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ATP50荧光表达载体构建及其在TM3小鼠睾丸Leydig细胞定位研究被引量：2: 2006年; 目的:构建ATP50的荧光表达载体,研究其在原代培养的小鼠睾丸Leyd ig细胞中的表达和在TM3小鼠睾丸Leyd ig细胞中的定位。方法:原代培养小鼠睾丸Leyd ig细胞并利用3β-HSD染色法鉴定,应用PCR方法研究ATP50在小鼠睾丸Leyd ig细胞中的表达。利用BamH I和EcoR I酶切位点把ATP50克隆到pEYFP-N1。细胞转染和细胞荧光显微镜技术观察YFP-ATP50在TM3小鼠睾丸Leydig细胞的定位。结果:ATP50表达在原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中。TM3小鼠睾丸Leydig细胞中,绿色荧光的YFP-ATP50和红色荧光的线粒体标记物M ito-tracker有完全的共定位。结论:ATP50在小鼠睾丸Leydig细胞表达,成功构建了ATP50真核荧光蛋白表达载体,明确YFP-ATP50定位在Leydig细胞的线粒体。这些结果将对老年男性睾丸间质细胞睾酮合成功能障碍的研究提供重要的信息,有利于进一步深入研究。; 陈亮辛钟成姜学军田龙袁亦铭刘刚宋卫东郭应禄; 关键词：睾丸间质细胞线粒体小鼠

EGFR/Grb2参与rasfonin诱导的自噬和程序性坏死间的转换: 按照Clarke形态学分类法,目前将细胞程序性死亡（programmed cell death, PCD）分为三种类型,即I型的细胞凋亡、II型的自噬性细胞死亡和III型的程序性坏死。大量研究表明,自噬与凋亡间存在着密切...; 侯卜琳刘玲刘述春姜学军; 关键词：EGFR GRB2 细胞自噬程序性坏死; 文献传递

曲格列酮增加Hela细胞的自噬和混合型细胞死亡被引量：3: 2008年; 【目的】为了研究Troglitazone(Trog)对HeLa细胞自噬和程序性细胞死亡的影响。【方法】利用电镜、荧光显微镜、免疫杂交、流式细胞计数等对经Trog处理后的HeLa细胞进行了细胞发生自噬和死亡情况的观察。【结果】电镜、荧光显微镜的结果均提示,Trog能够诱导HeLa细胞自噬活动的增加;免疫杂交显示,该药物能增加自噬相关基因LC3的表达,并于刺激后4h达到高峰;除了能使细胞凋亡外,Trog也可以造成细胞的坏死。【结论】上述结果表明,曲格列酮可以引起混合型细胞死亡。; 张蔚孟祥爱闫金国姜学军; 关键词：曲格列酮自噬 LC3 细胞程序性死亡

Src与胶原同源插头蛋白(Shc)调控曲格列酮引起的PAE细胞自噬: 2013年; 【目的】明确Src与胶原同源插头蛋白(Src homology and collagen homology,Shc)调控曲格列酮(troglitazone,TZ)引起的猪血管内皮(porcine aortic endothelial,PAE)细胞自噬的机制。【方法】我们先利用激光共聚焦显微镜、蛋白免疫杂交检测了TZ引起的PAE细胞自噬;然后通过siRNA干扰敲降Shc,转染wtShc、3mShc等质粒的方法确定了p52Shc参与自噬的调控;最后通过siRNA干扰敲降Ulk1得到最终结论。【结果】通过研究发现,敲降Shc,会增加细胞的自噬;而过量表达p52Shc抑制了TZ引起的细胞自噬;p52Shc抑制自噬与其自身的酪氨酸磷酸化位点Tyr239、Tyr240和Tyr317相关;同时发现,p52Shc能抑制自噬调节分子磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)及其下游底物Unc51样激酶1(UNC-51-like kinase-1,Ulk1)的活性。【结论】Shc通过调控AMPK与Ulk1的磷酸化调节TZ引起的细胞自噬。; 袁栋栋吴向琴陈秀玲姜学军; 关键词：KINASE

重组蛋白Cox7a2原核表达及鉴定: 2006年; 目的:从原代培养的小鼠睾丸Leyd ig细胞中克隆Cox7a2基因,构建pGEX4T-1-Cox7 a2载体,表达和鉴定重组蛋白。方法:应用RT-PCR方法从原代培养的小鼠睾丸Leyd ig细胞中克隆Cox7 a2,利用BamH I和EcoR I酶切位点把Cox7a2克隆到pGEX4T-1载体,酶切和测序鉴定后,诱导重组蛋白的表达,进行纯化后,利用蛋白免疫印迹进行鉴定。结果:从原代培养的小鼠睾丸Leyd ig细胞克隆到Cox7a2完整的编码序列,构建了pGEX4T-1-Cox7 a2载体,表达了预期相对分子质量的融合蛋白,并经免疫印迹检测鉴定。结论:成功克隆Cox7a2,表达纯化了其融合蛋白,为基因的功能研究奠定了前期基础。; 陈亮辛钟成姜学军田龙袁亦铭刘刚宋卫东郭应禄; 关键词：COX7A2 线粒体睾丸小鼠

一种提高哺乳动物细胞活力的方法及应用: 本发明公开了一种提高哺乳动物细胞系细胞活力的方法及应用。通过构建人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因PTEN缺陷型哺乳动物细胞系得以实现其高活力；在此基础上，联合敲除乳酸脱氢酶LDHA，抑制乳酸积累，提高外源...; 杨怀义侯卜琳张彤阳姚明华陆红范婷文姜学军

细胞自噬及真菌中自噬研究概述被引量：10: 2015年; 细胞自噬是真核生物中广泛存在的、主要依赖于溶酶体或液泡的保守的降解途径,通过降解细胞内过多或异常的蛋白、细胞器等以维持正常的细胞功能。近10年来自噬研究方面的飞速进展显示出自噬与癌症、神经退行性疾病、衰老及心脏病等人类疾病相关。与此同时,自噬在丝状真菌的生长、形态和发育等方面发挥着重要作用,特别是在丝状真菌的细胞分化过程中,自噬起到了关键性作用,如致病性生长、程序性细胞死亡及孢子形成。本文主要论述了什么是自噬,自噬的检测方法及以真菌为对象的自噬研究进展。; 闫思源姜学军; 关键词：细胞自噬酵母丝状真菌

真菌次级代谢产物的分离及抗肿瘤活性的机理研究: 真菌是生物界中一个庞大的类群,在自然界分布极广,可以产生许多具有良好生物活性的次级代谢产物,其中包括抗菌、抗肿瘤、抗虫和抗氧化活性。这受到越来越多天然产物学家和生物学家的关注。在本课题中,我们分离到27个化合物,其中9个...; 郭龙芳刘玲刘述春姜学军; 关键词：自噬; 文献传递

Necrostatin-1抑制白色念珠菌诱导的巨噬细胞自噬而影响免疫应答被引量：1: 2016年; 随着现代医疗技术的发展,人口老龄化加剧,抗生素滥用等降低人体免疫力的因素越来越多,使得由白色念珠菌Candida albicans感染引起的疾病发生率越来越高。本研究通过使用程序性坏死的选择性抑制剂Necrostatin-1,初步探索了细胞自噬和程序性死亡在巨噬细胞抗白色念珠菌感染中的作用。研究表明:细胞自噬参与了白色念珠菌侵染巨噬细胞的过程,而Necrostatin-1可能通过抑制白色念珠菌感染引起的自噬促进IL-6的表达,并抑制TNF-α(肿瘤坏死因子α)的表达,进而对白色念珠菌引起的天然免疫反应产生影响。细胞自噬在抗真菌感染方面的研究已有报道,而程序性坏死在抗真菌感染方面的研究鲜有报道,同时Necrostatin-1在巨噬细胞抗白色念珠菌感染中的作用尚未见报道。本研究对白色念珠菌侵染机理的探索具有一定的意义。; 陈同洋秦鹏钧孙慧梁伟鸿姜学军胡风庆; 关键词：程序性坏死细胞自噬天然免疫 IL-6

Cox7a2荧光载体构建及其在小鼠睾丸Leydig细胞表达和定位研究被引量：2: 2006年; 目的构建Cox7a2的荧光表达载体,研究其在小鼠睾丸Leydig细胞中的表达和定位。方法原代培养小鼠睾丸Leydig细胞并利用3β-HSD染色法鉴定,应用PCR方法研究Cox7a2在小鼠睾丸Leydig细胞中的表达。利用BglⅡ和EcoRⅠ酶切位点把Cox7a2克隆到pEYFP-N1。细胞转染和细胞荧光显微镜技术观察YFP-Cox7a2定位。结果Cox7a2表达在原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中。绿色荧光的YFP-Cox7a2和红色荧光的线粒体标记物- Mitotracker有完全的共定位。结论Cox7a2在小鼠睾丸Leydig细胞表达,成功构建Cox7a2真核荧光蛋白表达载体,明确YFP-Cox7a2定位在Leydig细胞的线粒体。这些结果将对老年男性睾丸间质细胞合成功能障碍的研究提供重要的信息。; 陈亮辛钟成刘刚袁亦铭田龙郭应禄姜学军; 关键词：COX7A2 睾丸间质细胞

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姜学军

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