周晓杨
- 作品数：14 被引量：12H指数：2
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金重庆市科技创新能力建设计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 敲低小鼠内源性CYP3A酶的shRNA分子、重组表达载体及其制备方法和应用
- 本发明公开了敲低小鼠内源性CYP3A酶的shRNA分子，其核苷酸序列如SEQIDNo.6所示，还公开了含有该shRNA分子的重组表达载体pRIME-CMV-eGFP-miR-shRNA以及该载体的制备方法，还公开了该sh...
- 王勇魏泓庞浩周晓杨王露露刘昌峨刘勤
- 文献传递
- 重组慢病毒滴度的检测方法
- 本发明公开了慢病毒载体的滴度检测方法，具体为运用流式细胞分选法检测对照病毒滴度，将待测病毒与对照病毒在相同条件下同时感染相同数量的靶细胞，分别提取待测病毒与对照病毒感染后的靶细胞的总DNA，通过相对定量PCR检测获得待测...
- 魏泓王勇刘宇郭科男刘昌峨江雯周晓杨刘勤王露露
- 残留剂量头孢曲松长期作用对SPF级Balb/c小鼠肠道菌群的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究残留剂量头孢曲松的长期作用对SPF级Balb/c小鼠肠道菌群的影响。方法通过随机饮水方式,连续45 d分别给予SPF小鼠3个浓度的低剂量头孢曲松,模拟残留剂量抗生素的持续作用,活菌计数研究菌群数量变化。结果 300μg/ml及30μg/ml头孢曲松水溶液持续作用,小鼠肠道菌群厌氧总菌、乳杆菌和肠杆菌数量均出现先降后升的趋势,而肠杆菌数量异常增殖,双歧杆菌数量显著减少(P<0.01)且无法恢复,肠球菌无显著变化(P>0.05);3μg/ml头孢曲松处理后小鼠肠道肠杆菌数量显著升高,其余检测细菌数量无显著影响(P>0.05)。结论 300、30及3μg/ml头孢曲松水溶液持续处理45 d均会导致小鼠肠道菌群失调,菌群失调程度与头孢曲松浓度密切相关。
- 唐欢李伟周晓杨袁静曾本华魏泓
- 关键词：头孢曲松肠道菌群食品安全
- 人sCD40L转基因小鼠模型的构建
- 2012年
- 目的研究阻断CD40-CD40L共刺激信号通路对移植皮肤免疫排斥反应的影响。方法通过RT-PCR技术克隆了呈可溶性表达的CD40L分子胞外区(sCD40L),利用K14启动子构建了sCD40L皮肤特异性表达载体,并利用该载体制备了转基因小鼠。结果所克隆的CD40L胞外区片段其大小及序列符合预期;以哺乳动物表达载体PCI为骨架,通过DNA重组,获得了含K14启动子和sCD40L编码区的皮肤特异性表达载体K14-sCD40L;通过显微注射和胚胎移植,PCR筛选检测:49只G0代小鼠有1只小鼠扩增出特异性条带,阴性对照无条带。结论成功建立sCD40L转基因阳性小鼠。
- 艾必燕樵星芳周晓杨王露露杨扬陈建康刘勤
- 关键词：转基因小鼠SCD40L
- 两种饲料对巴马香猪肠道菌群多样性的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究正常混合饲料和玉米面对巴马香猪肠道菌群多样性的影响。方法使用PCR-DGGE技术研究其肠道菌群的多样性,16S DNA测序技术研究其差异性。结果食用同种饲料的巴马香猪DGGE谱带相似性较高,同时存在个体差异;2种饲料食养的巴马香猪肠道菌群丰富度和多样性指数差异无显著性,而均匀度差异有极显著性;16S DNA测序显示,混合饲料组和玉米面组的特异性菌种分别为Coprococcus eutactus、Clostridium bar-tlettii和Bifidobacteriumanimalis subsp、Streptococcus infantarius subsp。结论不同饲料可导致巴马香猪肠道菌群产生差异。
- 陈玉龙宋玉东唐欢周晓杨张志学袁静魏泓王槐志
- 关键词：肠道菌群混合饲料玉米面
- 重组慢病毒滴度的检测方法
- 本发明公开了慢病毒载体的滴度检测方法，具体为运用流式细胞分选法检测对照病毒滴度，将待测病毒与对照病毒在相同条件下同时感染相同数量的靶细胞，分别提取待测病毒与对照病毒感染后的靶细胞的总DNA，通过相对定量PCR检测获得待测...
- 魏泓王勇刘宇郭科男刘昌峨江雯周晓杨刘勤王露露
- 文献传递
- 巴马小型猪肝硬化前后肠道乳杆菌的比较研究
- 2010年
- 目的比较巴马小型猪诱导型肝硬化造模前(正常猪)和造模成功后(肝硬化猪)肠道乳杆菌的变化情况,探讨小型猪肝硬化模型在肝硬化肠道微生态研究中的适用性。方法收集肝硬化造模前和CCl4诱导肝硬化造模成功后巴马小型猪的新鲜粪便,提取粪便总菌DNA,用乳杆菌特异性引物进行PCR扩增,对扩增产物进行变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel-Electrophoresis,DGGE),即用PCR-DGGE分析巴马小型猪肝硬化前后肠道乳杆菌的相似性和多样性。结果聚类分析和主成分分析显示巴马小型猪肝硬化前(正常猪)和肝硬化后混杂排列,无明显界限;多样性数据分析显示巴马小型猪肝硬化前后肠道乳杆菌的丰富度(S)、微生物区系Shannon-Wiener指数(H′)和均匀度(E)差异均无统计学意义(P>0.05)。结论巴马小型猪肝硬化后肠道乳杆菌与正常猪比较差异无统计学意义。
- 周晓杨唐欢李伟魏泓
- 关键词：巴马小型猪肝硬化乳杆菌PCR-DGGE
- 融合蛋白NLS-I-SceI在制备介导哺乳动物基因转移的试剂中的应用
- 本发明公开了含核定位序列NLS的融合蛋白NLS-I-SceI在制备介导哺乳动物基因转移的试剂中的应用，融合蛋白NLS-I-SceI的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，由核定位序列NLS与巨核酶I-SceI组成，核定位序...
- 王勇魏泓周晓杨向鹏英
- 文献传递
- SPF级KM小鼠与BALB/c小鼠肠道总菌多样性的比较
- 2010年
- 目的分析SPF级封闭群KM小鼠及近交系BALB/c小鼠的肠道菌群总菌多样性,比较两个不同遗传背景肠道总菌的丰富度、Shannon-Wiener指数和均匀度。方法收集SPF级KM小鼠和BALB/c小鼠新鲜粪便,提取粪便总菌DNA,用基于细菌16S rDNA序列的变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析粪便总菌多样性。结果 SPF级KM小鼠及BALB/c小鼠粪便总菌多样性差异无统计学意义(P>0.05),品系内不同性别之间粪便总菌多样性差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论选择SPF级小鼠进行微生态学相关研究时,封闭群KM小鼠及近交系BALB/c小鼠均可作为选择对象,同时可忽略菌群的性别差异。
- 李伟唐欢周晓杨魏泓
- 关键词：KM小鼠BALB/C小鼠
- 慢病毒介导HLA-G转基因小鼠的建立被引量：1
- 2012年
- 目的以慢病毒作为载体建立HLA-G转基因小鼠,为研究HLA-G与移植免疫提供模型动物。方法利用FUW载体,构建含有HLA-G编码序列的慢病毒表达载体FUW-HLA-G。用磷酸钙沉淀法将包装质粒psPAX2、PMD2.G与重组慢病毒载体质粒FUW-HLA-G共转染293FT细胞,包装成慢病毒。通过同步转染含有绿色荧光标记基因的慢病毒质粒FUGW为参照,测定FUW-HLA-G病毒液的滴度。用显微注射法将浓缩后的病毒液注射至FVB/N小鼠1-细胞期胚胎透明带下,建立HLA-G转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因整合,用RT-PCR检测转基因在转录水平的表达,用Western blot检测HLA-G蛋白的表达。结果载体BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切结果和测序结果显示重组的慢病毒质粒与所设计的序列一致。浓缩和纯化后的病毒液滴度达到109TU/ml以上,符合用慢病毒制备转基因小鼠的要求。PCR筛选出阳性鼠6只,RT-PCR与Western blot检测结果表明HLA-G基因在F0和F1代转基因小鼠中均有表达。结论通过慢病毒介导的基因转移,成功建立了表达人HLA-G蛋白的转基因小鼠,为研究HLA-G的功能及其在器官或组织移植中的效应提供了动物模型。
- 王露露刘勤周晓杨刘昌峨王勇魏泓
- 关键词：HLA-G慢病毒转基因小鼠
