崔佳莹
- 作品数:7 被引量:31H指数:4
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生历史地理更多>>
- 流感病毒RNA聚合酶串联亲和纯化方法的建立被引量:2
- 2011年
- 为建立流感病毒RNA聚合酶的串联亲和纯化方法,本实验由鸡胚尿囊液中提取病毒核酸,经过RT-PCR和常规PCR方法扩增禽流感病毒株A/Duck/Guangxi/35/01(H5N1)的PB1、PB2和PA的cDNA。分别将PB2基因连接于pcDNATAP载体中,PB1和PA基因连接于pcDNA3A载体中构建了pcDNA-35PB2TAP、pcDNA-35PB1和pcDNA-35PA重组质粒。将构建的真核表达重组质粒共转染293T细胞,经过串联亲和纯化方法获得流感病毒依赖RNA的RNA聚合酶复合体(RdRp)。利用RNA体外合成试验验证获得的RdRp具有生物学活性。
- 李印邓国华崔佳莹于洋丁晴薇陈化兰
- 关键词:H5亚型禽流感病毒串联亲和纯化
- 湖南湖北两省H_6亚型禽流感病毒表面基因的序列分析被引量:4
- 2011年
- 2008年至2009年间,在湖南和湖北两省的活禽市场中分离到了14株H6亚型禽流感病毒,为了解这14株病毒之间的分子特征和差异,我们运用PCR和测序鉴定对这14株病毒的NA基因进行了分型,并对其表面基因HA和NA进行序列测定及序列分析。14株H6亚型病毒中,H6N2亚型12株,H6N6亚型2株。序列测定和进化分析结果显示:DK/HN/284的HA基因与其它13株的HA差异性较大,差异性达到19.4%~20.2%,其余13株毒同源性在94.2%~99.9%;N2亚型NA基因的同源性在91.1%~99.9%,差异性比较大;两株N6亚型NA基因同源性为89.5%,差异明显。这些数据表明:不同毒株呈现一定的地域性差异。与我国周边其它地区的H6亚型禽流感毒株序列进行比较发现,只有DK/HN/284的HA基因与香港早期的毒株可能有着共同的来源,其余都与香港和韩国等的毒株有着较大的差异性,并且各个毒株的HA基因上潜在的糖基化位点和受体结合位点也有所不同,这些数据表明,这些毒株表现出明显的异源性。
- 丁晴微于杨崔鹏飞齐瑛琳李印施建忠崔佳莹邱伯根陈化兰邓国华
- 关键词:禽流感病毒HANA基因分析
- H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量:4
- 2011年
- 为制备抗H5N1禽流感病毒(AIV)的单克隆抗体(MAb),本研究以灭活的H5N1亚型A/Chicken/Guangdong/S2261/2009(H5N1GD261)株免疫4周龄~6周龄BALB/c雌鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA及HI筛选获得了3株能稳定分泌抗HA的MAb杂交瘤细胞,分别命名为1A4、2F5和3D3。MAb亚类鉴定表明,2F5为IgM类,其它为IgG2a亚类,轻链均为κ链。经血凝抑制检测,3株MAb均能与H5亚型的AIV结合,并具有较好的型广谱性。
- 崔佳莹李印于扬张文亮邓国华陈化兰
- 关键词:禽流感病毒血凝素单克隆抗体血凝抑制
- 两湖地区H6亚型禽流感病毒HA及NA的基因序列分析
- 08年~2009年间,哈尔滨兽医研究所动物流感实验室在两湖地区的市场检测过程中分离到了14株H6亚型禽流感病毒,其中H6N2亚型有12株,H6N6亚型有2株。我们对这14株病毒的HA,NA进行序列测定和进化分析。结果发现...
- 丁睛微齐瑛琳李印施建忠崔鹏飞于杨崔佳莹陈化兰邓国华
- 文献传递
- 两株鸭源H6N2亚型禽流感病毒的序列分析及对鸡的致病性研究被引量:16
- 2011年
- 为了解鸭源H6N2亚型禽流感病毒(AIV)的生物学特性,本研究对两株鸭源H6N2亚型AIV[A/duck/Hubei/Sd061/2008(HB/061/08)和A/duck/Fujian/S2080/2009(FJ/080/09)]进行序列分析和致病性试验。序列分析显示:两株病毒的HA和NA基因均来源于我国近年流行的H6亚型病毒株,但是HB/061/08株的内部基因可能来源于H9、H5等其他亚型。与病毒株HB/061/08NP、PA、PB2基因的核苷酸同源性最高的病毒株为A/environment/Hunan/2-84/2007(H9N2);与M、PB1和NS基因的核苷酸同源性最高的病毒株分别为A/duck/Zhejiang/11/2000(H5N1)、A/chicken/Hebei/7/2008(H9N2)和A/chicken/Henan/L1/2008(H9N2)。两株病毒的抗原差异性较显著,相关系数为0.49;用106EID50病毒剂量感染4周龄SPF鸡,结果显示FJ/080/09株不能感染鸡,而HB/061/08株在鸡体内能够高效复制,并通过咽喉和泄殖腔持续排毒。鸡群感染后第3d采取脏器样品,在气管和肺部能够检测到病毒存在,部分脏器和器官的组织学观察显示存在一定程度的病理变化。以上数据表明,H6亚型AIV在跨越不同宿主感染的传播过程中,对新宿主适应能力的差异导致对其致病性的差异。
- 丁晴微邓国华施建忠李印崔鹏飞齐瑛琳于杨崔佳莹邱伯根陈化兰
- 关键词:禽流感病毒基因组分析抗原分析
- 两湖地区H6亚型禽流感病毒HA及NA的基因序列分析
- 2008年~2009年间,哈尔滨兽医研究所动物流感实验室在两湖地区的市场检测过程中分离到了14株H6亚型禽流感病毒,其中H6N2亚型有12株,H6N6亚型有2株。我们对这14株病毒的HA,NA进行序列测定和进化分析。结果...
- 丁晴微齐瑛琳李印施建忠崔鹏飞于杨崔佳莹陈化兰邓国华
- 关键词:禽流感病毒HANA基因分析
- 文献传递
- 新城疫病毒HN蛋白单克隆抗体的制备被引量:6
- 2011年
- 为制备新城疫病毒HN蛋白的单克隆抗体,本研究采用新城疫病毒CK/AH/100/2010作为免疫原,免疫6~8周龄BALB/c小鼠,3次免疫后取脾细胞与SP2/0融合,用血凝抑制(HI)方法检测筛选,具有HI活性的单抗有6株:PX1-PX6。6株单抗与AIV、EDS等其它具有血凝活性的病毒的交叉血凝抑制试验结果表明,6株单抗具有良好的特异性。间接免疫荧光试验结果表明,PX1、PX3可与新城疫病毒CK/GD/263/2010HN抗原发生特异性反应,而其它单抗不反应。
- 于杨崔佳莹丁晴微崔鹏飞李印邓国华任涛陈化兰
- 关键词:新城疫病毒单克隆抗体HN基因HI