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原代大鼠脑毛细血管内皮细胞培养与鉴定被引量：3: 2014年; 目的介绍一种从大鼠脑组织中分离培养原代大鼠脑血管内皮细胞(BCEC)的方法。方法采用酶消化、滤网机械分离结合右旋糖苷密度离心的方法分离脑毛细血管段,接种在涂有明胶的培养皿培养BCEC。结果通过环境扫描电镜观察细胞形态,量子点超敏细胞免疫荧光鉴定,我们培养出来了纯度较高的原代BCEC。结论将分离的鼠脑毛细血管段置于涂有明胶的培养皿上培养原代BCEC的新方法比传统的培养法可以得到纯度更高的BCEC,为后期基于BCEC为载体的动物实验奠定了细胞基础。; 熊志勇姜晓兵王旋孙云卢高方赵洪洋; 关键词：原代培养

鼠白细胞介素-33真核质粒的构建及其在GL261中的稳定表达: 2013年; 目的构建鼠白细胞介素．33（IL-33）真核表达质粒，建正并检测稳定表达IL-33的细胞株GL261。方法从Genebank找出鼠IL-33基冈全长序列（801bp），人一合成、装载于表达载体pEZ—M03，扩增后酶切鉴定。将鉴定正确的质粒转染的小鼠胶质瘤细胞G1261，并用浓度为200mg／L的G4l8筛选出阳性克隆，采用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）检测目的基因表达量；Westernblot法检测目的蛋白的表达量，并观察转染后的G1261细胞体外生长状况。结果成功构建鼠IL-33真核质粒pEZ—M03-raiL33，经过浓度为20mg／L的G418T作液筛选mr稳定高表达鼠IL-33的细胞株GL261，且其生长状态未受到转染基凶的影响（P〉0．05）。Real—timePCR检测目的基因在瞬转、稳转细胞株中皆为高表达（P〈0．01）。Westernblot检测到稳转细胞株中目的蛋门明显商表达（P〈0．01）。结论本研究构建的鼠IL-33真干玄质粒能于GL261111获得稳定高表达。; 孙云赵洪洋王旋熊志勇卢高方姜晓兵; 关键词：白细胞介素-33

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卢高方