朱德生
- 作品数：61 被引量：288H指数：9
- 供职机构：第四军医大学实验动物中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 应用微机建立实验动物全价饲料配方设计系统
- 1996年
- 本文报告，根据国外有关文献和国家科委下发的有关标准［１，２］，设计了实验动物全价饲料配方设计系统，并在ＡＳＴ４８６微机上进行了运行操作，将得出的大鼠、小鼠全价颗粒饲料配方用作手工调配进行了试制，对一级ＳＤ大鼠和昆明小鼠的饲养繁殖试验表明，其受孕率、窝产仔戮、断乳存活率和断乳体重等指标均接近或超过原饲料，该饲料于１９９５年５月通过陕西省实验动物管理委员会检测。本设计系统还可对饲料的成本进行核算，从多个配方中选出营养价值量全，成本价格最低的配方来。
- 李秦朱德生王新建刘玉林王玉清杨贵志
- 关键词：实验动物全价饲料饲养繁殖
- 表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的基因疫苗的免疫学特性
- 2005年
- 目的测定表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的两种重组质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法50只BALB/c小鼠随机分为5组(每组10只),将表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的两种重组质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF分别免疫小鼠3次,每次间隔2周,同时设卡介苗(BCG)免疫组、空载体质粒免疫组和生理盐水对照组。最后一次免疫结束后,每组取5只小鼠血清,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测特异性抗体的滴度,并分离小鼠的脾淋巴细胞,并在体外用结核分枝杆菌(MTB)培养滤液蛋白(cu lture filtrate prote in,CFP)刺激,测定脾淋巴细胞增殖指数和γ干扰素(IFN-γ)水平。用1 m l含1×105克隆形成单位(CFU)的MTB毒株H37Rv经尾静脉感染其余每组5只BALB/c小鼠,4周后计数脾脏细菌负荷数。结果质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF免疫小鼠血清的特异性抗体滴度分别为1∶1 000和1∶1 500。其脾淋巴细胞刺激指数分别为2.2和2.4,而生理盐水对照组和空载体质粒免疫组的刺激指数只有0.9和1.1;脾淋巴细胞悬液中诱发的IFN-γ分别为(5.48±0.38)ng/m l和(5.76±0.51)ng/m l,显著高于生理盐水对照组和空载体质粒免疫组(P<0.05),但与BCG免疫组的(5.55±0.31)ng/m l比较差异无统计学意义。结核毒株攻击后,与空载体质粒免疫组相比,质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF免疫的BALB/c小鼠其抗MTB在脾脏中增殖有显著作用,3组脾脏细菌负荷对数值(lg,CFU/g)分别为6.08±0.25、4.63±0.11、4.50±0.32,但不及BCG免疫组的4.09±0.27。结论表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的基因疫苗在小鼠体内诱导的IFN-γ水平与BCG相当,其保护力有待进一步提高。
- 师长宏王晓武朱德生徐志凯柏银兰薛莹
- 关键词：基因融合
- 磷酸钙骨水泥/骨形态发生蛋白复合人工骨的生物相容性被引量：28
- 2001年
- 目的 将自行合成的磷酸钙骨水泥 ( CPC)作为载体与 BMP复合成人工骨 ,检测其生物相容性 .方法 制备CPC/BMP及 CPC骨块 ,通过体外实验、细胞培养、动物实验等方法观察其毒性、免疫原性、对血液系统的影响等生物相容性指标 .结果 动物实验表明材料属无毒级 ,不含致热原 ,体外试验不引起溶血反应 ,对凝血功能无明显影响 .植入兔或小鼠肌袋内未检测出特异性抗体 .组织学检查未见免疫排斥反应 ,对肌肉无刺激作用 .对体外培养的细胞增殖没有明显抑制作用 .结论 材料有较好的生物相容性 。
- 孙明林胡蕴玉贾新斌李丹刘忠湘朱德生
- 关键词：骨形态发生蛋白磷酸钙类骨水泥生物相容性材料
- 同步化处理对熊成纤维细胞周期影响的流式细胞仪分析
- 2003年
- 刘志春李六金杨贵忠朱德生张生勇张华平
- 关键词：黑熊成纤维细胞同步化流式细胞仪
- 透明质酸酶对牛卵母细胞孤雌激活的研究被引量：9
- 2001年
- 在 37— 39℃ 5 0mL/LCO2 条件下 ,用含 80mL/L发情牛血清及 5 0mL/L犊牛血清的M 199成熟培养液培养牛的A、B级卵丘 卵母细胞复合体 (COCS) ,18— 2 2h后以无血清的TCM 199培养液洗涤 3次 ,用透明质酸酶消化吹打脱去卵丘细胞 ,以无血清的M 199培养液洗涤 3次 ,移回成熟培养液中培养。结果 ,卵细胞于成熟后第 3d开始出现卵裂 ,第 5d卵裂率达到 37% ,第 9d囊胚率达 5 %— 9%。表明透明质酸酶可以促使成熟的牛孤雌卵母细胞激活并发育至囊胚。
- 杨贵忠谢松涛白俊英朱华萍朱德生
- 关键词：卵母细胞透明质酸酶孤雌激活
- 人肝癌细胞系HCC-9724的建立及其生物学特性被引量：13
- 2000年
- 目的 建立一株肝癌细胞系 HCC- 972 4,为肝癌研究提供实验模型 .方法 无菌切除肝癌手术标本 ,6只裸鼠右后肢皮下包埋 ,体内连续传 3代后 ,取移植瘤体外培养 ,绘制细胞生长曲线 ,光镜、电镜观察细胞形态 ,并进行细胞周期和染色体核形分析 ,用免疫荧光法测定荷瘤鼠中 AFP的表达 .结果 移植模型原代获得率为 33.3% ,潜伏期为 5 2 d,自第 3代后肿瘤获得率为 10 0 .0 % ,潜伏期为 16 d,该模型移植瘤具有生长稳定 ,移植成功率高 (10 0 % ) ,潜伏期短 (10 d) ,无自发消退等特点 ,裸鼠移植瘤标本体外培养得到肝癌细胞系 HCC-972 4(简称 H) ,其形态结构 ,排列方式和移植瘤的分化程度与原发瘤保持一致 ,且遗传学特性包括染色体形态仍为人类核型 ,众数维持在 6 2～ 6 6之间 ,占 75 .0 % ,细胞周期分析 G1 期5 3.5 % ,G2 期 19.5 % ,S1 期 2 7.0 % ,细胞群体倍增时间为 2 3d,建立的裸小鼠人肝癌模型具有典型的肝细胞癌特征 ,持续分泌甲胎蛋白 (AFP) .结论 通过裸鼠体内移植瘤建立的肝癌细胞系 HCC- 972 4,与原发癌保持相同的生物学特性 ,体外连续传代 6 mo以上 ,细胞形态不变 ,生长周期恒定 。
- 师长宏施阳施新猷朱德生李六金
- 关键词：细胞培养肝细胞癌生物学特性
- 显微切割技术鉴定病毒核内包涵体被引量：5
- 2000年
- 目的 建立应用显微切割技术鉴定病毒核内包涵体的新方法 .方法 通过光学显微镜直视下用显微操纵系统进行显微切割技术结合 DNA提取和 PCR方法 ,对在组织切片上获取病毒核内包涵体的来源进行分子生物学鉴定 .结果 在福尔马林固定石蜡包埋的腮腺组织切片上根据形态学特征疑为人巨细胞病毒 (HCMV)感染的细胞 ,利用显微切割技术将核内包涵体病变与其周围染色质分离 ,从收集的包涵体得到用于 PCR扩增的 DNA模板 ,经双重 PCR扩增出预期的1 4 9bp片段 ,从而鉴定出该包涵体为 HCMV包涵体 .结论 显微切割技术可用于病毒核内包涵体的鉴定 ,为病毒包涵体病变的分子病理学研究建立了一种新的方法 .
- 闫庆国黄高升朱德生王哲
- 关键词：显微切割病毒包涵体
- 蓖麻毒素修饰物脂质体的研制及其抗肿瘤作用被引量：5
- 1997年
- 目的：为了降低蓖麻毒素（ＲＴ）的毒性，保留其抗肿瘤活性。方法：采用３－（２－吡啶二硫基）Ｎ－羟基丙酸琥珀酰亚胺酯（ＳＰＤＰ）修饰ＲＴ，用改良逆相蒸发法制备脂质体包裹ＲＴ修饰物，实验观察脂质体包裹前后ＲＴ修饰物急性毒性及体内外抗肿瘤活性。结果：脂质体包裹ＲＴ修饰物小鼠腹腔ＬＤ５０比原毒素大３．２３倍，体外对胃癌细胞（ＳＧＣ－７９０１）有较强的杀伤性，体内对Ｓ１８０实体癌的抑癌率５４．５％（Ｐ＜０．０１），能显著延长荷癌小鼠的存活期，（Ｐ＜０．０１）。结论：脂质体包裹ＲＴ修饰物的毒性较原毒素低，有较强的抗肿瘤活性，有进一步研究价值。
- 李霖邹伯英王文学朱德生
- 关键词：蓖麻毒素脂质体抗肿瘤作用
- 高低不同转移特性人骨肉瘤克隆细胞株的建立被引量：6
- 2000年
- 目的 建立高低不同转移特性的人骨肉瘤克隆细胞株 .方法 通过克隆技术和细胞电泳 ,从我们建立的骨肉瘤细胞系 L TH- OS(简称 S)中获得两株细胞 S1 和 S2 ,测定两种细胞的增殖率 ,利用软琼脂克隆形成率和裸鼠体内成瘤实验 ,比较细胞的转移特性 .结果 S1 的细胞电泳率高达 1.0 ,S2 最低为 0 .70 ,S1 的群体倍增时间为 30 .8h,S2 为 45 .0 h.克隆形成率分别为 5 .2 %和 2 .1% ,裸鼠右后肢皮下接种 S1 和 S2 发现S1 成瘤快 ,且瘤体大 ,原位接种时 S1 出现广泛的肺转移 .结论 S1 和 S2 是从
- 师长宏施新猷李六金朱德生
- 关键词：成骨肉瘤细胞克隆
- 柯萨奇B_3病毒抗体与心肌细胞结合的发病作用
- 2002年
- 目的 研究柯萨奇 B3 病毒单克隆抗体 (CVB3 - m Ab)与心肌细胞结合 ,以探讨 CVB3 - m Ab对心肌细胞的致病作用 .方法 采用细胞融合技术制备 CVB3 - m Ab,并应用各细胞株分泌的 m Ab与人、牛、大鼠心肌细胞进行免疫组化分析 ,比较各株分泌的 CVB3 - m Ab与不同种动物心肌细胞间结合的差异 .结果 利用细胞融合技术制备出 2 6种 CVB3 - m Ab.其部分 CVB3 - m Ab可与心肌细胞膜或心肌细胞内的肌原纤维结合 ,呈棕黄色环状重叠或横纹 .CVB3 - m Ab 2 A4,2 D4,1 G6,1 H9,1 H1 0 ,1 H1 1与人、牛、大鼠心肌细胞均呈阳性反应 ;CVB3 - m Ab 2 A2仅与人的心肌细胞结合 ;CVB3 - m Ab 2 B2 ,2 H4,1 C1 0 ,1 G4与人及大鼠心肌细胞结合 ;CVB3 - m Ab 2 A3与牛和大鼠心肌细胞结合 ;CVB3 - m Ab2 G1 2仅与大鼠心肌细胞结合 ;CVB3 - m Ab 1 E8仅与牛的心肌细胞结合 .且 CVB3 -m Ab2 D4与人心肌的结合为心肌细胞膜 ,而与牛及大鼠心肌的结合为心肌细胞内的肌原纤维 .结论 各 CVB3 - m Ab与不同动物心肌细胞间的结合及结合形式不同 ;且同一动物的心肌细胞与 CVB3 - m Ab结合有差异 .部分柯萨奇 B3 病毒抗体与动物心肌细胞结合 。
- 朱德生李华闫晓莉秦琳
- 关键词：柯萨奇B3病毒心肌细胞免疫组化
