潘汉世
- 作品数:7 被引量:12H指数:2
- 供职机构:广西兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体在昆虫杆状病毒中的表达被引量:1
- 2013年
- 重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体是由一条短肽链将两个鼠源抗CD22mAb的scFv连接起来,再与人IgG1的CH3片段连接所获得重组基因工程抗体(cRFB4-CH3),是目前开发治疗B细胞系淋巴瘤的人源化基因工程抗体。为探讨该重组基因工程抗体高效表达技术,本研究利用DNA重组技术将含有人IgG1的CH3段的抗人CD22四价基因工程抗体基因克隆到含信号肽的重组杆状病毒载体pAcSG2中,构建重组质粒pAcSG2-cRFB4-CH3并转染到Sf9细胞中,构建携带有重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体基因的重组杆状病毒AcNPV-cRFB4-CH3。通过对该重组毒进行PCR和IFA鉴定,证实获得了可以稳定表达抗人CD22四价基因工程抗体的重组杆状病毒。以蚀斑试验进一步纯化病毒,经过3次病毒蚀斑克隆,获得毒价达到4.5×107pfu/mL重组病毒,为治疗白血病药物的开发和应用打下了基础。
- 马玲邵帅潘汉世陈凤莲黄红梅石胜吴健敏
- 关键词:CD22人源化基因工程抗体杆状病毒
- 半定量RT-PCR检测PERV mRNA在广西巴马小型猪不同组织中的表达
- 猪内源性反转录病毒(PERV)为反转录病毒科(Retroviridae)哺乳动物C型反转录病毒属(Mammalian Type C Retroviridae)成员,它是以前病毒DNA的形式整合进猪细胞基因组中,并随细胞染...
- 潘汉世向辉覃绍敏吴健敏
- 关键词:半定量RT-PCR基因表达
- 文献传递
- 中国特有小型猪内源性反转录病毒囊膜基因的克隆及进化分析被引量:3
- 2006年
- 目的 克隆分析中国特有小型猪来源的猪内源性反转录病毒(PERV)囊膜基因(env)。比较不同来源毒株的异同及系统进化关系。方法 应用RT-PCR的方法分别从中国实验小型猪、巴马香猪及五指山小型猪外周血淋巴细胞中扩增PERV env基因,克隆入T载体后测序;随后以PCR方法对克隆PERV env基因进行分型检测;最后采用DNAsis及DNAstar软件对克隆的env基因和国外毒株env基因进行同源性及系统进化进行分析比较。结果 本试验所克隆的3株PERV env基因长度分别为1983bp、1986bp及1968bp,分别编码661、662和656个氨基酸,分型检测均为PERV-A亚型。同源性分析表明:国内这3个分离株env基因与国外来源于不同宿主的PERV-A、B、C亚型env基因的同源性分别在92.8~96.5%、69.4~73.4%及77.5%~80.8%之间。结论 PERV中国株的进化与A、B、C亚型分类有关,与宿主、分布地域关系不大,且PERV—A亚型与C亚型的亲源关系更近于B亚型。
- 吴健敏吕茂民陈凤莲谢放潘汉世阳玉彪马玲章金刚
- 关键词:猪内源性反转录病毒囊膜基因
- 广西巴马小型猪内源性反转录病毒的检测及分子生物学特性的研究
- 猪内源性反转录病毒(PERV)为反转录病毒科(Retroviridae)哺乳动物C型反转录病毒属(Mammalian Type C Retroviridae)成员,它是以前病毒DNA的形式整合进猪细胞基因组中,并随细胞染...
- 潘汉世
- 关键词:猪内源性反转录病毒ENV基因基因克隆遗传进化树
- 文献传递
- 广西野猪猪瘟病毒感染情况的调查报告被引量:7
- 2007年
- 作者报道采用RT-PCR和ELISA方法检测猪瘟病毒在野猪身上的感染情况。采集广西5个地市28份野猪脾淋组织作病毒检测,设计针对猪瘟(classical swine fever,CSF)病毒的特异性引物CSFVE2,进行RT-PCR检测,所检样品结果全呈猪瘟阴性;同时,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测以上样品,结果也都呈阴性。这一结果初步表明所检测的广西5个地区的野猪没有感染猪瘟病毒。
- 陈凤莲马玲潘汉世黄红梅孙建华陈忠伟吴健敏
- 关键词:猪瘟病毒野猪RT-PCRELISA
- 抗CD22人源基因工程多价微型抗体在重组杆状病毒中的表达及纯化
- 探讨抗CD22人源化基因工程多价微型抗体在杆状病毒表达系统中的表达。构建含有抗CD22人源化基因工程多价微型抗体基因的重组杆状病毒表达质粒pAcSG2-CH3,并在Sf9细胞中表达。通过对表达产物进行PCR和免疫荧光反应...
- 马玲邵帅潘汉世陈凤莲黄红梅吴健敏
- 关键词:CD22重组杆状病毒蛋白表达
- 文献传递
- 广西巴马小型猪PERV-env基因克隆及其组织表达谱分析
- 2017年
- 目的克隆广西巴马小型猪PERV-env部分基因,并研究其在不同组织中的表达差异。方法利用RT-PCR方法从巴马小型猪外周血白细胞中扩增PERV-env基因,并与部分国内外已发表的PERV-env基因序列进行同源性及遗传进化分析。以扩增获得的广西巴马小型猪PERV-env基因为模板设计引物,利用半定量RT-PCR的方法对广西巴马小型猪不同组织中PERV mRNA表达情况进行分析。结果在所检测的9个组织样品中PERV mRNA相对表达水平存在差异,肾及外周血淋巴细胞中PERV mRNA丰度最高,肺、心、肝、脾、胸腺、卵巢次之,且表达丰度差异不显著(P>0.05),胰腺PERV mRNA表达丰度最低。结论以巴马小型猪胰岛细胞进行异种移植发生PERV感染的潜在危险性可能要低于其它器官,但仍需进一步研究证实。
- 钟华潘汉世马玲龙寒陈凤莲廖艳娟唐海波吴健敏
- 关键词:巴马小型猪半定量RT-PCR组织表达谱