李瑞芳
- 作品数：25 被引量：126H指数：6
- 供职机构：潍坊医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：山东省高等学校科技计划项目山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学生物学更多>>
- 微小隐孢子虫感染对小鼠肠黏膜Toll样受体的影响被引量：1
- 2018年
- 目的探讨Toll样受体在微小隐孢子虫感染致小鼠肠黏膜损伤中的作用机制。方法 30只雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、感染1周组和感染2周组。用免疫抑制及卵囊灌胃的方法建立微小隐孢子虫肠道感染小鼠模型,感染1周组和2周组分别于感染后7 d和14 d剖杀,正常对照组于感染后14 d剖杀。光镜观察小鼠肠黏膜病理变化,并测量肠绒毛高度、隐窝深度及绒毛高度/隐窝深度比值;透射电镜观察小鼠肠黏膜超微结构;实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blotting技术检测肠黏膜TLR2和TLR4表达情况。结果光镜下,感染组小鼠肠绒毛水肿,明显萎缩变短,黏膜下层结构水肿,与肌层间形成间隙。与正常对照组比较,感染1周组和感染2周组小鼠空肠绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度比值均明显降低(P均<0.05),隐窝深度明显升高(P均<0.01);且感染2周组小鼠空肠的绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度比值均明显低于感染1周组(P均<0.05),隐窝深度明显高于感染1周组(P<0.01)。透射电镜显示,感染组小鼠的空肠可见微小隐孢子虫卵囊,结构完整,卵囊周围的肠绒毛严重脱落,呈火山口状,卵囊壁与上皮细胞膜融合。qPCR结果显示,与正常对照组相比,感染1周组和感染2周组小鼠肠黏膜TLR2和TLR4 mRNA表达水平明显增高(P均<0.05);且感染2周组小鼠较感染1周组小鼠TLR2和TLR4 mRNA表达水平明显增高(P均<0.05)。Western blotting检测结果表明,感染组小鼠肠黏膜TLR2和TLR4蛋白表达量较正常对照组显著增高(P均<0.05),且感染2周组小鼠TLR2和TLR4蛋白较感染1周组小鼠的表达量明显增高(P均<0.05)。结论 TLR2和TLR4参与了肠黏膜对微小隐孢子虫的识别,感染导致的肠黏膜损伤可能与其上调TLR2和TLR4表达相关。
- 汲蕊管志玉梁瑞文尹凤玲李瑞芳
- 关键词：微小隐孢子虫TOLL样受体肠黏膜小鼠
- 抗奶牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的研制及其特性
- 本文利用IPTG诱导大肠杆菌表达牛-γ干扰素融合蛋白(GST-BovIFN-γ),经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,切取融合蛋白条带作为抗原免疫BALB/c小鼠.利用杂交瘤技术研制抗牛-γ干扰素(BovIFN-...
- 李瑞芳秦爱建许金俊
- 关键词：奶牛Γ-干扰素单克隆抗体融合蛋白
- 文献传递
- 活动性肺结核患者痰液中miR-29a的表达被引量：6
- 2012年
- miRNA是一类长度为18～25个核苷酸的单链非编码RNA分子，参与到调控细胞生长、发育、分化等各个环节，与疾病的发生、发展相关。最近的研究结果表明，miRNA分子也在微生物引起的感染和免疫应答中起重要调控作用；肺部疾病患者痰液中miRNA的表达可发生变化。我国是结核病高发国，其中，以肺结核最为常见。痰是肺泡、气管和支气管的分泌物，含有机体肺组织诸多生物过程的重要产物。本研究的目的是探讨miR-29a分子在活动性肺结核患者痰液中的表达情况。
- 伊正君付玉荣李瑞芳裴景亮张玉芝
- 关键词：肺结核患者活动性痰液RNA分子肺部疾病
- 降钙素原在结核病诊断的价值被引量：13
- 2012年
- 目的探讨血清降钙素原在结核病的鉴别诊断及疗效观察的价值。方法收集结核患者和健康对照者的血清,采用ELISA法定量检测血清中的降钙素原浓度,绘制受试者工作特征曲线判断降钙素原在结核病的诊断和疗效价值。结果结果显示,活动性肺结核组降钙素原浓度高于其他结核组和健康对照组(P<0.05),肺外结核组高于非活动性肺结核组和健康对照组(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析确定降钙素原诊断活动性肺结核的临界值为0.15ng/mL,以此为诊断临界值其敏感度、特异性分别为76.9%和81.2%。活动性肺结核患者经有效治疗后,血清降钙素原含量明显降低。结论降钙素原可作为活动性肺结核辅助诊断和治疗效果的判断指标。
- 伊正君裴景亮李瑞芳付玉荣
- 关键词：结核分枝杆菌活动性肺结核降钙素原
- 对医学本科生进行科研创新能力培养的探索和体会被引量：25
- 2015年
- 在我国医学高等院校中,传统的基础医学教学和管理模式已严重束缚了本科教学的改革和发展。目前,我国本科生参与专业科研活动并不普遍。本文围绕医学科研相关教学课程的特点和引导学生参与各类科研训练的相关措施,探讨了如何对医学生进行科研实践能力和创新精神的培养,以期提高高等医学院校的教学质量,培养更多的创新人才。
- 孙秀宁汲蕊李瑞芳管志玉胡平平陈燕春史立宏
- 关键词：本科生医学教育
- HSV-1对星形胶质细胞炎性细胞因子表达的影响
- 2014年
- 目的探讨单纯疱疹病毒1型(HSV-1)对星形胶质细胞内胞核转录因子kappa B(NF-κB)转录活性及炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)表达的影响。方法 HSV-1感染星形胶质细胞,通过ELISA,Western blot等方法检测星形胶质细胞NF-κB,TNF-α,IL-10的表达;同时研究NF-κB通路抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)对TNF-α,IL-10表达的影响。结果星形胶质细胞被HSV-1感染后,胞核内NF-κB蛋白表达明显增强,星形胶质细胞分泌的TNF-α,IL-10均上调,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。PDTC可抑制NF-κB活化,导致核内NF-κB蛋白表达下调,使得细胞分泌TNF-α,IL-10降低,与HSV-1组比较差异显著(P<0.05)。结论被HSV-1感染的星形胶质细胞通过活化NF-κB,从而上调TNF-α,IL-10的表达。
- 梁瑞文吴晓燕李瑞芳孙秀宁
- 关键词：星形胶质细胞NF-ΚB炎性细胞因子
- TLR7在结核分枝杆菌感染中的作用研究被引量：2
- 2014年
- 目的将TLR7激活基序ssRNA加入结核分枝杆菌感染的小鼠巨噬细胞,研究TLR7被激活后在结核分枝杆菌感染中的作用。方法结核分枝杆菌感染RAW264.7细胞,感染后加入化学合成的TLR7激活基序ssRNA,RT-PCR法检测感染不同时间之后细胞对细菌的吞噬率;无菌TritonX-100裂解细胞,罗氏培养基培养计数活细菌;电镜观察细胞内自噬小体;ELISA检测细胞上清中IL-12、TNF-α与IL-4的含量。结果感染3h后RAW264.7细胞吞噬率最高(P>0.05);处理3h后电镜观察,ssRNA组细胞状态明显好于对照组;36h后ssRNA组IL-12(P<0.05)、IL-4(P<0.05)水平高于对照组,细胞内活菌数量ssRNA组低于对照组(P<0.05),48h后IL-4(P<0.05)水平下降,TNF-α的含量上升(P<0.05)。结论TLR7能通过诱导细胞自噬、调节细胞因子产生等机制增强细胞杀结核分枝杆菌的能力,TLR7激活基序ssRNA可以用于治疗结核分枝杆菌感染。
- 李瑞芳管志玉付玉荣伊正君
- 关键词：小鼠巨噬细胞结核分枝杆菌
- 新型冠状病毒Nsp16蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2022年
- 目的原核表达新型冠状病毒Nsp16重组蛋白并制备兔抗Nsp16多克隆抗体。方法通过琼脂糖凝胶电泳对含有Nsp16基因的重组质粒进行双酶切鉴定,并将鉴定后的重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞;通过IPTG诱导重组蛋白的表达,利用镍柱亲和层析法纯化该重组蛋白并进行Western blot鉴定;将鉴定后的目的蛋白与弗氏佐剂以1:1的体积比混匀,乳化后免疫新西兰大白兔,利用ELISA和Western blot分别进行多克隆抗体效价的测定及其特异性鉴定。结果Nsp16基因重组质粒经双酶切后得到912bp的目的片段,重组质粒转化大肠埃希菌表达出分子质量单位为33.3ku的重组蛋白,且主要存在于上清中。用纯化的重组蛋白免疫大白兔,获得兔抗Nsp16特异性多克隆抗体,且其效价达1:409600以上。结论重组Nsp16蛋白可以在大肠埃希菌中正确表达,免疫大白兔后获得高效价抗Nsp16多克隆抗体,即具有免疫反应性。为SARS-CoV-2Nsp16蛋白在新型冠状病毒肺炎中的进一步研究奠定了基础。
- 闫硕陈柯杜昆朋郝明宇孙钰皓徐海山李瑞芳伊正君
- 关键词：新型冠状病毒原核表达多克隆抗体
- 新型冠状病毒3C样蛋白酶的原核表达及其多克隆抗体的制备
- 2022年
- 目的表达及纯化新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)3C样蛋白酶(3-chymotrypsin-like protease,3CL^(pro))并制备3CL^(pro)多克隆抗体。方法将重组质粒pET28a-Proteinase_3CL-pro转化大肠埃希菌BL21(DE3),利用IPTG诱导重组蛋白表达,超声破碎后用SDS-PAGE凝胶分析蛋白表达情况,利用Ni-NTA进行重组蛋白的纯化。用重组蛋白免疫4~8周龄健康小鼠,制备多克隆抗体,通过Western blot和ELISA对抗体进行定性和定量检测。结果重组蛋白His-3CL^(pro)在重组菌培养上清中高表达,分子质量单位为33.8 ku。制备的多克隆抗体可特异结合重组蛋白3CL^(pro),ELISA检测血清抗体效价可达1∶204800。结论在大肠埃希菌中成功表达3CL^(pro),免疫小鼠并制备高效价的鼠抗3CL^(pro)多克隆抗体,为研究3CL^(pro)功能进而开发新型冠状病毒检测试剂盒及治疗药物奠定了基础。
- 郑皖怿李瑞芳徐海山宋桃花高岩陈柯伊正君付玉荣
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 新形势下高校师资管理制度改革探究被引量：1
- 2014年
- 教师是高校不可缺少的人力资源,规范合理的师资管理制度是高校建设高水平师资队伍的基本保障,也是人才培养与科学研究顺利开展的有力保证。我国高校在师资管理方面存在学术创新缺乏、工资待遇较低、行政化严重、人才引进和流动困难、超编与缺编等严重制约高等教育事业发展的问题。针对这些问题,高校师资管理改革可通过确保学术自由、引入市场机制、提倡教授治校、尝试"非升即走"及实行"远缘杂交"等措施改变现状,对进一步完善我国高校师资管理制度,加快实现教育国际化进程有重要的实践意义。
- 管志玉李瑞芳付玉荣
- 关键词：高校师资管理
