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张乃键: 作品数：12 被引量：13H指数：2; 供职机构：中国人民解放军更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金淮安市科技计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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miR-100对裸鼠食管鳞状细胞癌移植瘤生长的影响被引量：2: 2016年; 目的观察miR-100对裸鼠食管鳞状细胞癌(ESCC)移植瘤生长的影响。方法将人ESCC细胞株Kyse150皮下注射裸鼠腋部,成瘤后将瘤块接种于21只裸鼠右侧腋下;待肿瘤体积增至200 mm^3左右时,将裸鼠随机分为A、B、C组各7只,分别于瘤内注射50μg/mL的miR-100-mimics、50μg/mL的mimics-NC、转染剂100μL,1次/d,连续21 d。其间每隔1 d测量并记录肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;实验结束后剥离肿瘤组织,称量肿瘤质量。结果干预后第5~7天B、C组肿瘤快速生长,且随时间延长体积逐渐增大,与A组之间差异无统计学意义(P均>O.05);而第9天后A组肿瘤生长受到抑制,肿瘤生长缓慢,几乎停滞,体积明显小于B、C组(P均<0.05)。干预后第21天,A组荷瘤裸鼠移植瘤质量为(0.115±0.087)g,明显低于B组的(0.370±0.361)g和C组的(0.289±0.472)g,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 miR-100可以抑制ESCC裸鼠皮下移植瘤的生长。; 张乃键蒋森吴钦良赵亚萍; 关键词：食管癌移植瘤裸鼠

食管鳞状细胞癌组织中miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c、VEGF-A表达变化及其相关性被引量：5: 2017年; 目的观察食管鳞状细胞癌(ESCC)癌组织及癌旁组织中miRNA-29家族(miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c)及血管内皮生长因子A(VEGF-A)的相对表达量变化,并探讨他们之间的关系。方法收集手术切除并经病理检查确诊的ESCC癌组织及癌旁组织,应用qRT-PCR及免疫组织化学染色技术分别检测miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c、VEGF-A的相对表达量,并分析其相关关系;进一步应用生物信息学方法和双荧光素酶报告基因系统推测和验证miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同调控同一靶基因VEGF-A的分子调节机制。结果与癌旁组织比较,ESCC癌组织中miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c呈低表达(P均<0.05);VEGF-A呈高表达(P<0.05),且其之间呈负相关关系(miRNA-29a:r=-0.955;miRNA-29b:r=-0.950;miRNA-29c:r=-0.893,P均<0.01)。生物信息学分析结果发现,VEGF-A能够与miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c进行特异性结合,可能为miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同的靶基因。双荧光素酶报告基因系统验证了VEGF-A是miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同的靶基因。结论 ESCC癌组织中miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c低表达,VEGFA高表达;且他们之间具有负相关关系。VEGF-A为miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同的靶向调节基因。; 宋雷雷徐广峰谢晖张乃键邵启祥; 关键词：食管鳞状细胞癌血管内皮生长因子A

淮安市区退休职工脂肪性肝病患病现状分析: 2014年; 目的了解淮安市区退休职工脂肪性肝病(FLD)患病现状。方法收集2011年9月-2012年12月医院体检中心13 112名淮安市区退休人员体检资料,分析其脂肪性肝病及相关疾病患病情况。结果检出患脂肪性肝病5 853人,患病率为44.63%,女性患病率(46.62%)高于男性(41.33%)。同时检出高脂血症、高血压、空腹血糖受损、糖尿病,患病率分别为53.13%、42.46%、12.23%、15.34%。脂肪性肝病组的4种高脂血症、空腹血糖受损、糖尿病、高血压的患病率均显著高于非FLD组(P<0.001)。多因素logistic回归分析表明,女性、患空腹血糖受损、高血糖、高血压者脂肪性肝病患病率较高。结论淮安市区退休人员脂肪性肝病患病率较高,且多与其他代谢类疾病并存,必须加强综合防治。; 王秀芳刘启飞张乃键周玉荣赵亚萍; 关键词：脂肪性肝病患病率

游离脂肪酸对HepG2细胞及HPA-v成熟脂肪细胞miRNA-143表达的影响: 2013年; 目的探讨游离脂肪酸(FFA)对人肝癌HepG2细胞及HPA-v成熟脂肪细胞miRNA-143表达的影响。方法体外培养HepG2细胞及人前体脂肪细胞HPA-v,将HPA-v前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞。用1mmol/L FFA分别干预HepG2细胞及HPA-v成熟脂肪细胞0、4、12、24h,采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测细胞miRNA-143的表达水平。结果随FFA干预时间的延长,HepG2细胞miRNA-143表达增高(P<0.05),HPA-v成熟脂肪细胞中miRNA-143的表达降低(P<0.05)。结论 FFA对HepG2细胞及HPA-v成熟脂肪细胞miRNA-143表达具有不同的调节作用。; 王秀芳张向君徐广峰张乃键赵超赵亚萍; 关键词：脂肪酸类脂细胞 HEPG2

长链非编码RNA 8711-2人脂肪细胞中的表达研究: 2019年; 目的:对长链非编码RNA(lncRNA)8711-2进行生物信息学分析,预测其可能参与的生物学过程,并研究其在人脂肪组织细胞中的表达情况。方法:应用UCSC在线数据库获取lncRNA8711-2的序列、位置,并分析其特征;分离人脂肪组织,接种培养并诱导其向成熟脂肪组织细胞分化。采用逆转录PCR技术检测lncRNA8711-2在脂肪细胞分化中的表达变化。结果:lncRNA在脊椎动物中保守,与小鼠、大鼠、牛、恒河猴均具有较高的同源性,分析其序列所在的染色体区域,可能的调控靶标为Meox2基因。lncRNA8711-2在人脂肪前体细胞分化过程表达量明显增加。结论:lncRNA8711-2在人脂肪前体细胞分化过程表达量明显增加,预测lncRNA8711-2可能的调控靶标,参与人脂肪前体细胞诱导分化过程。; 赵超赵文玺徐广锋张乃键王鹏赵亚萍; 关键词：长链非编码RNA 生物信息学脂肪组织肥胖

miR-143对HepG2细胞甘油三酯代谢的影响: 2014年; 目的探讨miR-143对Hep G2细胞脂类代谢的调节作用。方法体外培养Hep G2细胞,待细胞密度达75%左右,在培养液中加入不同浓度游离脂肪酸(free fatty acid,FFA),油红O染色观察细胞内脂质积聚情况;采用miR-143mimics和Negative control(NC mimics)转染Hep G2细胞,实时荧光定量PCR检测miR-143的表达水平,评价miR-143转染效率;采用油红O染色观察miR-143过表达Hep G2细胞内脂质积聚情况;脂蛋白脂肪酶-甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚(GPO-PAP)法检测Hep G2细胞内甘油三酯(Triglyceride,TG)的含量。结果 0.25mmol/L FFA可导致Hep G2细胞内TG明显积聚,且呈时间依赖性;miR-143过表达可以显著抑制高FFA状态下Hep G2内TG的积聚。结论 miR-143可能参与了肥胖状态下肝脏细胞脂类代谢的调节。; 张乃键赵超赵亚萍; 关键词：游离脂肪酸甘油三酯 MIR-143

Pentra MS CRP血细胞分析仪LIC检测结果分析: 2019年; 目的:探讨Pentra MS CRP血细胞分析仪巨大未成熟细胞(Large Immature Cell, LIC)检测结果的可靠性分析及其临床应用价值.方法:使用Pentra MS CRP血细胞分析仪检测883例血液标本,同时对LIC>3%的标本进行显微镜下血细胞形态分析.结果: 883例标本中, LIC>3% 47例,占5.32%,以显微镜复检结果为金标准, Pentra MS CRP血细胞分析仪在检测异常细胞时有72.34%的高假阳性率.结论: Pentra MS CRP血细胞分析仪LIC结果对外周血异常细胞具有一定的提示作用,但同时也存在较高的假阳性率.; 张乃键于小雨宋雷雷谢晖赵亚萍; 关键词：血细胞分析仪异常细胞显微镜镜检

某市医院检验科微生物实验室人力资源现状调查分析被引量：1: 2019年; 目的:调查分析淮安市二级及以上医院检验科微生物实验室人力资源现状。方法:对淮安市19所二级及以上医院检验科微生物实验室工作人员数量、学历、职称构成等现况进行调查。结果:二、三级医院微生物实验室工作人员总数50人,占检验科一线工作人员10.66%。其中研究生学历22%,本科学历64%;高级职称20%,中级职称32%。医院实际床位数与微生物实验室人员比例平均291∶1。结论:某市二级以上医院对检验科微生物实验室人力资源配置比较重视,但仍需进一步加强人才的引进和培养。; 范晓燕梁松林宁赵亚萍张乃键范智勇解长艮; 关键词：实验室微生物人力资源问卷调查

肥胖相关微RNA的研究进展: 2015年; 肥胖与高血压、高脂血症、心脑血管疾病、2型糖尿病以及癌症的发生、发展密切相关,严重威胁着人类的健康和生命,已成为全世界的公共卫生问题。肥胖的确切发病机制目前尚不清楚。最近越来越多的研究证实,微RNA(miRNA)参与代谢性疾病的多种生物过程。该文总结分析了脂肪细胞分化过程中miRNA表达谱的变化,miRNA在脂肪细胞分化以及肥胖相关胰岛素抵抗中所起的作用及其机制。; 张乃键赵超赵亚萍; 关键词：肥胖脂肪细胞胰岛素抵抗

以植物miR-2911为外参检测循环miRNA的荧光定量PCR方法评价被引量：1: 2019年; 目的:探讨和优化循环miRNA检测方法,建立稳定可靠的用于研究血浆miRNA的检测平台。方法:提取4例健康体检者的血浆,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对miR-21进行检测。比较苯酚氯仿抽提法和试剂盒法的提取效率;针对miR-2911成熟体,建立标准曲线;通过qRT-PCR对外参照miR-2911及血浆miR-21进行检测,评估循环检测方法的重复性。结果:苯酚氯仿抽提法循环miRNA的提取效率是试剂盒法的8倍;miR-2911拷贝数log值与循环阈值(Ct)的标准曲线方程为Y=-3.242X+35.28,R^2=0.991,呈良好的线性关系。血浆miR-21批内批间重复性实验的标准差(SD)在0.144～0.793、变异系数(CV)在0.52%～2.76%,说明该方法有较好的重复性。以miR-2911作为外参照,同一血浆标本miR-21的4次检测结果中ΔCt值的SD为0.1445,CV为1.225%,提示miR-2911可作为血浆miRNAs qRT-PCR检测的稳定外参。结论:利用外源miR-2911能有效监测qRT-PCR检测方法的稳定性,为循环miRNA的研究提供了较好的实验基础。; 张乃键伍华东刘秋红赵亚萍; 关键词：QRT-PCR

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