惠连
- 作品数:25 被引量:54H指数:4
- 供职机构:长春生物制品研究所更多>>
- 发文基金:“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 外源3型呼肠孤病毒污染原代地鼠肾细胞的光镜及电镜诊断被引量:3
- 2001年
- 目的 检测原代地鼠肾细胞(PHKC)是否潜伏外源呼肠孤病毒(Reov)污染。方法制备PHKC涂 片及单层细胞盖玻片进行HE及吖啶橙染色,供光镜观察;收集PHKC培养物,经冻融浓缩及超速离心,制备负染、 IEM及超薄切片样品,供电镜观察。结果光镜下在PHKC胞浆内发现具有Reov包涵体特征的核周嗜酸性包涵 体,该包涵体经吖啶橙染色后呈苹果绿色。电镜下病毒仅在胞浆内复制,形成特征性包涵体,病毒粒子均呈圆球 形,双层衣壳,无囊膜,平均直径65nm,核心平均直径38nm,常见空衣壳。病毒常散在或呈类晶格状,或聚集成堆位 于胞浆内或包涵体内。也见少数病毒粒子位于胞浆空泡内。细胞间隙也见多少不等的病毒粒子。结论光镜细 胞病理学与电镜超微结构结合观察,是检测哺乳动物原代细胞或传代细胞潜伏外源病毒污染的可靠和有效手段。
- 赵亚力孙衍庆周捷韩亮赵晓青惠连
- 关键词:电镜诊断
- 肾综合征出血热原代地鼠肾细胞灭活疫苗纯化方法的研究被引量:5
- 2002年
- 目的 建立简便、适合大规模肾综合征出血热灭活疫苗的纯化方法。方法 采用超滤浓缩、醋酸锌沉淀和柱层析(亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析)等方法,对出血热原代地鼠肾细胞灭活疫苗进行提纯对比试验。结果 用超滤浓缩和Sepharose 4FF凝胶柱层析或用醋酸锌沉淀和凝胶柱层析,纯化的疫苗均可达到质量标准,而用 cellufine sulfate gel亲和层析和离子交换层析均不理想。结论 建立了经济、适合大规模肾综合征出血热灭活疫苗的纯化方法。
- 韩亮王琪冉姝赵丽红惠连王晓宏回良杰赵健马军郝富勇王伟姜惠贤
- 关键词:肾综合征出血热病毒柱层析原代细胞地鼠肾细胞
- 肾综合征出血热Vero细胞双价纯化疫苗及其工业化生产方法
- 本发明涉及肾综合征出血热Vero细胞双价纯化疫苗及其工业化制备方法。本发明的肾综合征出血热Vero细胞双价纯化疫苗,包含有效量的肾综合征出血热灭活病毒I型和II型以及疫苗佐剂,该I型和II型病毒,分别来自PS-6(C-3...
- 韩亮赵丽红郝富勇岳立广宋宗明惠连王晓宏李彤王伟赵建张龙梅马军张伟红
- 文献传递
- 流行性出血热地鼠肾细胞双价灭活疫苗的人体观察被引量:10
- 1993年
- 为了研制一种对两型流行性出血热(EHF)均有良好预防效果的灭活疫苗,采用地鼠肾细胞(GHKC)传代适应滴度高(≥8.5logTCID50/ml)的两型EHF病毒株(家鼠型L99株及野鼠型JR株)试制出GHKC双价灭活疫苗(90-1批液体苗和90-2批冻干苗),经卫生部批准,进行了约200人的人体免疫观察。疫苗用福尔马林灭话,加AI(OH)_3佐剂。共免疫242人,其中206人免疫前血清抗体反应阴性。全部接种者除极少数有轻、中度反应,余均无不良反应。两批疫苗接种后,IFA抗体阳转率分别为95.9%及89.2%,ELISA抗体分别为93.5%及91.8%。抽样检查中和抗体反应(每批疫苗30人),用酶斑减少中和试验(EFRNT)检查,两批疫苗对L99株病毒中和抗体阳转率均为100%;对JR株抗体阳转率分别为88.2%及66.7%。每个接种者免前及第一针疫苗接种后56,180,360天血清同时用ELISA法检查抗体,并抽样(每批疫苗30例)检查中和抗体,发现两种抗体的阳性率有逐渐降低的动态变化。两批疫苗三种免疫程序(0,7,28天,0,28,42天及0,28天)接种者的免疫反应基本相似,仅0,28天接种者的抗体水平稍低。对68例接种者于免疫后1年用同一疫苗(90-2批)加强免疫一次,其ELISA及中和抗体均显著升高。试用淋巴细胞转化试验检查20人按种后细胞免疫反应。
- 宋干黄永成杭长寿李淑兰刘为民傅增武李德新郝富勇霍子威惠连张全福回良杰詹发先王伟石晓宏郑晓丽林静王晓宏王琪
- 关键词:流行性出血热地鼠肾细胞疫苗
- 流行性出血热(EHF)地鼠肾细胞(GHKC)灭活疫苗的初步人体观察被引量:20
- 1991年
- 用流行性出血热(EHF)病毒L99株(家鼠型)感染金黄地鼠肾细胞(GHKC),经福尔马林(0.025%)灭活制备EHF灭活疫苗(88-17批),经检定批准,肌肉(1ml)接种志愿者12人(IO人于0、7、28天,2人分别于0、7天及0、28天各一针),进行了安全性及抗体反应的初步人体观察。结果显示,此种疫苗对人体接种无明显不良反应。接种后,12名接种者IFA、ELI-SA及中和抗体(EFRNT)全部阳转,180天和360天后仍分别有10人血清中和抗体阳性。初步表明,此疫苗是安全的,可以有效诱导抗体产生,其中和抗体多数可持续一年以上。
- 宋干黄永成杭长寿郝富勇李德新郑晓丽刘为民惠连梁米芳回良杰霍子威李淑兰张全福王晓宏傅增武王伟
- 关键词:流行性出血热地鼠肾细胞灭活疫苗
- 双价肾综合征出血热纯化疫苗的研究被引量:3
- 2004年
- 目的 研制包含Ⅰ型和Ⅱ型病毒抗原的肾综合征出血热纯化疫苗 ,以提高疫苗质量及临床应用效果。方法 用金黄地鼠肾细胞培养的PS 6株 (Ⅰ型 )病毒和L99株 (Ⅱ型 )病毒以体积比 1∶1的比例配制成双价疫苗 ,经醋酸锌沉淀、超滤浓缩、Sepharose 4FF柱层析制备成双价纯化疫苗。结果 双价纯化疫苗经中国药品生物制品检定所检测 ,各项指标全部合格。疫苗于 37℃放置 2周和 4℃放置 3年 ,效力试验均合格。临床观察血清中和抗体阳转率大于 85 % ,仅出现 0 .5 %的轻反应。结论 研制的出血热双价纯化疫苗 ,各项质量指标均符合《双价肾综合征出血热纯化疫苗试行规程》的要求 。
- 韩亮惠连王晓宏赵丽红王琪岳立广冉姝郝富勇王伟赵建马军李彤柳梅张连忠
- 关键词:肾综合征出血热病毒抗原纯化疫苗质量指标
- 森林脑炎纯化疫苗的研究被引量:11
- 2002年
- 目的 制备森林脑炎纯化疫苗。方法 将森林脑炎病毒感染地鼠肾单层细胞,收获病毒液,经超滤浓缩、柱层析纯化病毒后配制而成。结果 疫苗兔疫保护力指数均≥1 .0 ×106,杂蛋白去除率≥99%,小牛血清蛋白去除率>99%,所有检测项目全部合格。结论 该纯化工艺制备的森林脑炎纯化疫苗抗原含量高,热稳定性好,免疫原性强,各项检测结果均符合2000年版《中国生物制品规程》标准。
- 宋宗明韩亮郭新洪成龙赵红丽宋建军刘双军钱依群王全冉姝岳立广惠连崔文广
- 关键词:森林脑炎病毒柱层析纯化疫苗
- 应用金黄地鼠肾原代细胞生产流行性出血热灭活疫苗
- 本发明提供了应用金黄地鼠肾原代细胞生产流行性出血热灭活疫苗的方法,其中涉及应用金黄地鼠肾细胞为培养病毒的细胞基质,特别是涉及以适应于金黄地鼠肾细胞的流行性出血热病毒的细胞适应株为毒种,生产Ⅰ型、Ⅱ型和双价疫苗及对疫苗浓缩...
- 黄永成李淑兰郝富勇郑晓丽惠连王伟回良杰付增武王晓宏王琪韩亮
- 文献传递
- 森林脑炎纯化疫苗
- 本发明涉及一种灭活森林脑炎病毒纯化疫苗以及其制备方法,特别是工业化制备方法。该疫苗包含有效量的灭活森林脑炎病毒和疫苗佐剂。用本发明的森“张”株P<Sub>9-3</Sub>病毒接种细胞,收获的病毒液经纯化手段除去大部分杂...
- 宋宗明韩亮郭新洪成龙赵红丽宋建军刘双军钱依群王全冉姝岳立广惠连
- 文献传递
- 肾综合征出血热地鼠肾细胞灭活疫苗(Ⅱ型)稳定性的研究
- 1999年
- 采用空斑减少中和试验(PRNT)检测疫苗效力的方法,对肾综合征出血热地鼠肾细胞灭活疫苗(Ⅱ型)进行了系统地稳定性试验研究。结果表明,疫苗置37℃3 天,室温3 周,2~8℃保存一年、一年半、两年和两年半。效力试验检测结果均达到合格标准,证明疫苗稳定性良好。
- 韩亮惠连王晓宇回良杰
- 关键词:肾综合征出血热稳定性