孙萍
- 作品数：9 被引量：28H指数：4
- 供职机构：华南农业大学食品学院生物工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技攻关计划广东省教育部产学研结合项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学生物学化学工程更多>>
- 不同草菇栽培菌株的比较被引量：8
- 2012年
- 对中国不同地区的24个草菇栽培菌株的子实体颜色、菌膜厚度、菌柄形态及着生方式、菌托形态和生物转化率进行比较,结果表明:不同的草菇栽培菌株子实体形态存在差异,子实体的蛋型期颜色呈现深灰色、灰色和灰白色,以灰色居多;成熟期呈现灰色和灰白色,同样以灰色居多。V365菌膜最厚,为2.75mm;单生草菇菌膜最薄,仅为0.95mm。菌柄有2种形态:上细下粗和基本等粗,菌托有3种形态:圆筒形、两瓣形和三瓣形;菌柄着生方式包括菌柄中生和菌柄偏生。不同菌株的生物转化率也存在差异,其中V365生物转化率最高,达48.6%;A8最低,仅有3.1%。
- 王玮林俊芳聂斐郭丽琼孙萍
- 关键词：草菇子实体生物转化率
- 白藜芦醇在酿酒酵母中的组合表达被引量：2
- 2013年
- 将克隆自拟南芥的4cl基因和巨峰葡萄的rs基因,利用降落重叠延伸PCR的方法,成功构建了含有G418抗性筛选标记的酵母表达载体pRS42K-4CL以及含有潮霉素抗性筛选标记的酵母表达载体pRS42H-RS。采用LiAc/SS carrier DNA/PEG法将含有目的基因的2个载体共同转化至酿酒酵母工业菌株EC1118中,通过PCR及酶切鉴定等方法验证重组工程菌。以对香豆酸为底物,将获得的酿酒酵母工程菌于YPD液体培养基中发酵(25℃,150 r/min,96 h),发酵液用乙酸乙酯抽提后采用高效液相色谱(HPLC)法进行检测,其结果显示发酵产物中白藜芦醇的含量为0.78 mg/L。这表明,拟南芥的4cl基因与巨峰葡萄的rs基因在酿酒酵母工程菌中成功得到了表达,并且表达产物利用对香豆酸为前体物质合成了目标产物白藜芦醇。该研究为进一步实现白藜芦醇在酵母中的工业化生产奠定了基础。
- 孙萍郭丽琼梁景龙林俊芳黄晓燕黄佳俊
- 关键词：白藜芦醇酿酒酵母白藜芦醇合酶
- 米曲霉中蓝藻抗病毒蛋白-N基因的克隆与表达
- 2016年
- [目的]提高蓝藻抗病毒蛋白-N(CVN)的异源表达量,获得大量高纯度可溶性蛋白。[方法]采用RT-PCR从酱油发酵酱醪宏基因组中克隆获得CVN基因cvn-SF,构建了重组表达载体p ET32a-cvn-SF,转化E.coli BL21菌株,获得工程菌株,优化表达条件,通过Ni-NTA凝胶亲和层析对CVN-SF蛋白进行纯化。[结果]工程菌株在温度30℃、添加1 mmol/L的IPTG诱导剂、培养时间12 h的条件下获得最高表达量的可溶性蛋白。Ni-NTA凝胶亲和层析纯化得到了230.8 mg/L的CVN蛋白,占提取总蛋白含量的33.37%。[结论]所得CVN蛋白高于目前报道的CVN在大肠杆菌的最高表达量140 mg/L^([11])。
- 谢露付显令孙萍林俊芳郭丽琼云帆黎倩怡
- 关键词：酱醪米曲霉基因克隆
- 产白藜芦醇大肠杆菌基因工程菌的构建被引量：5
- 2013年
- 利用降落重叠延伸PCR和连接酶连接的方法,构建了组成型表达载体pMD18-VvRs-At4cl,该表达载体带有大肠杆菌甘油醛三磷酸脱氢酶启动子(pGAP),拟南芥(Arabidopsis thalianna)4-香豆酸辅酶A连接酶(At4CL)基因和葡萄(Vitis vinifera)白藜芦醇合酶(VvRS)基因。表达载体转化大肠杆菌BW27784,并通过PCR鉴定和酶切鉴定后,获得重组菌株。对重组菌株进行发酵培养,对发酵液进行HPLC检测,发酵液中白藜芦醇含量为4.51mg/L。这表明,拟南芥的4cl基因与金手指葡萄的rs基因在重组大肠杆菌中成功得到了表达,并且表达产物利用对香豆酸为前体物质合成了白藜芦醇。
- 梁景龙郭丽琼孙萍林俊芳何杨
- 关键词：白藜芦醇大肠杆菌原核表达
- 酿酒酵母工程菌生物合成白藜芦醇被引量：5
- 2016年
- 目的:构建能以酪氨酸为底物产白藜芦醇的重组酿酒酵母。方法:利用降落-重叠延伸PCR法和一步等温法,将拟南芥的4-香豆酰辅酶A连接酶基因(4cl)、巨峰葡萄的白藜芦醇合酶基因(rs)以及粘红酵母的酪氨酸解氨酶基因(tal)分别构建含有不同抗性筛选标记的附加型酵母表达载体,采用Li Ac/SS carrier DNA/PEG法转化酿酒酵母工业型菌株EC1118,通过高效液相色谱法检测重组酵母发酵产物。结果:成功获得酵母工程菌EC1118-H-TTC-K-T4C-TRC,以3 mmol/L酪氨酸为底物,28℃,150 r/min摇床避光发酵5 d,发酵液中白藜芦醇的产量为6.1979 mg/L。结论:成功构建一株能以酪氨酸为底物产白藜芦醇的工业型重组酿酒酵母,为白藜芦醇的工业化生产进一步奠定了基础。
- 孙萍郭丽琼黄佳俊黄晓燕梁景龙林俊芳
- 关键词：白藜芦醇酿酒酵母酪氨酸生物合成基因表达
- 不同干制温度对杏鲍菇品质的影响被引量：7
- 2013年
- 本研究以杏鲍菇为实验材料,对其顶部、中部和底部进行切割,选择不同的温度进行干制复水,对复水率最佳和最差的样品进行营养物质含量的检测以及机械质地的感官评定。结果表明,经过70℃干制的杏鲍菇的营养含量总体上比经过40℃干制的高;杏鲍菇顶部和中部的70℃干制品在硬度和咀嚼性比40℃干制品高,底部则相反;70℃顶部干制品弹性与40℃顶部干制品相差较大,其他部位的相差较小。
- 游楚镇林俊芳郭丽琼孙萍白伟芳
- 关键词：杏鲍菇干制
- 多基因整合型载体转化酿酒酵母生物合成白藜芦醇被引量：2
- 2018年
- 目的:以整合型载体p RS303K为框架,以来源于拟南芥的4-香豆酰辅酶A连接酶基因(4cl)和巨峰葡萄的白藜芦醇合酶基因(rs)为目标基因,采用一步等温法构建了表达白藜芦醇的整合型酵母表达载体p RS303KT4C-TRC。方法:采用Li Ac/SS carrier DNA/PEG转化法把表达载体成功转化酿酒酵母工业型菌株EC1118,经筛选和PCR鉴定获得酵母工程菌株EC1118-303K-T4C-TRC。酵母工程菌株采用添加和不添加抗生素的发酵培养。结果:在培养基添加抗生素和不加抗生素的发酵液中白藜芦醇的含量分别为3.4110 mg/L和3.4710 mg/L,两者差异不显著。结论:两个关键酶基因成功整合到酵母的染色体基因组中并得到表达,工程菌株在传代中不受选择压力影响,稳定组合表达白藜芦醇。
- 黄佳俊林俊芳孙萍梁景龙叶志伟郭丽琼
- 关键词：白藜芦醇酿酒酵母生物合成基因表达
- 儿童食用菌功能饮料的研究被引量：1
- 2013年
- 以金针菇FLA1(白色菌株)、金针菇FLA2(黄色菌株)、香菇(LEN1)、猴头菇(HER1)为发酵菌株,通过正交试验,确定四种菌株发酵液混合后的最佳营养成分含量,优化了食用菌功能饮料的制作工艺,并对成品进行了感官评定。结果表明,食用菌功能饮料的四种菌株发酵液的最佳配比为:FLA1:FLA2:LEN1:HER1=1:1:2:1,混合液中的辅料添加量为白砂糖6.5%、柠檬酸4.0%、草莓香精0.25%,所获得的食用菌功能饮料糖度为12°Bx、酸度为3°,色、香、味俱全,适合儿童口味。
- 郭心悦杨海星林俊芳郭丽琼孙萍
- 关键词：金针菇猴头菇香菇正交试验饮料
- 杏鲍菇干制品的酶活性及细胞结构分析被引量：2
- 2015年
- 以杏鲍菇子实体为材料,在40℃和70℃下干制,检测不同干制温度下杏鲍菇主要酶活性以及细胞结构的变化。结果表明,在两个干制温度处理,杏鲍菇的纤维素酶活性和中性蛋白酶活性均增强。在40℃处理下,漆酶活性大幅度的提高,而在70℃处理下漆酶活性大幅度降低。不同温度处理对杏鲍菇整体的细胞结构无明显影响,然而细胞内营养物质组成有较大变化,并且促进了杏鲍菇细胞壁的纤维化程度。
- 熊荣园游楚镇林俊芳郭丽琼孙萍
- 关键词：杏鲍菇干制酶活性细胞结构
