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一种新的Bax异构体Baxθ促进细胞凋亡(英文): 2014年; Bcl-2蛋白家族由一类含有特征性的Bcl-2同源结构BH、且主要调控细胞死亡的蛋白组成．Bax是一个含有多个特征性BH结构域、促进凋亡的蛋白．克隆了一个全新的Bax异构体Baxθ其eDNA由外显子1，4，5，6组成．MTC表达谱分析显示Baxθ在人体各组织中广泛且不同强度的表达．将Baxθ ORF插入pEGFP-N1载体，转染HEK293细胞，观察到一个15ku的融合蛋白，提示Baxθ编码的蛋白是与Baxβ共用同一个C端，且使用一个全新的翻译起始位点．尽管Baxθ缺乏BH3结构域，但它在HEK293细胞中过表达时能促进细胞凋亡．截断体实验分析发现Baxθ第43～69位氨基酸残基可能与其促进细胞凋亡的活性有关．BH3结构域可能不是Bel-2蛋白家族诱导细胞凋亡的唯一功能区域．; 许正新王瑧瑧王然谢林俊薛京伦陈金中; 关键词：BAX 异构体细胞凋亡

Rep78与PML相互作用并抑制HSV-1的增殖（英文）: 2015年; AAV-2Rep78蛋白是涉及到病毒转录、复制和位点特异性整合的多功能蛋白,它同时还介导AAV-2与其协助病毒之间的相互作用.我们通过免疫共沉淀实验证明细胞内PML蛋白与Rep78蛋白存在相互作用,作用区域位于Rep78蛋白C末端545FPCRQCERM553位置,在细胞内短暂表达Rep78会加速PML蛋白的降解.分别使用含有ICP0的病毒株G207和ICP0突变的病毒株7134感染P5-Rep78转基因Vero细胞系,结果表明Rep78的表达会抑制G207的增殖但是对ICP0突变的7134病毒没有明显的抑制作用.结果表明Rep不仅可以介导定点整合,同时也是AAV协助病毒的负调控物.; 宋玏笙王然卢韦谢林俊王浩薛京伦陈金中; 关键词：REP蛋白

Sp100与HIV-1整合酶互作并抑制其介导的病毒整合(英文): 2013年; Sp100是核颗粒ND10的组成蛋白,在哺乳动物细胞中广泛存在.Sp100参与多种细胞生理病理过程,如转录调控、细胞内抗病毒免疫等.利用酵母双杂交系统,我们发现了Sp100的互作蛋白HIV-1整合酶,免疫共沉淀实验进一步证实了Sp100与HIV-1整合酶的互作,细胞内荧光共定位实验也证实了二者在细胞内部分共定位.此外,突变体实验表明,Sp100的C端300～480氨基酸和HIV-1的催化结构域是两个蛋白质的互作区域.利用siRNA降低细胞内Sp100的表达量,可以增加HIV-1整合酶介导的病毒的整合,反之,细胞内过表达Sp100则会降低HIV-1整合酶介导的病毒的整合.这是首次发现Sp100可以和HIV-1整合酶发生相互作用,并进而抑制病毒的整合.我们发现了Sp100作为HIV-1整合酶互作蛋白的新功能,并扩展了细胞防御病毒感染的相关研究.; 林云李智慧王然李文娟王晶晶季朝能薛京伦陈金中; 关键词：SP100 HIV-1整合酶慢病毒

D-box附近泛素化位点突变对Cdc20介导的Sp100蛋白降解的影响被引量：1: 2015年; 前期的研究发现Cdc20介导Sp100通过泛素-蛋白酶体途径降解,Sp100中的D-box在底物识别过程中具有重要作用.尽管在PML和DAXX中都存在典型的D-box序列,但是这两种蛋白都不能被Cdc20所识别.本研究中,我们构建了一系列含D-box的Sp100截断体来探讨Cdc20底物识别的必要序列.研究发现GFP-Sp100(152-182)截断体包含D-box但是不能被APC/C-Cdc20降解.GFP-Sp100(151K→G)突变潜在泛素结合位点后,Sp100降解显著受到抑制.远离D-box的潜在泛素化位点(217K,219K,225K)破坏后对Sp100降解没有影响.我们的结果表明,Sp100蛋白中D-box附近泛素化位点(151K)在Cdc20介导的蛋白降解中是必要的.; 阮婕王然李一忱沈琦薛京伦陈金中; 关键词：SP100

Cdh1介导的Sp100蛋白降解机制初探(英文): 2012年; Cdh1是后期促进因子APC复合物的共激活因子之一,其蛋白在有丝分裂末期和G0/G1期激活APC复合物.Cdh1通过识别特异性的序列,在特定的细胞周期时刻为APC复合物呈递需要被降解的底物.Sp100作为PML-NBs结构重要组成蛋白,参与抗病毒,转录调控,细胞凋亡等重要的细胞活动.在本课题组前期研究工作中,发现了Sp100的蛋白序列上含有一个典型的D-box序列,即RxxL,暗示着Sp100能够被Cdh1识别,可能是APC复合物的底物.在本实验中,证明了Cdh1参与Sp100蛋白泛素化降解的途径,并且这个过程依赖于Sp100蛋白完整的D-box结构.这些发现不仅提供了一种新的内源的Sp100蛋白调控方式,并且为进一步研究Sp100以及其他PML-NBs蛋白的调节打下基础.; 李可旼王然周彩红薛京伦季朝能陈金中; 关键词：SP100 CDH1 降解

Cdc20介导的Sp100蛋白降解机制及作用初探: Cdc20是有丝分裂后期促进因子APC/C复合物的共激活因子之一，可识别底物上的线性结构域D-box。在有丝分裂中后期，Cdc20可激活APC/C复合物，并为其呈递需要被降解的底物。Sp100作为PML-NBs结构的重要...; 王然; 关键词：细胞活动降解机制

Daxx与ΦBT1相互作用并抑制其重组活性(英文): 2013年; 噬菌体整合酶ΦBT1因其具有可介导转基因位点特异性整合的能力而成为了基因治疗中一种有效的工具,它丰富了转基因载体的选择,并使得多位点特异性整合成为可能.为了能够更加安全有效地利用ΦBT1整合酶作为基因治疗载体,有必要了解ΦBT1整合酶与宿主细胞内蛋白质相互作用的情况.酵母配对实验与免疫共沉淀实验揭示了ΦBT1整合酶中4个氨基酸433RFAL436对整合酶与PML-NBs蛋白Daxx的结合起到了关键作用.通过进一步构建并利用ΦBT1整合酶哺乳动物细胞报告系统,证实过表达Daxx会抑制ΦBT1整合酶在293T细胞中的重组效率.以上结果表明,细胞内的蛋白质可以与ΦBT1整合酶发生相互作用并抑制其重组活性,对于改善ΦBT1整合酶介导的转基因操作以及选择ΦBT1整合酶靶细胞方面具有重要的参考意义.; 王瑧瑧王然李文娟薛京伦陈金中; 关键词：DAXX

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王然