徐飞龙
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：深圳大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pH值和酶作用对鲩鱼过敏原免疫学活性的影响研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究pH值、胃蛋白酶和胰蛋白酶作用对鲩鱼过敏原免疫学活性的影响。方法采用不同Coca's液提取制备鲩鱼总蛋白,以鲩鱼过敏患者阳性血清为一抗用Western Blotting方法分析pH值、胃蛋白酶和胰蛋白酶以及多因素多重作用对鲩鱼过敏原免疫学特性的影响。结果HCl溶液、胃蛋白酶溶液、胰蛋白酶溶液以及多种因素的多重作用对鲩鱼蛋白均有不同程度的降解作用,且均可以显著降低鲩鱼过敏原的免疫学活性,但一些蛋白具有很高的稳定性,如M_r为35 000和23 000的蛋白。受制备过程的影响,鲩鱼蛋白中出现新的阳性过敏原条带,如M_r为27 000和20 000的阳性过敏原条带(pH 1.0 HCl溶液)。结论鲩鱼含有稳定性较高的潜在过敏原,该类潜在过敏原对热、酸、酶解等作用均有很强的耐受性。
- 吴海强徐飞龙王晓娟刘志刚
- 关键词：鲩鱼PH值胃蛋白酶免疫学特性
- rBla g2变应原的PEG修饰与免疫学特性分析
- 2008年
- 目的研究化学修饰剂聚乙二醇（PEG）对德国小蠊（蟑螂）重组变应原rBlag2变应原性的影响。方法rBlag2在大肠肝菌中表达后，采用Ni^＋亲和层析纯化，然后甲氧基聚乙二醇2．N-羟基琥珀酰亚胺酯（mPEG2-NHS，Mr为10×10^3）修饰，经阳离子交换层析纯化，用SDS．PAGE、免疫印迹及ELISA分析其生物学特性。结果rBlag2纯化后的相对分子质量（肘，）约39×10^3；SDS-PAGE分析PEG-rBlag2修饰产物，考马斯亮蓝染色可呈现5条带，而I2-KI染色则呈现7条带。对修饰产物的纯化表明阳离子交换层析可分离rBlag2和PEG-rBlag2；对修饰产物的免疫印迹分析显示恤为100×10^3和130×10^3的修饰带可与蟑螂过敏患者血清特异性IgE结合，同时ELISA分析结果表明PEG-rBlag2复合物的体外免疫学反应性显著下降，仅为原来的42％。结论PEG修饰可保持rBlag2与特异性抗体结合能力，却大大降低变应原的体外免疫学反应性，为重组低致敏原的研究提供了基础资料。
- 徐飞龙吴海强刘志刚冉丕鑫钟南山
- 关键词：变应原PEG修饰免疫印迹ELISA
- 生熟鲩鱼过敏原粗浸液总蛋白不同毛细管电泳方法的分析被引量：4
- 2008年
- 目的研究毛细管电泳在生熟鲩鱼食品过敏原粗浸液分析中的应用。方法未涂层熔硅毛细管65cm(有效长度50cm)×75μm;选择醋酸溶液(pH2.5)和硼酸缓冲液(pH9.5)作为毛细管区带电泳(CZE)的运行缓冲液,另外选择Tris-H3PO4/SDS缓冲液(pH8.7)作为毛细管束胶电动色谱(MECC)的运行缓冲液,分别对鲩鱼在生熟状态下的总蛋白提取物进行毛细管电泳,并与其十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳进行比较。结果三种不同缓冲液的电泳方法均能用于生熟鲩鱼总蛋白的分析,而且Tris-H3PO4/SDS缓冲液(pH8.7)的效果最好、检测峰最多(生鲩鱼14个,熟鲩鱼13个),接近SDS-PAGE蛋白区带总数(生鲩鱼17条,熟鲩鱼15条)。结论毛细管电泳可以用于生熟鱼类食品过敏原粗浸液的分析。
- 徐飞龙吴海强刘志刚戈早川
- 关键词：鲩鱼总蛋白毛细管电泳
- 不同温度下鱼类食品过敏原免疫学特性分析被引量：7
- 2006年
- 目的研究鱼类食品在生熟状态下的过敏原组分,分析其热稳定性过敏原。方法4种新鲜鱼类经不同温度处理后去鳞、内脏和鱼骨,在预冷丙酮中破碎,脱脂,Coca’s液提取其生熟总蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,考马斯亮蓝显色分析其总蛋白组成,用鱼过敏患者血清对不同温度条件下的鲩鱼总蛋白进行免疫学特征分析。结果SDS-PAGE显示,生熟鱼总蛋白提取物中均含有多种蛋白,经高温处理后熟鱼总蛋白组分相对减少。免疫印迹试验结果表明,加工温度、时间对鱼类食品过敏原有显著影响。结论鱼类食品中含有热稳定的过敏原,即使加工后仍具有致敏性。
- 徐飞龙吴海强刘志刚
- 关键词：食品过敏原总蛋白免疫印迹
