张远冬
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蛇床子素对基因多态性的CYP2C9酶活性的作用及对吲哚美辛药代动力学的影响研究
- 蛇床子素是存在于多种中药中的药理活性成分，具有广泛的药理作用，在临床应用前景广阔，是一个极具开发利用价值的药理活性成分。目前，国内外对蛇床子素药理药效方面的研究较多，而关于蛇床子素药物代谢动力学相关研究较少，本文了针对蛇...
- 张远冬
- 关键词：蛇床子素基因多态性药物代谢酶吲哚美辛药代动力学
- HPLC-RF测定小鼠肝微粒体中CYP2A5的酶活性
- 2013年
- 目的以香豆素为探针底物建立测定小鼠肝微粒体中CYP2A5酶活性的方法。方法用Waters Symmetry C18柱;流动相为0.1%醋酸-乙腈=70∶30;流速为1.0 mL·min-1,柱温30℃,E x=340 nm,E m=458 nm。香豆素与小鼠肝微粒体在37℃孵育20 min,加入含内标的冰乙腈终止,4℃、12000 r·min-1离心15 min,取上清液,用HPLC测定其代谢产物7-羟基香豆素的含量,以GraphPad Prism 5.0作图计算酶动力学参数。结果 7-羟基香豆素与内标两者分离良好。7-羟基香豆素的检测限为2 nmol·L-1(S/N≥3),线性范围为8～800nmol·L-1。日内日间精密度RSD小于5%,回收率为91.3%～101.4%。香豆素羟化反应的K m为2.15μmol·L-1;V max为9.74 pmol·(min·mg protein)-1。结论该方法稳定可靠,灵敏度高,适于体外CYP2A5酶活性的测定。
- 王二豪郭延垒张有金石亮张远冬王应雄杨竹于超
- 关键词：高效液相色谱-荧光检测法香豆素
- 大鼠肝微粒体法评价20种中药有效成分对CYP2C9酶的作用被引量：4
- 2013年
- 目的建立体外大鼠肝微粒体中CYP2C9酶活性测定方法,并以此方法评价20种中药有效成分单体对大鼠CYP2C9酶的作用。方法以双氯芬酸(Diclofenac)为探针,在实验组大鼠肝微粒体孵育体系中加入20种中药有效成分单体,在37℃水浴温孵15 min后冰乙腈终止反应,HPLC测定各孵育体系中探针药物的代谢产物4'-羟基双氯芬酸的转化率,并与对照组比较其差异来评价各有效成分对CYP2C9酶活性的作用。结果 4'-羟基双氯芬酸、双氯芬酸及其内标香豆素三者分离良好且无其他内源性物质干扰;动力学考察表明双氯芬酸在0.25 mg/mL的大鼠肝微粒体体系中孵育15 min,测得酶动力学参数V max为0.145 6 nmol/(min·mg),K m为8.270μmol/L;抑制实验考察发现:黄芩素、蛇床子素、大黄素、獐牙菜苦苷、淫羊藿苷、白藜芦醇实验组中4'-羟基双氯芬酸转化率分别为(402.60±10.58)、(210.90±10.26)、(414.46±10.32)、(509.83±26.45)、(355.44±15.87)、(387.34±22.16)pmol/(min·mg),显著低于对照组[(735.80±17.27)pmol/(min·mg),P<0.05],其他中药成分实验组与对照组比较,其转化率无统计学差异。结论建立了中药有效成分对CYP2C9酶作用的体外大鼠肝微粒体研究方法,并初步评价了黄芩素、蛇床子素、大黄素、獐牙菜苦苷、淫羊藿苷、白藜芦醇对CYP2C9具有抑制作用,在临床联合用药中需注意其可能引起的药物-药物相互作用。
- 张远冬刘学庆郭延垒张有金石亮王二豪于超
- 关键词：大鼠肝微粒体CYP2C9中药有效成分
- 没食子酸及其氧化产物对大鼠肝微粒体CYP3A的抑制效应被引量：7
- 2014年
- 目的体外研究没食子酸对大鼠肝微粒体CYP3A的抑制效应。方法将不同浓度没食子酸与鼠肝微粒体及探针底物在37℃下孵育,用高效液相色谱-紫外法测定探针底物的代谢产物生成率,计算IC50值。在NADPH存在或不存在时,将没食子酸与鼠肝微粒体在37℃下分别预孵育0、15、30 min后继续孵育15 min,测定探针底物的代谢产物生成率,观察没食子酸对CYP3A抑制的时间依赖性。在无NADPH存在时,将不同浓度没食子酸与鼠肝微粒体在37℃下分别预孵育0、30 min后继续孵育15 min,测定探针底物的代谢产物生成率,计算出两实验组IC50平移值(IC50shift)。观察2.5 h内没食子酸在紫外-可见光光谱下的变化。在无NADPH存在时,将抗氧剂与没食子酸及鼠肝微粒体在37℃下共同预孵育,观察抗氧剂谷胱甘肽和维生素C的加入对没食子酸抑制强度的影响。结果没食子酸对CYP3A表现出浓度依赖性抑制(P<0.05),IC50为130.2μg/mL。预孵育无NADPH存在时,没食子酸对CYP3A表现出时间依赖性抑制(P<0.05),且抑制强度远大于NADPH存在的实验组。在无NADPH存在时,没食子酸与鼠肝微粒体在37℃下分别预孵育0 min和30 min,两实验组间的IC50平移值达11.9。紫外-可见光全波长扫描观察显示,没食子酸在孵育过程中生成了2种反应产物。抗氧剂的加入能显著降低没食子酸对CYP3A的抑制能力(P<0.05)。结论没食子酸对CYP3A的活性表现出较强的不可逆性抑制,具有诱导药物-药物相互作用的风险。
- 石亮张远冬王二豪惠俊敏郭延垒于超
- 关键词：没食子酸肝微粒体CYP3A
- HPLC-UV法测定大鼠脑组织中5-羟色胺含量被引量：9
- 2012年
- 目的建立大鼠脑组织中5-羟色胺(5-HT)含量的HPLC-UV测定方法。方法采用SHIMADZU VP-ODS C18反相柱(250×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-0.01mol/L的醋酸钾缓冲液(10:90,V/V,用0.2mol/L柠檬酸调pH至4.00);流速:1.0ml/min;柱温:25℃;检测波长:275nm。结果 5-羟色胺在0.1～20μg/ml范围内,回归方程为A=46008.89C+1886.58,相关系数r=0.9999,最低检测限为40ng/ml,最低定量限为100ng/ml。加样回收率为89.62%～101.60%,日内、日间精密度均小于3%。结论该方法准确可靠,简单易行,可重复性强,适用于多样本5-HT的快速测定。
- 张远冬张有金郭延垒刘学庆于超
- 关键词：5-羟色胺脑组织
