殷黎静
- 作品数：8 被引量：8H指数：1
- 供职机构：江苏大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省公益性技术应用研究计划项目浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- Plcd1转基因小鼠的制备被引量：1
- 2013年
- 通过制备Plcd1转基因小鼠研究Plcd1基因功能.首先逆转录PCR获得约2.2kb的Plcd1基因全长,T载体克隆后测序验证;以pMD19-T-Plcd1为模板,通过设计引物及PCR扩增引入酶切位点,与pEF6/V5-His同时进行酶切、连接,构建pEF6/V5-His-Plcd1表达载体;经真核表达验证后,酶切获得目标片段,显微注射681枚受精卵,在82只仔鼠中获得转基因阳性首建鼠15只,其中13只稳定遗传并建系.PLCD1-HIS融合蛋白在睾丸组织中表达,在皮肤组织中无表达.Plcd1转基因小鼠为Plcd1功能研究奠定了基础.
- 杨伟伟殷筱舒殷黎静张艳丽李高天刘桂杰俞利平顾美儿吴宝金
- 关键词：显微注射转基因小鼠
- 慢性氟中毒对大鼠基础生长的影响及不同金属离子拮抗作用
- ：通过动物实验,研究慢性氟中毒对大鼠基础生长的影响,以及钙、镁和铝离子对慢性氟中毒的拮抗作用,为研究地氟病的分子机理及治疗提供基础数据. 方法：断奶一周的24只雄性SD大鼠,随机分成4个实验组,分别为对照组,氟添加...
- 殷黎静赵润周洁何远清
- 关键词：慢性氟中毒金属离子病理机制
- 猪细小病毒病血清抗体VP2-ELISA检测方法的建立
- 2016年
- 利用纯化的猪细小病毒VP2蛋白为抗原,建立检测猪细小病毒血清抗体的间接VP2-ELISA。最佳反应条件为:抗原包被浓度300 ng/孔,4℃过夜,待检测血清1:50稀释。与猪细小病毒病阳性血清呈阳性反应,与猪瘟、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征、猪日本脑炎和猪圆环病毒病等5种疾病的阳性血清均无交叉反应。批间、批内试验变异系数均小于10%。用该方法与Ceditest PPV猪细小病毒抗体检测试剂盒对102份血清进行平行检测和比较,间接VP2-ELISA的敏感性为93.8%,特异性为81.1%,符合率为89.2%。结果表明,猪细小病毒血清抗体间接VP2-ELISA检测方法具有较高的敏感性和特异性,且重复性好,可用于猪细小病毒感染的血清抗体检测。
- 周洁周洁南文龙何远清殷黎静任倩陈义平
- 关键词：猪细小病毒抗体
- 慢性氟中毒对大鼠基础生长的影响及金属离子的拮抗作用被引量：6
- 2013年
- 目的通过动物实验,研究慢性氟中毒对大鼠生长的影响,以及钙、镁和铝离子对慢性氟中毒的拮抗作用,为研究地氟病的分子机制及其治疗提供基础数据。方法断奶1周的24只雄性SD大鼠,随机分成4个实验组,分别为对照组、高氟组、氟+镁+铝拮抗组和氟+钙拮抗组。全群饲喂3个月,每隔两天称量大鼠体质量、摄食量和饮水量。处死前3 d,每天留取24 h尿液,测定尿氟含量。结果 1)与对照组相比,高氟组体质量增长速度明显减缓,加钙拮抗组体质量增长速度比对照组快,也比高氟组快;2)高氟组的尿氟含量高于其他组,加镁铝拮抗组和加钙拮抗组比高氟组低,但仍高于对照组;3)各组摄食量和饮水量无明显差异。结论慢性氟中毒会减缓动物个体的生长速度,而在饮水中添加镁、铝或钙离子能够起到一定的拮抗作用,钙离子拮抗作用更为明显。
- 殷黎静赵润周洁何远清
- 关键词：氟中毒拮抗作用
- 海门山羊GATA-4转录因子的表达
- 2012年
- 本试验选用2个山羊品种(海门山羊和安徽白山羊),采用实时定量PCR技术,检测了GATA-4转录因子在2个山羊品种下丘脑、肌肉、心脏、垂体、卵巢、肝、子宫、脾、肾和脑组织中的表达情况。结果显示:GATA-4转录因子在海门山羊各组织中都有表达,且在海门山羊下丘脑和垂体组织中GATA-4转录因子的表达量高于安徽白山羊。表明GATA-4在海门山羊下丘脑和垂体组织中的表达水平可能影响海门山羊的繁殖能力。
- 何远清潘晔殷黎静
- 关键词：海门山羊GATA-4
- Kit基因错义突变导致Kit^(W-2Bao)小鼠生殖腺的异常发育
- 2010年
- KitW-2Bao是本实验室培育的B6背景、呈单基因显性遗传的突变系小鼠,杂合子腹部、肢端及尾端白化,纯合子全身白化、黑眼、不育.突变纯合子小鼠生殖腺变小、结构异常、缺乏生殖细胞,杂合子雄鼠部分精曲小管内无生精细胞.通过连锁分析将突变基因定位于第5号染色距着丝粒42.8cM处,确定Kit为候选基因.RT-PCR扩增Kit全长的mRNA,经测序发现其ORF的第1228位碱基由G转换成T,这一变化导致第410位的氨基酸由V变成F,预测会引起局部二级结构发生显著变化;随后将杂合子突变小鼠互交,在基因型鉴定的基础上,通过碱性磷酸酶染色等方法追踪生殖细胞异常发育过程,发现在胚胎11.5d,突变纯合子小鼠的原始生殖细胞未出现在尿生殖嵴区,突变杂合子小鼠的原始生殖细胞显著减少;在胚胎15.5d,纯合子小鼠睾丸内精曲小管结构分化不清,无精原细胞,卵巢内无原始卵泡;杂合子小鼠精原细胞及原始卵泡数量显著减少.W-2Bao为KIT胞外区第4个Ig结构域内唯一的等位突变,是研究其功能及生殖系统发育机制的新材料.
- 吴宝金殷黎静卢增兰殷筱舒杨伟伟杨蓉亢晓冬刘桂杰尹洪萍俞利平顾美儿吴培林
- 关键词：小鼠KIT错义突变生殖腺
- 一种新的皮肤黑色素细胞及肥大细胞缺乏的小鼠模型被引量：1
- 2010年
- 目的分析Kit基因突变的W-4Bao白斑小鼠的表型特征。方法遗传试验观察突变小鼠的大体表型,多巴染色法观察黑色素细胞,甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞。结果突变基因杂合子小鼠腹部三角形白斑,肢端、尾端白化;皮肤组织内黑色素细胞及肥大细胞无明显差异。突变纯合子小鼠全身被毛白色,眼周、耳廓、背部局部被毛末端灰黑色,黑眼;皮肤组织内多巴阳性黑色素细胞、肥大细胞较对照组明显减少几近完全缺失。结论 Kit基因错义突变不仅导致了W-4Bao杂合子及纯合子小鼠黑色素细胞缺乏,同时影响了肥大细胞的发育。
- 俞利平殷筱舒金艳玲杨伟伟殷黎静杨蓉顾美儿冯永山
- 关键词：KIT基因黑色素细胞肥大细胞
- Vill转基因小鼠的制备
- 2014年
- 目的通过制备Vill转基因小鼠研究该基因的功能。方法与结果首先由RT-PCR方法获得全长约2 605 bp的Vill基因;经T载体克隆测序验证后,以克隆载体pMD19-T-Vill为模板,设计引物并引入酶切位点,将PCR扩增产物与pEF6/V5-His-LacZ同时进行酶切、连接,构建表达载体pEF6/V5His-Vill;经真核表达验证后,酶切获得含Vill基因的显微注射DNA构件;显微注射390枚受精卵后,在出生存活的77只仔鼠中获得转基因阳性G0代小鼠19只,其中16只能够稳定遗传并建系,转基因阳性小鼠外观未有明显改变。结论 Vill转基因小鼠为该基因的功能研究准备了实验材料。
- 殷黎静杨伟伟殷筱舒顾小丽张艳丽李高天郑经纬吴宝金
- 关键词：显微注射转基因小鼠
