徐建容
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 防御素2融合VE-Cadherin重组质粒的抗血管生成免疫作用被引量：3
- 2006年
- 目的构建β防御素2(BD2)融合血管内皮钙粘附素(VE-Cadherin)胞外段重组质粒,以期探讨其免疫后抗肿瘤血管生成作用。方法PCR扩增成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段。以连接肽连接成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段,通过重叠PCR构建融合分子。将所得三种片段插入到pSecTag2B真核表达质粒。转染CT26肿瘤细胞,RT-PCR检测其表达。取转染COS细胞后的上清液做趋化实验,检测融合分子对树突状细胞(DC)的趋化作用。所得质粒经肌肉注射免疫小鼠后,皮下植入包裹CT26肿瘤细胞的藻酸盐微球,检测血管生成情况。结果测序证实三种质粒构建正确,能在真核细胞中顺利表达。BD2融合重组质粒和未融合的BD2质粒转染细胞后的上清液趋化DC的能力相近(P>0.05)。与其余各组质粒免疫相比,融合重组质粒免疫后能够显著抑制藻酸盐微球中肿瘤细胞诱导的血管生成(P<0.01)。结论BD2融合血管生成相关分子后的重组质粒免疫动物后能在体内有效地打破机体对肿瘤新生血管的免疫耐受。
- 王国庆王永生王瑞吴杨杜小波徐建容刁鹏
- 关键词：防御素血管生成免疫作用
- 携带小鼠beta防御素2的间充质干细胞对小鼠恶性腹水的抑制作用被引量：2
- 2006年
- 背景与目的:防御素是天然免疫的重要分子,小鼠beta防御素2(murinebetadefensin2,MBD2)是防御素家族的重要成员,在天然免疫和获得性免疫中具有桥梁作用。本研究观察携带MBD2的间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSC)对小鼠恶性腹水的抑制作用。方法:从BALB/c小鼠肾脏中提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)得到小鼠MBD2片段。构建、包装表达MBD2的慢病毒Lentivirus系统。用所得病毒感染MSC,经筛选得到稳定表达MBD2的MSC,RT-PCR验证MBD2的表达。取稳定表达MBD2的MSC培养上清用于趋化树突细胞实验。BALB/c小鼠腹腔接种MethA细胞,于接种后第2、4、6、8天腹腔注射筛选所得表达MBD2的MSC或生理盐水、未感染病毒的MSC、感染Null-Lentivirus病毒的MSC,观察恶性腹水产生情况、腹水性状及荷瘤小鼠存活情况。对于长期存活小鼠,再次腹腔注射MethA肿瘤细胞,观察存活情况。结果:在MBD2-Lentivirus感染后的MSC中顺利扩增出MBD2片段。MBD2组细胞培养上清对树突细胞有较强的趋化作用[(43±8)个],明显高于生理盐水(NS)组[(8±1)个]、MSC组[(14±2)个]和Null组[(12±3)个],差异有显著性(P<0.01)。经表达MBD2的MSC处理的荷瘤小鼠腹水血性程度不明显,腹水总量[(3.0±1.0)ml]明显少于NS组[(10.8±1.0)ml]、MSC组[(10.2±1.3)ml]和Null组[(9.8±1.6)ml],差异有显著性(P<0.05)。MBD2组在肿瘤接种后第40天仍有小鼠存活,而各对照组至肿瘤接种后第20天已全部死亡,MBD2组存活时间显著长于对照组(P<0.05)。长期存活的MBD2组小鼠经MethA肿瘤细胞再次腹腔接种,其存活时间仍长于未作任何处理的对照组小鼠。结论:成功构建了以MSC为载体的MBD2基因治疗系统,经腹腔注射可以抑制恶性腹水的生长。
- 王国庆徐建容王瑞李红霞徐宁杜小波魏于全
- 关键词：防御素慢病毒干细胞腹水
