- 不同RT-PCR方法学的探讨被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨微量RNA标本的RT-PCR方法。方法:采集13例新生大鼠脊髓标本,提取RNA,分别稀释至1μg/μl、1ng/μl和1 pg/μl,分别以两步法RT-PCR、Promega公司和Qiagen公司一步法RT-PCR试剂盒,扩增β-actin基因,经1.5%琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外透射仪下观察分析。结果:浓度为1μg/μl和1ng/μl的标本,三种方法均出现了目标带,而浓度为1 pg/μl的标本,两步法RT- PCR、Promega公司和Qiagen公司一步法RT-PCR试剂盒的阳性率分别为85%、77%和100%。结论:一步法敏感性高于两步法,微量RNA标本以采用Qiagen公司的一步法试剂盒进行RT-PCR实验为好。
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- 关键词：一步法RT-PCR
- 神经胶质瘤中生长抑制因子基因的表达被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨生长抑制因子4(ING4)基因在神经胶质瘤发生发展过程中的作用。方法:采用RT-PCR方法扩增34例神经胶质瘤患者手术标本和24例正常脑组织标本的ING4基因和内参照GAPDH基因,凝胶分析软件对RT-PCR产物进行半定量分析,比较ING4基因mRNA在神经胶质瘤和正常脑组织中的表达情况。结果:所有的标本均扩增出ING4基因的目的条带。神经胶质瘤中的ING4基因mRNA表达水平明显低于正常脑组织(P<0.05)。恶性度高的神经胶质瘤组明显低于低度恶性神经胶质瘤组(P<0.05)。结论:ING4基因在神经胶质瘤的发生发展过程中可能起一定的作用,且与恶性程度有一定相关性。
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- 关键词：神经胶质瘤ING4基因逆转录聚合酶链反应
