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流行性出血热(EHF)地鼠肾细胞(GHKC)灭活疫苗的初步人体观察被引量：20: 1991年; 用流行性出血热(EHF)病毒L99株(家鼠型)感染金黄地鼠肾细胞(GHKC),经福尔马林(0.025％)灭活制备EHF灭活疫苗(88-17批),经检定批准,肌肉(1ml)接种志愿者12人(IO人于0、7、28天,2人分别于0、7天及0、28天各一针),进行了安全性及抗体反应的初步人体观察。结果显示,此种疫苗对人体接种无明显不良反应。接种后,12名接种者IFA、ELI-SA及中和抗体(EFRNT)全部阳转,180天和360天后仍分别有10人血清中和抗体阳性。初步表明,此疫苗是安全的,可以有效诱导抗体产生,其中和抗体多数可持续一年以上。; 宋干黄永成杭长寿郝富勇李德新郑晓丽刘为民惠连梁米芳回良杰霍子威李淑兰张全福王晓宏傅增武王伟; 关键词：流行性出血热地鼠肾细胞灭活疫苗

应用逆转录酶链反应对我国流行性出血热病毒分型被引量：1: 2003年; 针对我国流行性出血热病毒的S片段核蛋白 (NP)编码基因保守核苷酸序列 ,合成了一对引物 ,扩增出编码核蛋白的 5 90bp碱基。扩增的II型产物存在限制性内切酶PstI的酶切位点 ,而I型产物不存在。因此 ,用酶切扩增产物的方法达到病毒分型的目的。试验提取 8份鼠脑传代毒种 ,1份细胞培养物和 2 5份病人血清中的出血热病毒RNA ,同时做 6份正常人血清对照 ,经逆转录PCR酶切分型。试验结果同间接免疫荧光技术 (IFA)分型结果相一致 ,可特异地对我国流行性出血热病毒进行分型。; 王玉梅郝富勇张雪梅韩亮盛军; 关键词：流行性出血热病毒间接免疫荧光

肾综合征出血热双价灭活疫苗的研究: 2002年; 为研制包含Ⅰ型和Ⅱ型病毒抗原的肾综合征出血热双价灭活疫苗 ,以适合全国各出血热疫区使用。通过空斑克隆和终末稀释传代的方法选育了 2株出血热I型病毒PS 6和JR C 1。用金黄地鼠肾细胞培养的L99株(Ⅱ型 )病毒疫苗 ,PS 6株病毒疫苗和JR C 1株病毒疫苗以 2∶1∶1的配伍方式试制三批双价疫苗。结果试制的三批双价疫苗自检和中国药品生物制品检定所复检 ,各项指标全部合格。疫苗于室温放置 3周 ,3 7℃放置 2周和 4℃放置 1年、1 5年和 2年 ,效力试验均合格。研制的三批出血热双价疫苗 ,符合《肾综合症出血热灭活疫苗 (双价 )试行规程》的要求。; 韩亮王晓宏惠连郝富勇赵丽红王伟赵建柳梅姜慧贤于学洁回良杰孙俊峰; 关键词：肾综合征出血热汉坦病毒双价灭活疫苗

流行性出血热病毒L99株(家鼠型)与国内外其它毒株抗原性的比较被引量：12: 1995年; 流行性出血热家鼠型（Ⅱ型）病毒L99株分别在小白鼠脑腔和金黄地鼠肾细胞传代适应，再初步纯化，所选出的毒株具有广谱抗原性和较高的毒力滴度。应用鼠脑或细胞毒种感染金黄地鼠肾细胞制成灭活疫苗免疫动物，检测血清中和抗体反应及对野鼠型（Ⅰ型）和家鼠型（Ⅱ型）强毒攻击的保护力，均证明L99疫苗有双向的免疫效果。L99活毒免疫动物血清与不同来源的Ⅰ、Ⅱ型病毒交叉中和反应亦证明L99株对两型病毒有明显的交叉反应，表明L99株病毒对两型病毒具有双向抗原性。; 郝富勇王晓宏回良杰黄永成黄雪芬李德新杭长寿宋干; 关键词：流行性出血热病毒抗原性疫苗

肾综合征出血热原代地鼠肾细胞灭活疫苗纯化方法的研究被引量：5: 2002年; 目的建立简便、适合大规模肾综合征出血热灭活疫苗的纯化方法。方法采用超滤浓缩、醋酸锌沉淀和柱层析（亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析）等方法，对出血热原代地鼠肾细胞灭活疫苗进行提纯对比试验。结果用超滤浓缩和Sepharose 4FF凝胶柱层析或用醋酸锌沉淀和凝胶柱层析，纯化的疫苗均可达到质量标准，而用 cellufine sulfate gel亲和层析和离子交换层析均不理想。结论建立了经济、适合大规模肾综合征出血热灭活疫苗的纯化方法。; 韩亮王琪冉姝赵丽红惠连王晓宏回良杰赵健马军郝富勇王伟姜惠贤; 关键词：肾综合征出血热病毒柱层析原代细胞地鼠肾细胞

肾综合征出血热Vero细胞双价纯化疫苗及其工业化生产方法: 本发明涉及肾综合征出血热Vero细胞双价纯化疫苗及其工业化制备方法。本发明的肾综合征出血热Vero细胞双价纯化疫苗，包含有效量的肾综合征出血热灭活病毒I型和II型以及疫苗佐剂，该I型和II型病毒，分别来自PS－6(C－3...; 韩亮赵丽红郝富勇岳立广宋宗明惠连王晓宏李彤王伟赵建张龙梅马军张伟红; 文献传递

纤维连接蛋白(FN)对CHO-C28细胞生长的影响被引量：6: 2009年; 纤维连接蛋白(FN)最重要的功能是促进细胞的粘连、生长,因而对传代细胞的贴壁、增殖具有重要意义。试验通过观察不同含有FN的培养液对CHO-C28细胞的贴壁、集落形成、细胞增长速度的不同作用,比较FN对CHO-C28细胞的影响,同时对比进口与国产FN之间的区别。证明FN对克隆形成及细胞增殖有明显的促进作用,进口FN组和国产FN组无明显区别。; 王宇吴学军谷丽娟于漫伦赵小琳郝富勇付琳娜王德亮胡太梅; 关键词：纤维连接蛋白 CHO-C28细胞克隆增殖

流行性出血热地鼠肾细胞双价灭活疫苗的人体观察被引量：10: 1993年; 为了研制一种对两型流行性出血热(EHF)均有良好预防效果的灭活疫苗,采用地鼠肾细胞(GHKC)传代适应滴度高(≥8.5logTCID50/ml)的两型EHF病毒株(家鼠型L99株及野鼠型JR株)试制出GHKC双价灭活疫苗(90-1批液体苗和90-2批冻干苗),经卫生部批准,进行了约200人的人体免疫观察。疫苗用福尔马林灭话,加AI(OH)_3佐剂。共免疫242人,其中206人免疫前血清抗体反应阴性。全部接种者除极少数有轻、中度反应,余均无不良反应。两批疫苗接种后,IFA抗体阳转率分别为95.9％及89.2％,ELISA抗体分别为93.5％及91.8％。抽样检查中和抗体反应(每批疫苗30人),用酶斑减少中和试验(EFRNT)检查,两批疫苗对L99株病毒中和抗体阳转率均为100％;对JR株抗体阳转率分别为88.2％及66.7％。每个接种者免前及第一针疫苗接种后56,180,360天血清同时用ELISA法检查抗体,并抽样(每批疫苗30例)检查中和抗体,发现两种抗体的阳性率有逐渐降低的动态变化。两批疫苗三种免疫程序(0,7,28天,0,28,42天及0,28天)接种者的免疫反应基本相似,仅0,28天接种者的抗体水平稍低。对68例接种者于免疫后1年用同一疫苗(90-2批)加强免疫一次,其ELISA及中和抗体均显著升高。试用淋巴细胞转化试验检查20人按种后细胞免疫反应。; 宋干黄永成杭长寿李淑兰刘为民傅增武李德新郝富勇霍子威惠连张全福回良杰詹发先王伟石晓宏郑晓丽林静王晓宏王琪; 关键词：流行性出血热地鼠肾细胞疫苗

应用金黄地鼠进行流行性出血热灭活疫苗效力试验的研究被引量：1: 1996年; 以流行性出血热灭活疫苗原苗或稀释苗免疫地鼠，首针免疫后4周用野鼠型病毒A537株或家鼠型病毒L99株攻击，攻击后第7天取肺和脾以IFA检查EHF病毒抗原。所检测的3批疫苗均具有较好的保护效果，并有一定的规律性。表明该动物敏感，可作为流行性出血热疫苗效力试验的动物模型。; 郝富勇回良杰赵晓琳王晓宏韩亮黄永成; 关键词：流行性出血热灭活疫苗效力试验

毕赤酵母表达乙型肝炎病毒preS2S蛋白的纯化和免疫效果被引量：1: 2007年; 目的研究重组毕赤酵母表达的乙型肝炎病毒preS2S蛋白的纯化方法及免疫效果。方法甲醇诱导含preS2S基因的重组毕赤酵母菌,采用蔗糖区带速率离心、Butyl-S-Sepharose 4FF疏水层析和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析等方法,对表达产物进行纯化。纯化后蛋白经SDS-PAGE和Western blot方法鉴定,制备成疫苗,并进行效力试验。放射免疫法检测免疫小鼠血清抗体浓度,计算ED50和相对效力。ELISA法检测血清中的preS2S抗体。结果纯化后的preS2(epi)S蛋白相对分子质量约为27000,且能与特异性抗体结合。两批纯化蛋白制备的疫苗ED50分别为0.35和0.48μg/ml,参比苗为0.52μg/ml。2批疫苗的体外相对效力分别为1.5和1.1,均合格,血清抗体平均浓度为808和784mIU/ml,参比苗为312mIU/ml。2批疫苗免疫小鼠后均产生了preS2抗体。结论该纯化方法实用有效,纯化后的preS2(epi)S蛋白比S蛋白具有更好的免疫原性。; 李利金立杰赵小琳杨屹刘岩松董厉子郝富勇李建平; 关键词：乙型肝炎病毒 PRES2蛋白 S蛋白纯化免疫效果

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郝富勇

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