研究的各个领域。miRNA-125a已被证实与生殖密切相关,研究者在自然流产的患者中发现了异常的miRNA-125a。该研究利用CRISPR/Cas9技术在人绒毛膜滋养层细胞HTR8-S/Vneo中对miRNA-125a进行了定点编辑。对于定点敲除,我们首先在pX458表达载体的基础上额外引入一组启动子和sgRNA骨架序列用于片段敲除,此后分别设计用于单点敲除和片段敲除的sgRNA进行表达载体的构建,表达载体转染HTR8细胞后通过流式分选和T7EI酶切鉴定阳性单克隆;对于定点敲入,我们在体外构建供体载体,与CRISPR表达载体共转染HTR8细胞,通过流式分选和PCR鉴定阳性单克隆。DNA测序结果显示,敲除及敲入阳性单克隆细胞系在指定区域的碱基序列发生了改变; RT-qPCR结果显示,阳性单克隆细胞系中mi RNA-125a-5p和mi RNA-125a-3p的表达量较野生型也发生了相应变化;体外实验还显示, miRNA-125a有抑制HTR8-S/Vneo细胞系增殖及迁移的功能。研究证实, CRISPR/Cas9技术在细胞系中编辑mi RNAs是有效可行的,且对于miRNA-125a的定点敲除,片段敲除的效果要好于单点敲除。
- 王瑚王瑚马旭张璐
- 关键词:人绒毛膜滋养层细胞
- ER、PR、CA215在甲状腺乳头状癌中的表达及意义和甲状腺癌细胞系的建立
- 本研究包括两部分,第一部分:ER、PR、CA215在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及意义。目的:探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、CA215在PTC中的表达以及这些蛋白与肿瘤生物学特征的关系。方法:取新鲜PT...
- 张璐
- 关键词:甲状腺乳头状癌ERPR原代培养
- 文献传递
- 低氧诱导因子-3α对胎盘滋养层细胞生长的影响被引量:3
- 2021年
- 目的研究低氧诱导因子-3α(HIF-3α)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/SVneo)生物学行为的影响。方法构建人HIF-3α过表达载体(pcDNA3.1-HIF-3α),并筛选HIF-3α抑制剂(HIF-3αsiRNA)最佳靶序列;用2.5μg的pcDNA3.1-HIF-3α质粒和75 pmol/L的HIF-3αsiRNA分别转染HTR8/SVneo细胞作为转染组,同时各自设立阴性转染组。采用EdU法和MTT法检测细胞增殖和细胞活力水平;用细胞流式法检测细胞凋亡水平;并用细胞培养小室(Transwell)法检测细胞浸润和迁移的能力。结果蛋白质印迹法(Western Blot)结果表明成功构建了过表达载体pcDNA3.1-HIF-3α,并筛选到HIF-3αsiRNA#2是最佳抑制靶序列(P<0.05)。EdU实验结果显示,过表达HIF-3α使细胞的增殖显著增强(P<0.05),敲低HIF-3α则使细胞的增殖显著下降(P<0.05)。MTT法检测发现,过表达HIF-3α后细胞活力无显著差异(P>0.05);敲低HIF-3α后细胞活力显著升高(P<0.05)。细胞流式法检测发现,HIF-3α过表达有降低HTR8/SVneo细胞早期凋亡的趋势,但无显著差异(P>0.05);HIF-3α敲低后细胞凋亡无显著差异(P>0.05)。Transwell小室法检测发现,HIF-3α过表达使细胞的迁移以及浸润显著增强(P<0.05),而HIF-3α敲低后细胞的迁移以及浸润显著下降(P<0.05)。结论HIF-3α是调节HTR8/SVneo细胞增殖、迁移和浸润能力的重要因子。
- 张丹张丹张璐孙大光夏红飞
- 关键词:细胞活性
- 早期胚胎停育绒毛滋养层细胞病理学变化被引量:4
- 2020年
- 目的观察早期胚胎停育(MA)胎盘绒毛滋养层细胞的病理学变化。方法选择2011年12月至2013年12月于河北石家庄第六医院门诊就诊的260例MA患者(孕周<12周)作为研究对象(MA组),选择该院自愿行人工流产的正常早孕孕妇(孕周<12周)作为对照组,共396例。取MA组及对照组患者的胎盘绒毛组织送至北京龙迈达科技公司制成组织阵列芯片,样本按≤25岁、26~30岁、31~34岁、≥35岁年龄区间分组,每组随机挑选10对(病例及对照)进行分析。采用免疫组化法检测反映胎盘血管发生的血管内皮生长因子(VEGF)、反映滋养层细胞和间质细胞分布情况的细胞角蛋白(CK19)和波形蛋白(Vimentin)在MA组和对照组患者早孕绒毛滋养层细胞中的表达差异;通过Tunel法检测MA组和对照组患者早孕绒毛滋养层细胞的凋亡情况。结果早期MA组绒毛滋养层细胞中VEGF表达量较对照组显著降低(P<0.01),而MA组绒毛滋养层细胞中CK19及Vimentin表达与对照组无统计学差异(P>0.05));MA组绒毛滋养层细胞的凋亡指数显著高于对照组(P<0.001)。结论胎盘绒毛滋养层细胞中VEGF的低表达及细胞凋亡指数的增加与胚胎停育发生密切相关,提示胎盘血管生成减少和滋养层细胞过度凋亡是造成早期胚胎停育的部分原因。
- 朱旗董艺超张璐张璐夏红飞
- 关键词:胚胎停育VEGFCK19VIMENTIN
- 中国部分地区HIV/AIDS患者脂肪营养不良及代谢异常相关研究
- 目的:了解我国部分地区HIV/AIDS患者在现有HAART药物配伍方案下HIV-LD的发生率及其临床特点,寻找相关危险因素;探讨HIV-PLD与代谢异常的相关性,寻找HIV-LD的血浆生物标志物及早期预警因子。
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- 张璐
- 关键词:艾滋病患者脂肪营养不良代谢异常糖脂代谢紊乱
- 文献传递