刘楠
- 作品数：14 被引量：20H指数：3
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- bcr-abl基因免疫诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞杀伤功能
- 2001年
- 目的 研究 bcr- abl融合基因免疫在慢性髓系白血病(chronic myelogenous leukem ia CML )中的作用以及探讨CML 基因免疫治疗的可行性 .方法 设计两条引物扩增 bcr-abl融合位点两侧约 490 bp大小的 c DNA,经测序鉴定正确后 ,将其克隆至真核表达载体 pc DNA3.1,通过电穿孔法转染至 p815细胞 ,应用 G418筛选建立稳定的靶细胞 ,同时将重组真核表达载体肌肉免疫 BAL B/ c小鼠以获取特异的效应细胞 ,乳酸脱氢酶 (L DH)法检测特异性杀伤率 .结果 1PCR扩增出可用于基因免疫的位于 bcr- abl融合基因位点两侧的490 bp大小的 c DNA,序列测定除第 45 2位碱基 C突变为 T外其余序列均正确 ;2构建了重组真核高效表达载体 ,命名为pc DNA/ bcr- abl;3G418梯度筛选建立了稳定表达该融合基因的细胞系 ,逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)检测到该细胞系有 bcr- abl m RNA水平的表达 ;4bcr- abl基因免疫后的小鼠能有效诱导出特异性细胞毒 T细胞 (cytotoxic T lymph-cyte,CTL) .结论 位于融合位点两侧的 bcr- abl基因肌肉免疫小鼠能够诱导特异性 CTL ,杀伤 bcr-
- 刘楠孙秉中冯琦高杰英罗振革彭虹刘永全
- 关键词：ABL细胞毒性BCR-ABL
- AGEs通过SDF-1/CXCR4轴信号通路对心肌微血管内皮细胞血管新生的影响及机制被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨AGEs通过刺激SDF-1/CXCR4轴信号系统对心肌微血管内皮细胞的增值、迁移、管样结果形成的影响以及AMD3100对其的干预作用。方法:用不同浓度的AMD3100作用于浓度为200mg/L的AGEs共孵育的CMECs24h,用MTT法检测细胞活力及增殖能力,并选择合适的干扰浓度(抑制效果居中)。随机选取加入AGEs200ml/L的CMECs,加入合适浓度的AMD3100,分别作用24、48、72h,采用MTT法测定AGEs处理前后细胞增值率的变化,并检测AMD3100对增值率的影响;毛细血管管腔样结构形成实验检测对CMECs血管新生的影响和AMD3100对其阻断作用的影响。结果:心肌微血管内皮细胞增殖能力和迁移能力在24h、48h、72h有显著增强;并促进了心肌微血管内皮细胞管样形成(vsP<0.05);CXCR4受体阻断剂AMD3100作用于细胞后,可以显著阻断AGEs对心肌微血管内皮细胞增殖能力和迁移能力和管腔形成(vsP<0.05)的影响。结论:AGEs在早期显著增强了心肌微血管内皮细胞的增殖、迁移和管样结构形成的能力,其作用机制可能与SDF-1/CXCR4轴信号通路有关。
- 粟妍晖李飞王冬娟刘楠王海昌
- 关键词：糖基化终产物基质细胞衍生因子-1心肌微血管内皮细胞
- 不同波形低频脉冲磁场对大鼠心肌微血管内皮细胞的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 研究在固定时间和频率的情况下不同波形的低频脉冲磁场（LF-PMFs）对大鼠心肌微血管内皮细胞（CMECs）增殖、细胞周期、凋亡、迁移、细胞骨架以及一氧化氮（NO）分泌能力的影响.方法 磁场频率为15hz,磁场强度分别为0.6mT、1.2mT、1.8mT、2.4mT,作用时间为4h/d,连续作用5d的情况下,以矩形和三角形2种波形磁场分别作用于离体大鼠心肌微血管内皮细胞,对照组不加干预.结果 矩形波磁场促进内皮细胞增殖（P〈0.01）,使其细胞周期分布发生改变（P〈0.01）,DNA合成期（S期）和合成后期（G2期）细胞比例增加,凋亡率降低（P〈0.05）,细胞迁移能力显著增强（P〈0.01）,曝磁后细胞骨架结构发生重构,应力纤维增多,NO分泌能力增加（P〈0.01）;三角波磁场0.6mT组和2.4mT组促使CMECs增殖（P〈0.05）,细胞周期改变（P〈0.05）,凋亡率降低（P〈0.05）,迁移能力增强（P〈0.05）,细胞骨架重构,NO分泌能力提高（P〈0.05）.而三角波磁场1.2mT组和1.8mT组上述效果均不明显（P〉0.05）.结论 大鼠CMECs的增殖、细胞周期、凋亡、迁移、细胞骨架以及NO分泌能力除受LF-PMFs频率和强度影响外,还受磁场波形的影响.
- 刘楠李飞王海昌王晨粟妍晖谢晓波
- 关键词：低频脉冲磁场心肌微血管内皮细胞细胞周期细胞骨架
- 物理诊断学心电图教学难点及原因初探被引量：7
- 2018年
- 我国医学教育中心电图(ECG)教学与临床实际脱节、教学质量低的现象长期存在且未引起重视,造成了教学资源浪费、临床医生ECG技能欠缺等普遍现象。本文从教学实际经验出发总结了目前ECG教学当中存在的难点和原因,为进一步改进ECG教学提供了基础。
- 刘楠陶凌王海昌李妍梁蓉黄亚渝王晨
- 关键词：高等医学教育教学方法心电图
- Apelin对缺血—再灌注损伤导致的心脏功能障碍的保护作用及机制研究
- 背景与目的
本实验室于2008年发现Apelin能够增强心肌细胞SERCA功能并且增加钙瞬变幅度。本研究在以上研究基础上进一步研究Apelin对心肌缺血再灌注的保护作用。不同于已有的大量关于缺血再灌注的保护作用的...
- 刘楠
- 关键词：SERCARYR肌浆网氧化修饰心肌代谢
- 文献传递
- 辛伐他汀对雷帕霉素作用下的大鼠心肌微血管内皮细胞的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨辛伐他汀(SIM)对雷帕霉素(RAPA)作用下大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs)增殖、迁移、凋亡及一氧化氮(NO)分泌的影响。方法:用不同浓度(0、0.01、0.1、1及10μg/L)的RAPA处理CMECs 24 h,分别采用MTT比色法及transwell法检测细胞的增殖能力和迁移能力,并选择合适干扰浓度(抑制效果居中,即对细胞的增殖及迁移有一定的抑制作用,但不会完全抑制,选择浓度为1μg/L)。对已加入RAPA(1μg/L)的细胞中加入不同浓度(0、0.01、0.1、1及10μmol/L)的SIM,共孵育24 h,采用MTT比色法检测细胞的增殖能力,用transwell法检测细胞迁移能力,用Hoechst染色法计算细胞的凋亡率,用Griess反应检测NO的分泌活性。结果:与对照组相比较,单纯以RAPA干预细胞后,细胞增殖和迁移的能力均显著下降(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性。而在RAPA基础上加入不同浓度的SIM后,与单纯RAPA组比较,细胞的增殖能力及迁移能力均显著增强(P<0.05,P<0.01),NO的分泌活性明显升高(P<0.05),细胞的凋亡率明显下降(P<0.05)。结论:RAPA能抑制CMECs增殖及迁移、NO分泌并诱导其凋亡。而将CMECs与SIM共孵育24 h后,对RAPA诱导的细胞损伤具有抑制作用。
- 谢晓波王东娟王晨潘庆刘楠李兰荪王海昌
- 关键词：辛伐他汀雷帕霉素心肌微血管内皮细胞
- 慢性髓系白血病bcr-abl融合基因的克隆及其在COS-7细胞中的表达
- 2000年
- 目的克隆慢性髓系白血病(CML)融合基因bcr abl的cDNA序列 ,并在真核细胞中表达。方法以设计的两条引物扩增bcr abl融合位点两侧的cDNA ,测序后克隆至真核表达载体 pcDNA3.1 ,转染COS 7细胞。取常规培养的细胞进行RT PCR鉴定。结果①PCR扩增出490bp大小的cDNA ,其序列测定除第452位的碱基C突变为T外 ,其余序列均正确。②RT PCR法检测到转染细胞系中 ,有bcr ablmRNA的表达。结论成功地克隆了CML融合基因bcr abl融合位点两侧的490bp 序列并表达 ,为研制bcr abl基因疫苗治疗CML奠定了基础。
- 刘楠孙秉中冯琦高杰英刘永全罗振革
- 关键词：慢性髓系白血病BCR-ABL融合基因克隆
- Notch1在TGF-β1诱导心肌成纤维细胞向肌成纤维细胞转化中的作用
- 2009年
- 目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)诱导心肌成纤维细胞(CFs)向肌成纤维细胞(MFB)转分化过程中Notch1的变化情况,探讨在此转分化过程中Notch1的可能作用.方法:体外分离培养CFs,以10μg/LTGF-β1诱导CFs向MFB转分化.实验分为对照组,TGF-β1作用24,48,72h组,采用消化法测定羟脯氨酸(HYP)含量;免疫荧光、免疫印迹法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;实时定量PCR、免疫印迹法测定Notch1 mRNA及蛋白表达.利用γ分泌酶抑制剂DAPT(75μmol/L)阻断Notch1受体活化.实验分对照组,DAPT作用24,48,72h组,检测SMA及胶原的表达变化.结果:TGF-β1作用后,与对照组相比较α-SMA,HYP表达量随TGF-β1诱导时间的增加呈上升趋势,而Notch1则呈下降趋势,均以72h最显著(P<0.01);加入DAPT后,与对照组相比较α-SMA,HYP表达量随DAPT作用时间增加呈上升趋势,以72h最显著(P<0.01).结论:TGF-β1可以诱导CFs向MFB转分化,Notch1在此过程中的表达呈下降趋势,而DAPT阻断Notch1活化后可以促进CFs向MFB转分化.
- 潘庆范延红谢晓波刘楠王海昌
- 关键词：心肌成纤维细胞肌成纤维细胞NOTCH转化生长因子
- AGEs对心肌微血管内皮细胞血管新生和管腔形成的影响
- 2011年
- 目的:观察糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)对心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascu-lar endothelial cells,CMECs)增殖能力、迁移能力,以及血管新生和管腔形成的作用和影响。方法:以不同浓度(100、200和400 mg/L)的AGEs作用于CMECs 48 h,分别采用MTT比色法检测细胞的增殖能力;用Transwell法检测细胞的迁移能力;用毛细血管管腔结构形成试验检测AGEs对血管新生的影响。结果:CMECs在以不同浓度(100、200及400 mg/L)的AGEs作用48 h后,MTT比色法检测显示,吸光值(分别为0.1195±0.0049、0.1422±0.0058及0.1783±0.0220)明显高于对照组(0.0955±0.0161,P<0.05,P<0.01);Transwell法检测细胞数[分别为(24.89±6.234)、(32.89±6.990)及(55.56±10.27)个]均高于对照组[(13.89±4.622)个,P<0.05,P<0.01];管样结构的长度[分别为(3.261±0.7016)、(4.737±1.129)及(6.687±1.308)mm/mm2]均高于对照组[(2.089±0.6723)mm/mm2,P<0.05,P<0.01]。结论:AGEs可以促进CMECs血管新生和管腔结构的形成,且与其浓度呈正相关。
- 粟妍晖李飞刘楠王东娟王海昌
- 关键词：糖基化终产物心肌微血管内皮细胞血管新生管腔形成
- 三角波形低频脉冲磁场对大鼠心肌微血管内皮细胞增殖、迁移和细胞周期的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:研究在固定时间和频率下,三角波形的低频脉冲磁场(LF-PMF)对大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs)增殖、迁移以及细胞周期的影响。方法:实验分为4组(对照组,1.0mT组,1.4mT组,1.8mT组)。对照组不加磁场干预;其余各组分别在频率为15 Hz,磁场强度分别为1.0mT、1.4mT和1.8mT,时间为4 h/d,连续照射3 d的条件下,用三角波形作用离体培养的大鼠CMECs。利用MTT法检测细胞增殖情况,transwell法观察细胞迁移状况,流式细胞仪技术检测细胞周期变化。结果:1.4 mT和1.8 mT组磁场促进CMECs增殖的作用差异显著[(0.200±0.043)A值,vs.(0.159±0.037)A值,(0.225±0.042)A值,vs.(0.159±0.037)A值,P<0.05]。迁移能力与对照组相比也有显著提高[(27.20±4.76)个/视野vs.(22.60±4.77)个/视野,(33.80±3.19)个/视野vs.(22.60±4.77)个/视野,P<0.05]。CMECs在细胞周期中的分布发生改变,DNA合成期(S期)和合成后期(G2期)细胞的比例增加。1.0mT组LF-PMF胞对细胞增殖、迁移以及细胞周期的影响均不明显。结论:低频脉冲磁场磁场对CMECs的生物学作用与磁场的强度相关,1.4mT和1.8mT组LF-PMF促进细胞增殖、迁移及使其DNA合成的能力提高。
- 刘楠李飞王海昌粟妍晖谢晓波潘庆
- 关键词：心肌微血管内皮细胞低频脉冲磁场细胞增殖细胞周期
